一种疫苗组合物及其制备方法技术

本发明专利技术属于动物疫苗技术领域，特别公开了一种疫苗组合物，按重量份数计，包括PCV2抗原20‑25份、PRV抗原20‑25份、PPV抗原20‑25份、PRRSV抗原20‑25份、牛血清蛋白0.05‑0.1份、聚乙烯吡咯烷酮0.5‑1份、甘氨酸0.2‑0.5份、L‑谷氨酸钠0.2‑0.5份、蔗糖0.1‑0.2份。本发明专利技术的疫苗组合物通过收集抗原、冻干组合物原液和冻干组合物原液制备而得，保证了PCV2、PRV、PPV和PRRSV这四种疫苗的有效效力，能够较好的预防由PCV2、PRV、PPV和PRRSV引起的疾病，同时便于疫苗结合物的大批量生产。

A vaccine composition and its preparation method

【技术实现步骤摘要】
一种疫苗组合物及其制备方法
本专利技术属于动物疫苗
，特别涉及一种疫苗组合物及其制备方法。
技术介绍
猪圆环病毒病，由猪圆环病毒引起，具有多种临床症状，如厌食、呼吸困难或行动迟缓等多种症状的疾病。猪圆环病毒(PCV)是迄今发现的一种最小的动物病毒。现已知PCV有两个血清型，即PCV1和PCV2。其中PCV2为致病性的病毒，是断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。猪对PCV2具有较强的易感性，感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒，经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪。怀孕母猪感染PCV2后，可经胎盘垂直传播感染仔猪。很多研究表明，PCV2单独感染并不会引起典型的断奶仔猪多系统衰竭综合征症状，而免疫系统的活化及其他病原体的混合感染能促进该症状的发生。最常见的混合感染有猪伪狂犬病毒(PRV)，猪细小病毒(PPV)和猪蓝耳病病毒(PRRSV)，有的呈现二重感染或多重感染，其感染猪的病死率也大大提高。市场上对于上述几种疾病的防控大部分采用只针对其中一种疾病的单苗，免疫接种过程需要分次免疫，存在成本高、操作程序繁琐的问题，同时还会增加感染风险，引起猪群的应激反应加大，导致部分猪群的免疫失败，浪费大量的人力和物力。为了有效解决PCV2与PRV、PPV、PRRSV的混合感染问题，本领域需要一种疫苗组合物，该疫苗组合物含有四种病原抗原成分来同时预防四种疾病。然而，目前对于组合疫苗需要解决的最大问题是近期确认的在组合疫苗中一种疫苗可能会对另一种疫苗具有不利影响，即“抗原干扰效应”。有相关技术人员发现，当简单的将两种现有疫苗混合时，该组合疫苗中的其中一种疫苗或两种疫苗皆可能会失去效力(参见专利申请CN101035559A)。为此，提供一种保持疫苗原有效力的组合疫苗是目前本领域技术人员继续解决的技术难题。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术的第一个目的在于提供一种疫苗组合物，其含有PCV2、PRV、PPV、PRRSV四种抗原，保证了各疫苗的有效效力，能够较好的预防由PCV2、PRV、PPV和PRRSV引起的疾病，降低临床应激反应。本专利技术的第二个目的在于提供一种疫苗组合物的制备方法，其操作简单方便，便于疫苗结合物的大批量生产。为实现上述第一个目的，本专利技术提供了如下技术方案：一种疫苗组合物，按重量份数计，包括PCV2抗原20-25份、PRV抗原20-25份、PPV抗原20-25份、PRRSV抗原20-25份、牛血清蛋白0.05-0.1份、聚乙烯吡咯烷酮0.5-1份、甘氨酸0.2-0.5份、L-谷氨酸钠0.2-0.5份、蔗糖0.1-0.2份。优选的，所述疫苗组合物按重量份数计，包括PCV2抗原25份、PRV抗原20份、PPV抗原20份、PRRSV抗原20份、牛血清蛋白0.08份、聚乙烯吡咯烷酮0.8份、甘氨酸0.3份、L-谷氨酸钠0.3份、蔗糖0.2份。通过采用上述技术方案，本专利技术的疫苗组合物中含有PCV2抗原、PRV抗原、PPV抗原和PRRSV抗原这四种抗原，在牛血清蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸、L-谷氨酸钠以及蔗糖的辅助下，能够有效的防治由猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)以及猪蓝耳病病毒(PRRSV)引起的疾病，相对于单苗的效果，疫苗组合物的副作用小，血清抗体效价高，免疫期持续长，种苗次数少，对猪的影响也小，这样既简化了免疫程序，又降低了猪的养殖成本和预防疾病成本，具有良好的实用性。另外，由于疫苗大多不耐热，其生产、运输、存贮、销售及使用过程中需要子啊较低温度下进行，即所谓的“冷链”，这样环环相扣的冷链运作，费用极高，本专利技术的疫苗组合物则可以大大降低冷链运作的费用，具有显著的优越性。其中，PCV2抗原优选为灭活形式、改良的活的形式或减毒形式的猪圆环病毒2型全病毒抗原，含有猪圆环病毒2型免疫原性氨基酸序列的嵌合病毒，含有猪圆环病毒2型免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位成分。PRV抗原优选为灭活形式、改良的活的形式或减毒形式的猪伪狂犬病全病毒抗原，含有猪伪狂犬病免疫原性氨基酸序列的嵌合病毒，含有猪伪狂犬病免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位成分。PPV抗原优选为灭活形式、改良的活的形式或减毒形式的猪细小全病毒抗原，含有猪细小免疫原性氨基酸序列的嵌合病毒，含有猪细小免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位成分。PRRSV抗原优选为灭活形式、改良的活的形式或减毒形式的猪蓝耳病病毒抗原，含有猪蓝耳病免疫原性氨基酸序列的嵌合病毒，含有猪蓝耳病免疫原性氨基酸序列的多肽或亚单位成分。优选的，所述PCV2抗原来源于PCV2SH株。优选的，所述PRV抗原来源于Bartha-K61株。优选的，所述PPV抗原来源于HN-2011株。优选的，所述PRRSV抗原来源于TJM株。通过采用上述技术方案，本专利技术的疫苗组合物中，选用PCV2SH株、Bartha-K61株、HN-2011株和NVDC-JXA1株，具有抗原含量高、免疫原性强、安全性好、抗母源抗体干扰及免疫效果好等特点。同时采用上述四种抗原时，其相互之间的抗原干扰效应较小，从而保证了四种抗原优良的有效效力。优选的，所述疫苗组合物还包括0.2-0.4份的蜂胶。优选的，所述疫苗组合物还包括0.3份的蜂胶。通过采用上述技术方案，蜂胶是指蜜蜂从树芽、树皮或其他植物的幼芽上采集的树脂，混入腭腺分泌物和蜂蜡等物质而形成的一种具有芳香气味的胶状固体物质，具有抗菌、抗病毒以及增强机体免疫功能等作用，在一定程度能够减小疫苗组合物的内毒性。蜂胶颗粒可与抗原交联成免疫刺激复合物结构，其本身没有抗原性，但可以起到免疫佐剂的作用，促进抗体的生成，增强巨噬细胞的吞噬能力和自然杀伤性细胞的活性。为实现上述第二个目的，本专利技术提供了如下技术方案：一种疫苗组合物的制备方法，包括以下步骤：①、收集抗原取PCV2、PRV、PPV和PRRSV分别进行增殖，将其灭活后收集PCV2抗原、PRV抗原、PPV抗原、PRRSV抗原；②、配制组合物原液按比例取所述PCV2抗原，依次加入牛血清蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸、L-谷氨酸钠、蔗糖及其他加工辅剂，混匀后再按比例依次加入所述PRV抗原、PPV抗原和PRRSV抗原，充分混匀后得到组合物原液；③、冻干组合物原液将步骤②中制得的组合物原液置于-20℃预冷20-30min，再在-80℃条件下冻干，得到所述的疫苗组合物。通过采用上述技术方案，本专利技术先在PCV2抗原中加入牛血清蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸、L-谷氨酸钠、蔗糖及其他加工辅剂，各组分相互配合，协同作用，保证了PCV2抗原的有效效力，再依次加入PRV抗原、PPV抗原和PRRSV抗原后进行冻干，从而减小抗原干扰效应，使得疫苗组合物能够有效的防治由猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)以及猪蓝耳病病毒(PRRSV)引起的疾病，具有针对性强、抗体效价高、便于运输和存储的特点，从而便于疫苗组合物的大批量生产。优选的，本专利技术的疫苗组合物能够较好的适用于在制备预防和治疗猪圆环病毒病、猪伪狂犬病毒病、猪细小病毒病以及猪蓝耳病病毒病的药物中的应用，具有良好的应用前景。综上所述，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术将PCV2抗原、PRV抗原、PPV抗原、PRRSV抗原和多种加工辅剂进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种疫苗组合物，其特征在于，按重量份数计，包括PCV2抗原20‑25份、PRV抗原20‑25份、PPV抗原20‑25份、PRRSV抗原20‑25份、牛血清蛋白0.05‑0.1份、聚乙烯吡咯烷酮0.5‑1份、甘氨酸0.2‑0.5份、L‑谷氨酸钠0.2‑0.5份、蔗糖0.1‑0.2份。

【技术特征摘要】
1.一种疫苗组合物，其特征在于，按重量份数计，包括PCV2抗原20-25份、PRV抗原20-25份、PPV抗原20-25份、PRRSV抗原20-25份、牛血清蛋白0.05-0.1份、聚乙烯吡咯烷酮0.5-1份、甘氨酸0.2-0.5份、L-谷氨酸钠0.2-0.5份、蔗糖0.1-0.2份。2.根据权利要求1所述的一种疫苗组合物，其特征在于，按重量份数计，包括PCV2抗原25份、PRV抗原20份、PPV抗原20份、PRRSV抗原20份、牛血清蛋白0.08份、聚乙烯吡咯烷酮0.8份、甘氨酸0.3份、L-谷氨酸钠0.3份、蔗糖0.2份。3.根据权利要求1所述的一种疫苗组合物，其特征在于，所述PCV2抗原为PCV2SH株。4.根据权利要求1所述的一种疫苗组合物，其特征在于，所述PRV抗原为Bartha-K61株。5.根据权利要求1所述的一种疫苗组合物，其特征在于，所述PPV抗原来源于HN-2011株。6.根据权利要求1所述的一种疫苗组合物，其特征在于，所述PRRSV抗原来源于TJM株。7.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：李遥，杨彩娟，易太江，张丰昌，陈晓威，吴程雨，
申请(专利权)人：杭州洪扬生物工程有限公司，广东省动物防疫物资储备中心，
类型：发明
国别省市：浙江,33