一种索马鲁肽侧链的液相合成方法技术

本发明专利技术公开了一种索马鲁肽侧链的液相合成方法，将二甘醇胺与X基反应，使得二甘醇胺氨基端受X基保护，然后与溴乙酸苄酯反应羧基端做成苄基保护，分别脱除苄基和X基，脱除基团的两种产物进行偶联后并脱除X基，再与Fmoc‑谷氨酸偶联后脱除Fmoc，最后与18‑(叔丁氧基)‑18氧代十八烷酸偶联后脱除苄基即得索马鲁肽侧链。本发明专利技术方法合成方法过程可行、可控、成本低、产率高，适合于大规模生产，最终制备获得索马鲁肽侧链，可以经过修饰为OSu酯后在液相中直接组装至索马鲁肽主链上。

A liquid-phase synthesis method for side chains of somalurin

【技术实现步骤摘要】
一种索马鲁肽侧链的液相合成方法
本专利技术属于化学药物
，具体涉及一种索马鲁肽侧链的液相合成方法。
技术介绍
糖尿病(diabetesmellitus)是由胰岛素绝对或相对不足引起的以高血糖和其他并发症并存为特点的内分泌代谢常见病、多发病。中国糖尿病负担最重，患病人数已超过1.14亿人。胰高血糖素样肽-1(Glucagon-likepeptide-1,GLP-1)是一种重要的肠促胰岛素，相比传统糖尿病药物，它能够解决常规口服降糖药解决不了的β细胞凋亡这一难题。索马鲁肽(Semaglutide)被誉为全球最好的GLP-1激动剂，与人GLP-1有94％同源性，在降糖、减重、心血管系统获益以及安全性等方面表现出更大的优势。索马鲁肽将肽链第26位的赖氨酸位置连接上18碳脂肪二酸侧链，其可介导和促进索马鲁肽与白蛋白的强结合，降低肾清除率，相比C16侧链的利拉鲁肽，索马鲁肽侧链对白蛋白的亲和力增强了5～6倍，与白蛋白结合可以增大了本品的分子量，能够避免快速被肾脏清除并防止代谢性降解，延长体内半衰期。由于索马鲁肽的侧链可以看作是4个反应单元，工业上常用固相合成的方式偶联4次得到，再经过切割得到。但由于固相合成的原子经济性差，且侧链的原料相对较贵，因此，开发新的液相合成侧链的方法具有突出的实用价值和市场前景。索马鲁肽侧链结构式见(Ⅰ)关于索马鲁肽侧链合成的专利一共有三篇，分别是：[WO2009022013]、[WO2009115469]、[WO2009083549]，但均采用了固相合成Fmoc策略，将侧链看成是4个反应单元，在专利技术人了解的范围内，并没有发现该侧链的纯液相合成方法的报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种过程可行、可控、成本低、产率高，适合于大规模生产的索马鲁肽侧链的合成方法。为了解决上述技术问题，本专利技术采取的技术方案如下：一种索马鲁肽侧链的液相合成方法，包括如下步骤：(1)将二甘醇胺与X基反应，使得二甘醇胺氨基端受X基保护，得到化合物3；(2)将化合物3的羧基端做成苄基保护，得到化合物4；(3)将化合物4脱除苄基得到化合物5；将化合物4脱除X基得到化合物6；(4)将化合物5与化合物6偶联得到化合物7；(5)将化合物7脱除X基得到化合物8；(6)将化合物8与Fmoc-谷氨酸偶联得到化合物9；(7)将化合物9脱除Fmoc得到化合物10；(8)将化合物10与18-(叔丁氧基)-18氧代十八烷酸偶联得到化合物12；(9)化合物12脱除苄基即得索马鲁肽侧链；详细的合成路线如图1所示。具体地，步骤(1)中，所述X基为Fmoc、Boc或Trt，优选为Trt、Boc，更优选为Boc；二甘醇胺与X基的反应在有机溶剂A中进行，所述有机溶剂A为乙酸乙酯、二氯甲烷(DCM)、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物，优选为DCM。步骤(2)中，所述做成苄基保护具体为将化合物3与溴乙酸苄酯在有机溶剂B中，加入无机碱加热反应；所述的有机溶剂B为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物，优选为DMF；所述的无机碱为碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠或氢氧化钾，优选为碳酸钾；所述加热反应的温度为30-70℃，优选为40-60℃，最佳为50℃。步骤(3)中：所述脱除苄基的方式为将化合物4与钯碳在有机溶剂C中于室温下加氢反应，所述的有机溶剂C为甲醇、乙醇、丙醇、乙酸乙酯、乙酸丁酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、二甲基甲酰胺、碳酸二甲酯中的一种或几种的混合物，优选为乙酸乙酯；所述的钯碳中的钯的质量百分含量占钯碳总质量的5％，钯的用量占所需还原的肽的摩尔量的1％-20％，优选为1％-15％，最佳为10％；所述脱除X基的方式为将化合物4溶于有机溶剂D中，并加入酸，室温下反应3-10h，减压蒸馏除去有机溶剂D，食盐水洗涤、干燥，层析柱提纯得到产物；所述的有机溶剂D为甲苯、二氯甲烷DCM、乙腈、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙酸丁酯、N-N二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合，优选为DCM或乙酸乙酯，最佳为DCM；所述的酸为硫酸、盐酸、乙酸、甲酸或三氟乙酸TFA，优选为盐酸或三氟乙酸，优选为TFA，浓度为体积含量10-50％，优选为30％。步骤(4)中，所述的化合物5与化合物6在有机溶剂E、缩合试剂和有机胺作用下进行偶联反应；所述的有机溶剂E为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物，优选为乙酸乙酯；所述的缩合试剂为1-羟基苯并三氮唑(HOBt)，N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)、N，N’-二环己基碳二亚胺(DCC)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBop)或苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐(BOP)中的任意一种或几种的组合，优选为EDC·HCl，HOBt，DIC中的一种或几种，当HOBt和EDC·HCl混用时，优选的HOBt与EDC·HCl的摩尔比为1：0.5-2，更优选为1：0.9-1.1，最佳为1：1；所述偶联反应的温度为0-60℃，优选为10-40℃，最佳为30℃，反应时间为2.5-6h；反应产物经洗涤、干燥处理得到化合物7，洗涤的碱水为质量分数1％-15％的碳酸钾溶液，优选为5％的碳酸钾溶液。步骤(5)中，所述脱除X基的方式为将化合物4溶于有机溶剂F中，并加入酸，室温下反应3-10h，减压蒸馏除去有机溶剂F，食盐水洗涤、干燥，层析柱提纯得到产物；所述的有机溶剂F为甲苯、二氯甲烷DCM、乙腈、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙酸丁酯、N-N二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合，优选为DCM或乙酸乙酯，最佳为DCM；所述的酸为硫酸、盐酸、乙酸、甲酸或三氟乙酸TFA，优选为盐酸或三氟乙酸，优选为TFA，浓度为体积含量10-50％，优选为30％。步骤(6)中，所述化合物8与Fmoc--谷氨酸在有机溶剂G、缩合试剂和有机胺作用下进行偶联反应；所述的有机溶剂G为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物，优选为乙酸乙酯；所述的缩合试剂为1-羟基苯并三氮唑(HOBt)，N，N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)、N，N’-二环己基碳二亚胺(DCC)、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷(PyBop)或苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐(BOP)中的任意一种或几种的组合，优选为EDC·HCl，HOBt，DIC中的一种或几种，当HOBt和EDC·HCl混用时，优选的HOBt与EDC·HCl的摩尔比为1：0.5-2，更优选为1：0.9-1.1，最佳为1：1；所述偶联反应的温度为0-60℃，优选为10-40℃，最佳为30℃，反应时间为2.5-6h。步骤(7)中，所述脱除Fmoc的方式为取化合物9加入有机溶剂H中，冰浴下加入硫代苹果酸，而后加入有机碱，移至室温反应3-10h，用碱水洗涤有机相，而后蒸去有机溶剂H，得到化合物10；所述有机溶剂H为本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种索马鲁肽侧链的液相合成方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将二甘醇胺与X基反应，使得二甘醇胺氨基端受X基保护，得到化合物3；(2)将化合物3的羧基端做成苄基保护，得到化合物4；(3)将化合物4脱除苄基得到化合物5；将化合物4脱除X基得到化合物6；(4)将化合物5与化合物6偶联得到化合物7；(5)将化合物7脱除X基得到化合物8；(6)将化合物8与Fmoc‑谷氨酸偶联得到化合物9；(7)将化合物9脱除Fmoc得到化合物10；(8)将化合物10与18‑(叔丁氧基)‑18氧代十八烷酸偶联得到化合物12；(9)化合物12脱除苄基即得索马鲁肽侧链。

【技术特征摘要】
1.一种索马鲁肽侧链的液相合成方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将二甘醇胺与X基反应，使得二甘醇胺氨基端受X基保护，得到化合物3；(2)将化合物3的羧基端做成苄基保护，得到化合物4；(3)将化合物4脱除苄基得到化合物5；将化合物4脱除X基得到化合物6；(4)将化合物5与化合物6偶联得到化合物7；(5)将化合物7脱除X基得到化合物8；(6)将化合物8与Fmoc-谷氨酸偶联得到化合物9；(7)将化合物9脱除Fmoc得到化合物10；(8)将化合物10与18-(叔丁氧基)-18氧代十八烷酸偶联得到化合物12；(9)化合物12脱除苄基即得索马鲁肽侧链。2.根据权利要求1所述的液相合成方法，其特征在于，步骤(1)中，所述X基为Fmoc、Boc或Trt；二甘醇胺与X基的反应在有机溶剂A中进行，所述有机溶剂A为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物。3.根据权利要求1所述的液相合成方法，其特征在于，步骤(2)中，所述做成苄基保护具体为将化合物3与溴乙酸苄酯在有机溶剂B中，加入无机碱加热反应；所述的有机溶剂B为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物；所述的无机碱为碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠或氢氧化钾；所述加热反应的温度为30-70℃。4.根据权利要求1所述的液相合成方法，其特征在于，步骤(3)中：所述脱除苄基的方式为将化合物4与钯碳在有机溶剂中于室温下加氢反应，所述的有机溶剂C为甲醇、乙醇、丙醇、乙酸乙酯、乙酸丁酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、二甲基甲酰胺、碳酸二甲酯中的一种或几种的混合物，所述的钯碳中的钯的质量百分含量占钯碳总质量的5％，钯的用量占所需还原的肽的摩尔量的1％-20％；所述脱除X基的方式为将化合物4溶于有机溶剂D中，并加入酸，室温下反应3-10h，减压蒸馏除去有机溶剂D，食盐水洗涤、干燥，层析柱提纯得到产物；所述的有机溶剂D为甲苯、二氯甲烷、乙腈、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙酸丁酯、N-N二甲基甲酰胺中的一种或几种的混合；所述的酸为硫酸、盐酸、乙酸、甲酸或三氟乙酸，浓度为体积含量10-50％。5.根据权利要求1所述的液相合成方法，其特征在于，步骤(4)中，所述的化合物5与化合物6在有机溶剂E、缩合试剂和有机胺作用下进行偶联反应；所述的有机溶剂E为乙酸乙酯、二氯甲烷、四氢呋喃、甲苯、乙腈、DMF、二氯乙烷、氯仿中的任意一种或几种任意比例的混合物；所述的缩合试剂为1-羟基苯并三氮唑，N，N’-二异丙基碳二亚胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐、N，N’-二环己基碳二亚胺、六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷或苯并三氮唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐中的任意一种或几种的组合；所述偶联反应的温度为0-60℃，反应...

【专利技术属性】
技术研发人员：苏贤斌，卞亚楠，杨洋，
申请(专利权)人：南京工业大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32