【技术实现步骤摘要】
一种侏儒蛤卵膜的分离方法
本专利技术属于海洋生物膜研究领域，具体涉及一种侏儒蛤卵膜的分离方法。
技术介绍
卵膜是包裹动物卵细胞的非细胞性被膜的总称，不同动物的卵膜，其形态结构及组成也大不相同，卵膜在卵细胞的保护和精卵识别过程发挥重要的作用。软体动物作为仅次于节肢动物的最大无脊椎动物类群，其卵膜结构呈现多样化的结构，总体来看其卵膜较厚，不易分离。侏儒蛤(Mulinialateralis)，属于软体动物门，帘蛤目，蛤蜊科，是一种小型的双壳埋栖贝类。它具有发育繁殖周期短(2个月左右，斑马鱼约为3个月)、体型小、产卵量大、早期发育贝壳透明等特点，其作为模式贝类的潜力为国际上所公认。侏儒蛤的卵细胞直径在40～50微米之间，卵细胞较小，并且卵膜和细胞质膜紧密贴合，分离和溶解也卵膜比较困难，这对侏儒蛤卵细胞结构、受精过程及侏儒蛤卵细胞的转基因研究带来诸多不便。因此，就需要首先分离出侏儒蛤的卵膜，但目前已有的卵膜分离方法对侏儒蛤的卵细胞分离效果都不好。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种侏儒蛤卵膜的分离方法，可以快速分离出侏儒蛤的卵膜，从而弥补现有技术的不足。本专利技术所提供的...
【技术保护点】
1.一种侏儒蛤卵膜的分离方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1)低渗处理：用海水浸泡卵细胞，在22～23℃混匀静置5min，使卵细胞吸水膨胀；2)破碎离心：用移液枪对步骤1)处理的卵细胞溶液进行反复吹吸抽打，直至出现浑浊状态，然后离心收集上层溶液；3)卵膜收集：吸取离心结束的上层溶液，置于20um孔径的细胞筛上，用灭菌的过滤海水反复冲洗2～3次，除去卵黄物质，然后将卵膜从细胞筛上吸取到离心管中4℃保存。
【技术特征摘要】
1.一种侏儒蛤卵膜的分离方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1)低渗处理：用海水浸泡卵细胞，在22～23℃混匀静置5min，使卵细胞吸水膨胀；2)破碎离心：用移液枪对步骤1)处理的卵细胞溶液进行反复吹吸抽打，直至出现浑浊状态，然后离心收集上层溶液；3)卵膜收集：吸取离心结束的上层溶液，置于20um孔径的细胞筛上，用灭菌的过滤海水反复冲洗2～3...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄晓婷，杨祖晶，李茉莉，秦贞奎，曾启繁，陆维，包振民，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：山东,37
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