一种精血补片提取液及其应用制造技术

本发明专利技术涉及一种精血补片提取液及其应用，所述精血补片提取液又精血补片提取而成，精血补片由以下重量份的组分制备而成：生晒参100份，红参100份，制何首乌200份，紫河车200份，五味子200份和陈皮120份；所述精血补片提取液在提高T细胞免疫活性中的应用。本发明专利技术的优点在于：本发明专利技术精血补片提取液在250ug/mL浓度时对于T细胞的增值有接近于两倍的刺激作用。

A Extract of Essential Blood Patch and Its Application

【技术实现步骤摘要】
一种精血补片提取液及其应用
本专利技术属于生物医药领域，特别涉及一种精血补片提取液及其应用。
技术介绍
《中华人民共和国卫生部药品标准》（中药成方制剂）第六册中具有用于神经衰弱，精神萎靡，头晕目眩心悸失眠的药物精血补片，该复方制剂由中药材生晒参100g，红参100g，制何首乌200g，紫河车200g，五味子200g，陈皮120g组成，上述原料共制成4600片。生晒参是方中主要药味，为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的干燥根及根茎，具有大补元气，复脉固脱，补皮益肺，生津，安神之功效。红参也是方中主要药味，为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.的栽培品经蒸制后的干燥根及根茎，具有大补元气，复脉固脱，益气摄血之功效。制何首乌为萝科植物何首乌PolygonummultiflorumThunb.的干燥块根的炮制加工品，具有补肝肾，益精血，乌须发，强筋骨之功效。紫河车为健康人的干燥太胖，具有温肾补精，益气养血之功效。五味子为木兰科植物北五味子Schisandrachinensis（Turcz.）Baill.的干燥成熟果实，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心之功效。陈皮为芸香科植物橘CitrusreticultaBlanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，具有理气健脾，燥湿化痰之功效。关于对精血补片的提取，以及在免疫细胞中的应用，经检索，目前还没有报道类似的专利文献。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种精血补片提取液及其应用，以挖掘精血补片新的应用。为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案为：一种精血补片提取液，其创新点在于：所述精血补片由以下重量份的组分制备而成：生晒参100份，红参100份，制何首乌200份，紫河车200份，五味子200份和陈皮120份；所述精血补片提取液是通过以下步骤制备而成：步骤1：精确称量精血补片9.2g置于一50mL的离心管中，然后向离心管中加入30mL的磷酸缓冲盐溶液，并振荡离心管混匀；步骤2：步骤1中精血补片与磷酸缓冲盐溶液混匀后，冰上超声粉碎，超声功率为45～80KHZ，每次超声处理6S停9S，共30min，共超声处理至少两次；步骤3：冰上超声处理后，将混匀的精血补片与磷酸缓冲盐溶液在10000rpm转速下离心30min，然后取上清液20mL，下沉淀物于65～75℃下烘干；步骤4：将步骤3中的上清液依次经0.22µm过滤膜和0.1µm过滤膜过滤，得到精血补片提取液，备用。一种上述的精血补片提取液的应用，其创新点在于：所述精血补片提取液在提高T细胞免疫活性中的应用。本专利技术的优点在于：本专利技术精血补片提取液及其应用，通过对精血补片进行提取，并通过提取液进行免疫细胞株增殖试验，进而发现本专利技术精血补片提取液在250ug/mL浓度时对于T细胞的增值有接近于两倍的刺激作用。附图说明下面结合附图和具体实施方式对本专利技术作进一步详细的说明。图1为本专利技术精血补片提取液免疫细胞增殖图。具体实施方式下面的实施例可以使本专业的技术人员更全面地理解本专利技术，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。实施例本实施例精血补片提取液，该精血补片由以下重量份的组分制备而成：生晒参100份，红参100份，制何首乌200份，紫河车200份，五味子200份和陈皮120份；所述精血补片提取液是通过以下步骤制备而成：步骤1：精确称量精血补片9.2g置于一50mL的离心管中，然后向离心管中加入30mL的磷酸缓冲盐溶液，并振荡离心管混匀；步骤2：步骤1中精血补片与磷酸缓冲盐溶液混匀后，冰上超声粉碎，超声功率为45～80KHZ，每次超声处理6S停9S，共30min，共超声处理至少两次；步骤3：冰上超声处理后，将混匀的精血补片与磷酸缓冲盐溶液在10000rpm转速下离心30min，然后取上清液20mL，下沉淀物于65～75℃下烘干；步骤4：将步骤3中的上清液依次经0.22µm过滤膜和0.1µm过滤膜过滤，得到精血补片提取液，备用。对精血补片提取液进行免疫细胞株增殖试验，包括如下步骤：步骤1：使用RPMI1640（10%FBS、1%双抗）完全培养基梯度稀释制备含水提取液1000、500、250、100、20ug/mL；步骤2：取对数期生长良好的Raw264.7（巨噬细胞）、CTLL-2（T细胞）、NALM-6（B细胞）重悬计数；将密度调至5*10^4/mL，100ul/孔接种于96孔板，每孔加入100ul制备好的水提物完全培养基，每个浓度三个复孔，并设置0浓度对照孔；步骤3：48h后，加入细胞活性检测试剂CCK8,20ul/孔，37℃培养4小时；步骤4：酶标仪读取OD450nm读数，其结果见下表1和图1。表1精血补片提取液免疫细胞增殖（%）由表1和图1可以看出，精血补片提取液在250ug/mL浓度时对于T细胞的增值有接近于两倍的刺激作用，进一步提高浓度没有发现有进一步增殖作用现象。在同等浓度范围内，JH01对于巨噬细胞和B细胞的刺激作用则不明显。以上显示和描述了本专利技术的基本原理和主要特征以及本专利技术的优点。本行业的技术人员应该了解，本专利技术不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本专利技术的原理，在不脱离本专利技术精神和范围的前提下，本专利技术还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本专利技术范围内。本专利技术要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种精血补片提取液，其特征在于：所述精血补片由以下重量份的组分制备而成：生晒参100份，红参100份，制何首乌200份，紫河车200份，五味子200份和陈皮120份；所述精血补片提取液是通过以下步骤制备而成：步骤1：精确称量精血补片9.2g置于一50mL的离心管中，然后向离心管中加入30mL的磷酸缓冲盐溶液，并振荡离心管混匀；步骤2：步骤1中精血补片与磷酸缓冲盐溶液混匀后，冰上超声粉碎，超声功率为45～80KHZ，每次超声处理6S停9S，共30min，共超声处理至少两次；步骤3：冰上超声处理后，将混匀的精血补片与磷酸缓冲盐溶液在10000rpm转速下离心30min，然后取上清液20mL，下沉淀物于65～75℃下烘干；步骤4：将步骤3中的上清液依次经0.22µm过滤膜和0.1µm过滤膜过滤，得到精血补片提取液，备用。

【技术特征摘要】
1.一种精血补片提取液，其特征在于：所述精血补片由以下重量份的组分制备而成：生晒参100份，红参100份，制何首乌200份，紫河车200份，五味子200份和陈皮120份；所述精血补片提取液是通过以下步骤制备而成：步骤1：精确称量精血补片9.2g置于一50mL的离心管中，然后向离心管中加入30mL的磷酸缓冲盐溶液，并振荡离心管混匀；步骤2：步骤1中精血补片与磷酸缓冲盐溶液混匀后，冰上超声粉碎，超声功率为45～80K...

【专利技术属性】
技术研发人员：王兆龙，王建新，何烨，徐佳佳，成凡钦，任金燕，李雅敏，
申请(专利权)人：精华制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32