褪黑素的新用途制造技术

本发明专利技术公开了褪黑素或其可接受的盐在制备细菌感染性疾病药物或制备抗生素增效剂中的应用。本发明专利技术还公开了组合物，所述组合物包括褪黑素或其可接受的盐和抗生素。本发明专利技术还公开了组合物在制备细菌感染性疾病的药物或抗生素增效剂中的应用。本发明专利技术具体阐明了褪黑素可以恢复耐药细菌对多种抗生素特别是多粘菌素的敏感性，并系统评价了其与抗生素联合使用在体内外的有效性，有助于开发出一类新型的抗生素增效剂，缓解危害日趋严重的MCR‑1介导的多粘菌素耐药问题。

New uses of melatonin

【技术实现步骤摘要】
褪黑素的新用途
本专利技术属于药物
，具体涉及褪黑素的新用途。
技术介绍
多粘菌素是于1947年发现的一类阳离子肽类抗生素，在20世纪70年代之前被广泛应用于治疗细菌性感染疾病。但是由于潜在的神经毒性和肾毒性，多粘菌素在临床中使用大量减少。然而，近年来多重耐药革兰氏阴性细菌的大量产生和传播，使得多粘菌素被重新启用并被认为是应对超级细菌，尤其是碳青霉素类抗生素耐药菌的最后一道防线。但是，多粘菌素在畜禽和水产养殖业中的大规模和不合理使用导致了细菌耐药性的产生和扩散。质粒介导的多黏菌素耐药基因mcr-1及其耐药突变体(mcr-2/3/4/5/6/7/8)的发现和鉴定显著的降低了其临床疗效，给人类和畜禽耐药细菌感染的预防和治疗带来巨大的挑战。尤其在畜禽养殖业中，针对MCR阳性肠杆菌科细菌已面临无药可用的局面。因此，迫切需要新型的策略去控制MCR介导的细菌耐药性，进而保障人类健康和畜禽养殖业的可持续发展。一种有效的策略去延长现有抗生素使用寿命的策略是使用抗生素的增效剂。抗生素增效剂是指通过抑制细菌的耐药机制或与抗生素的互补杀菌机制，从而增强抗生素抗菌活性的一类化合物。最经典的抗生素增效剂是β-内酰胺酶的抑制剂，如克拉维酸。克拉维酸和β-内酰胺类抗生素的联合使用可以有效治疗产β-内酰胺酶耐药细菌引起的感染因此，本专利技术期望从FDA已批准使用的非抗菌用途化合物中筛选得到一种安全有效的抗生素增效剂去逆转MCR介导的多粘菌素耐药性。褪黑素(N-乙酰基-5-甲氧基色胺，melatonin)是由哺乳动物松果体产生的一种胺类激素。近年来被发现可以作用于哺乳动物全身的多个器官组织和细胞，具有延缓衰老、增强免疫力、改善睡眠、调控生殖活动、抗击肿瘤及清除体内自由基等多种生理和药理作用。由于其众多的用途及安全性高等优点，褪黑素被美国FDA(食品药品监督管理局)和中国卫生部批准允许作为膳食补充剂和保健品使用。但其在细菌性疾病治疗领域的潜在应用在国内外还未见相关报道。本专利技术首次阐明了将褪黑素作为抗生素尤其是多粘菌素增效剂的潜在应用价值。
技术实现思路
专利技术目的：为了解决现有技术存在的问题，本专利技术通过棋盘肉汤稀释法从已批准上市且非抗菌用途的化合物中筛选抗生素特别是多粘菌素的增效剂，以恢复其对耐药细菌的抗菌活性。因此，本专利技术所要解决的技术问题是提供了褪黑素的新用途。本专利技术的褪黑素可以有效恢复和增强多种抗生素特别是多粘菌素的抗菌活性。技术方案：为了解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案为：褪黑素或其可接受的盐在制备细菌感染性疾病药物或制备抗生素增效剂中的应用。其中，所述细菌感染性疾病药物或抗生素增效剂为单组分或复方制剂。本
技术实现思路
还包括一种组合物，所述组合物包括褪黑素或其可接受的盐和抗生素。其中，所述抗生素包括但不仅限于氨苄西林、利福平、美罗培南、多西环素、环丙沙星和多粘菌素中的一种或几种。其中，所述褪黑素或其可接受的盐和抗生素的质量比为1-1000∶1。作为优选，所述褪黑素或其可接受的盐和抗生素的质量比为5-20∶1。其中，所述褪黑素或其可接受的盐的浓度为0.12mg/mL～16mg/mL。其中，所述抗生素的浓度为0.12μg/mL～32μg/mL。本
技术实现思路
还包括所述的组合物在制备细菌感染性疾病的药物中的应用。其中，所述细菌感染性疾病的药物或抗生素增效剂的剂型包括但不仅限于片剂、胶囊、缓释片、控释片、口服液、糖浆、滴丸、注射液剂型、冻干粉针剂型。本专利技术还提供褪黑素和多粘菌素的组合物在生物体内或体外的协同抗菌的应用。所述的生物指畜禽，主要包括但不仅限于猪牛羊、鸡鸭鹅等常见畜禽。本专利技术还提供褪黑素和多粘菌素的组合物在制备细菌感染性疾病的药物中的应用。有益效果：与现有技术相比，本专利技术的优点是：1)本专利技术首次发现褪黑素可以用于细菌感染性疾病中的治疗，属于褪黑素的新用途。2)本专利技术具体阐明了褪黑素可以恢复耐药细菌对多种抗生素特别是多粘菌素的敏感性，并系统评价了其与抗生素联合使用在体内外的有效性，有助于开发出一类新型的抗生素增效剂，缓解危害日趋严重的MCR-1介导的多粘菌素耐药问题。附图说明图1、褪黑素与6种抗生素(氨苄西林、利福平、美罗培南、多西环素、环丙沙星和多粘菌素)对MCR-1阳性大肠杆菌的协同杀菌作用。图2、多粘菌素和褪黑素联合使用的时间杀菌曲线；Colistin，多粘菌素(4μg/mL)；Melatonin，褪黑素(2mg/mL)；Colistin+Melatonin，多粘菌素(4μg/mL)+褪黑素(2mg/mL)；图3、多粘菌素和褪黑素联合使用治疗大蜡螟幼虫耐药细菌感染。具体实施方式下面通过具体的实施例对本专利技术进一步说明，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干变型和改进，这些也应视为属于本专利技术的保护范围。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的实验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量实验，均设置三次重复实验，结果取平均值。MHB肉汤培养基为含牛肉粉1.5g/L、可溶性淀粉1.5g/L和酸水解酪蛋白17.5g/L的水溶液。0.01mol/L磷酸盐缓冲液中(PBS)配制：称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4，溶于800mL蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值后，加蒸馏水定容至1L。褪黑素与抗生素母液的配置方法：褪黑素母液(200mg/mL)：称取2.0g药物定容于10mL的DMSO中；氨苄西林母液(5120μg/mL)：称取51.2mg药物定容于10mL0.01mol/L磷酸盐缓冲液中(PBS，pH＝8)；利福平母液(5120μg/mL)：称取51.2mg药物定容于10mL甲醇中；美洛培南母液(5120μg/mL)：称取51.2mg药物定容于10mL0.01mol/L磷酸盐缓冲液中(PBS，pH＝7.2)；多西环素母液(5120μg/mL)：称取51.2mg药物定容于10mL无菌水中；环丙沙星母液(5120μg/mL)：称取51.2mg药物定容于10mL无菌水中；多粘菌素母液(5120μg/mL)：称取51.2mg药物定容于10mL无菌水中；以上母液配制好后，过0.22μM滤膜并分装于2mL离心管中(每管1mL)。所有母液冻存于-20℃冰箱中，备用。实施例1褪黑素与抗生素的组合物组合物1：按照褪黑素与抗生素母液配制组合物1，其中，褪黑素终浓度为0.12mg/mL、多粘菌素终浓度为0.12μg/mL；即褪黑素与多粘菌素的质量比为1000∶1；组合物2：按照褪黑素与抗生素母液配制组合物2，其中，褪黑素终浓度为0.25mg/mL、氨苄西林终浓度为0.5μg/mL；组合物3：按照褪黑素与抗生素母液配制组合物3，其中，褪黑素终浓度为0.25mg/mL、利福平终浓度为0.5μg/mL；组合物4：按照褪黑素与抗生素母液配制组合物4，其中，褪黑素终浓度为0.25mg/mL、美洛培南终浓度为0.5μg/mL；组合物5：按照褪黑素与抗生素母液配制组合物5，其中，褪黑素终浓度为0.12mg/mL、多西环素终浓度为0.5μg/mL；组合物6：按照褪黑素与抗生素母液配制组合物6，其中，褪黑素终浓度为0本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.褪黑素或其可接受的盐在制备细菌感染性疾病药物或制备抗生素增效剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.褪黑素或其可接受的盐在制备细菌感染性疾病药物或制备抗生素增效剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述细菌感染性疾病药物或抗生素增效剂为单组分或复方制剂。3.一种组合物，其特征在于，所述组合物包括褪黑素或其可接受的盐和抗生素。4.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述抗生素为氨苄西林、利福平、美罗培南、多西环素、环丙沙星和多粘菌素中的一种或几种。5.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述褪黑素或其可接受的盐和抗生素的质量比为1~10...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘源，王志强，李瑞超，肖霞，贾瑜倩，杨康妮，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32