一种过表达fimH基因的重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸中的应用制造技术

技术编号:21764698 阅读:23 留言:0更新日期:2019-08-03 19:49
本发明专利技术公开了一种过表达fimH基因的重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸中的应用。本发明专利技术借鉴医学上的致病性大肠杆菌形成生物膜的细胞相较于游离的细胞更适应极端环境,在已知fim操纵子调控的fimH基因可以调控大肠杆菌生物膜的形成,通过转录组分析发现了过表达fimH基因后氨基酸代谢通路的变化,为后期工业化过程中筛选其他高产氨基酸有机酸的重组菌株做好铺垫,最终达到提高产量、发酵速率和糖转化率的目的。

Application of a Recombinant Escherichia coli Overexpressing FimH Gene in Amino Acid Production by Fermentation

【技术实现步骤摘要】
一种过表达fimH基因的重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸中的应用
本专利技术涉及氨基酸发酵,具体涉及一种过表达fimH基因的重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸中的应用。
技术介绍
氨基酸在工业生产中应用十分广泛,例如动物饲料添加剂、人类食物调味品以及化妆品和医疗产品的原料。三羧酸循环中,如柠檬酸等有机酸在食品添加剂、化学制造及医疗产品领域亦有其广泛应用。目前氨基酸和有机酸的生产的主要方法有三种:微生物发酵法、化学合成法以及酶法。微生物发酵法以其具有生产原料来源广泛、成本低、在生产过程中对环境污染较小、操作容易安全、菌种多种多样并且可以进行大规模生产等优势,现已成为氨基酸和有机酸生产的主流方法。随着分子生物学技术的成熟和发展,运用基因工程技术对菌株的氨基酸和有机酸代谢途径进行分子改造,成为当今获得氨基酸和有机酸高产菌株的有效手段。大肠杆菌作为一种最常用基因工程菌,具有生长快速且稳定、代谢通路清晰、成本低和基因编辑工具易获取等特点。虽然利用大肠杆菌生产苏氨酸普遍运用到微生物发酵实验中,但相对于氨基酸和有机酸行业的需求,其速率依然较慢。因此基因工程菌高产氨基酸的改造成为生产应用中的关键。菌毛在大肠杆本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种过表达fimH基因的重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸中的应用,所述氨基酸为天冬氨酸、精氨酸或谷氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种过表达fimH基因的重组大肠杆菌在发酵生产氨基酸中的应用,所述氨基酸为天冬氨酸、精氨酸或谷氨酸。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述过表达fimH基因的重组大肠杆菌的构建方法包括如下步骤:(1)提取原始大肠杆菌的基因组;(2)以步骤(1)提取得到的基因组为模板,采用PCR技术扩增fimH基因;(3)将步骤(2)得到的fimH基因插入pET-28a质粒的NcoⅠ/XbaⅠ酶切位点间,得到携带fimH基因的重组质粒;(4)将步骤(3)得到的重组质粒转化到E.coliDH5α的感受态细胞中,从E.coliDH5α中提取重组质粒;(5)将步骤(4)提取得到的重组质...

【专利技术属性】
技术研发人员:应汉杰陈天鹏陈勇刘娜任培芳俞莹余斌柳东欧阳平凯
申请(专利权)人:南京工业大学
类型:发明
国别省市:江苏,32

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