糖皮质激素及其衍生物的筛查方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，该方法基于UPLC‑TOF MS/MS技术，采用MS

Screening methods and applications of glucocorticoids and their derivatives

【技术实现步骤摘要】
糖皮质激素及其衍生物的筛查方法及其应用
本专利技术属于分析化学领域，特别涉及一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法及其应用。
技术介绍
糖皮质类激素(Glucocorticoids，GCs)属甾体类化合物，具有很好的抗炎作用，对许多皮肤性炎症和过敏症非常有效，在临床上应用广泛。近年来存在在化妆品中添加各类GCs以达到美白抗敏等功效的现象，然而，长期使用该类化妆品会导致激素依赖性皮炎、接触性皮炎或化妆品皮肤病，甚至毁容。因此，《化妆品安全技术规范》(2015年版)明确将GCs列为化妆品中禁用物质。针对GCs的检测方法主要有薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)和液相色谱-质谱法(LC-MS/MS)等。其中，国标GB/T24800.2-2009采用LC-MS/MS建立了化妆品中41种GCs的检测方法。然而，从检测技术的目标性进行分析，现有化妆品中非法添加GCs的检测方法都是针对固定种类的GCs进行靶向性的检测，即检测模式都是对于已知种类的GCs进行检测。但是，随着化妆品行业技术水平的飞速发展，部分企业可能通过化学合成设计等手段，将某些功效较好的糖皮质激素的化学结构进行有效修饰，合成新型的糖皮质激素衍生物应用到化妆品中。这些新型衍生物甚至可能比母版化合物具有更高的活性。在这种情况下，现有的靶向性的检测技术将无法对新型衍生物进行识别，导致这种产品游离于的监管之外，严重威胁化妆品使用者的健康和安全。因此，建立一种同时可以筛查和鉴定化妆品中GCs及其共母核结构衍生物的方法，对于提升化妆品的产品质量，保障人们身体健康具有重要的意义。
技术实现思路
基于此，本专利技术的目的在于提供一种不完全依赖于对照品的、覆盖范围广、灵敏度高、准确性好能实现对糖皮质激素及其新型衍生物进行准靶向和非靶向的筛查及鉴定方法。为实现上述目的，本专利技术具体技术方案如下：一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，包括以下步骤：S1.待测样品经分散提取后，采用超高效液相色谱仪进行色谱分离，PDA串联TOFMS/MS进行紫外光谱图及质谱信息采集；S2.采用含有若干组特征碎片离子信息的共母核特征离子数据库，对采集的待测样品的质谱信息进行搜索，搜索待测样品中包含的特征碎片离子信息；S3.结合质谱断裂特征、离子精确质量数、同位素丰度、紫外吸收光谱的至少一种信息，得待测样品中的糖皮质激素或衍生物。本专利技术还提供一种用于飞行时间质谱法筛查糖皮质激素及其衍生物的共母核特征离子数据库，包含以下至少一组特征碎片离子信息：第一组：泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O3和C21H22O2；第二组：氟轻松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H20O4和C21H18O3；第三组：泼尼松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O4和C21H22O3；第四组：氢化可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H22O3和C21H20O2；第五组：可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H26O4和C21H24O3；第六组：甲基泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C24H28O4和C24H26O3；第七组：曲安奈德类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C24H26O4和C24H24O3；第八组：氟米松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H24O4和C22H22O3；第九组：倍他米松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H24O3和C22H22O2；第十组：氯倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H25ClO3和C22H23ClO2；第十一组：氯倍他松丁酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H23ClO3和C21H23ClO2；第十二组：卤倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H23ClO3和C22H21ClO2。本专利技术还提供一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法和所述共母核特征离子数据库的应用，具体技术方案如下：如上所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法或如上所述的共母核特征离子数据库在筛查化妆品中糖皮质激素及其衍生物中的应用。基于上述技术方案，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术基于UPLC-TOFMS/MS技术，在MSE全信息串联质谱模式下，对待测样品进行质谱信息采集，将待测样品的质谱信息与共母核特征离子数据库进行搜索对比，搜索待测样品的质谱信息中包含的特征碎片离子信息，同时结合质谱断裂特征、离子精确质量数、同位素丰度、紫外吸收光谱等信息对筛查的色谱峰进行进一步的确认，该方法基于质谱断裂规律，形成的准靶向筛查技术在没有对照品的条件下，实现对具有相同母核结构的糖皮质激素及其新型衍生物进行筛查和鉴定，将该方法应用于筛查化妆品中的糖皮质激素，能有效应对通过对某种糖皮质激素进行结构修饰而达到规避监管的情况，以提升化妆品的产品质量，有力保障消费者的健康和安全。附图说明图1为常见糖皮质激素在低碰撞能下的基峰离子色谱图；图2为四种典型糖皮质激素在高碰撞能量下获得的质谱图，其中，图2a为泼尼松龙，图2b为泼尼松龙醋酸酯，图2c为泼尼松龙醋酸戊酸酯，图2d为泼尼卡酯；图3为ChromalynxXS筛查一个化妆品时处理数据的示例示意图；图4为氯倍他索丁酸酯(A)和倍他米松醋酸丁酸酯(B)在高碰撞能下的MSE质谱图和可能的裂解途径；图5为部分通过本方法筛查出不同糖皮质激素的实际阳性样品的提取离子色谱图。具体实施方式为了便于理解本专利技术，下面将参照实施例对本专利技术进行更全面的描述，以下给出了本专利技术的较佳实施例。但是，本专利技术可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。提供这些实施例的目的是使对本专利技术的公开内容的理解更加透彻全面。应理解，下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用试剂，均为市售产品。除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。在本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本专利技术。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，包括以下步骤：S1.待测样品经分散提取后，采用超高效液相色谱仪进行色谱分离，PDA串联TOFMS/MS进行紫外光谱图及质谱信息采集；S2.采用含有若干组特征碎片离子信息的共母核特征离子数据库，对采集的待测样品的质谱信息进行搜索，搜索待测样品中包含的特征碎片离子信息；S3.结合质谱断裂特征、离子精确质量数、同位素丰度、紫外吸收光谱的至少一种信息，得待测样品中的糖皮质激素或衍生物。其中，本专利技术所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，包括对于现有常见的糖皮质激素、常见的糖皮质激素的衍生物以及通过化学合成设计等手段进行化学结构修饰得到的与糖皮质激素共母核的新型衍生物，对其进行筛查和鉴定的方法。优选地，所述共母核特征离子数据库包含以下至少一组糖皮质激素的特征碎片离子信息：第一组：泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O3和C2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.待测样品经分散提取后，采用超高效液相色谱仪进行色谱分离，PDA串联TOF MS/MS进行紫外光谱图及质谱信息采集；S2.采用含有若干组特征碎片离子信息的共母核特征离子数据库，对采集的待测样品的质谱信息进行搜索，搜索待测样品中包含的特征碎片离子信息；S3.结合质谱断裂特征、离子精确质量数、同位素丰度、紫外吸收光谱的至少一种信息，得待测样品中的糖皮质激素或其衍生物。

【技术特征摘要】
1.一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.待测样品经分散提取后，采用超高效液相色谱仪进行色谱分离，PDA串联TOFMS/MS进行紫外光谱图及质谱信息采集；S2.采用含有若干组特征碎片离子信息的共母核特征离子数据库，对采集的待测样品的质谱信息进行搜索，搜索待测样品中包含的特征碎片离子信息；S3.结合质谱断裂特征、离子精确质量数、同位素丰度、紫外吸收光谱的至少一种信息，得待测样品中的糖皮质激素或其衍生物。2.根据权利要求1所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述色谱分离的色谱条件为：以甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱；流动相流速为0.2-0.4mL/min，柱温35±1℃，进样量为3～6μL；紫外检测器，其紫外光谱采集波长范围为210-400nm。3.根据权利要求2所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述色谱分离中使用的色谱柱为WatersACQUITYUPLCBEHC18柱。4.根据权利要求1所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述质谱信息采集的质谱条件为：离子源：电喷雾离子源，正离子模式(ESI+)；采集模式：MSE；毛细管电压：3.0±0.2kV；萃取锥孔电压：4±0.2V；采样锥孔电压：35±1V；碰撞气：高纯氩气；Trap：0.4-0.6mL/min；锥孔气：氮气，40-60L/h；去溶剂气：氮气，500-700L/h；离子源温度：100±5℃；去溶剂气温度：400±10℃；质量扫描范围：50～1000Da；扫描时间：0.2-0.3s；质谱碰撞电压：TrapCE为6.0-40V，TransferCE为4.0V；TOF分析模式：V模式。5.根据权利要求4所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述质谱信息采集的步骤设置两个不同质谱碰撞电压的通道，包括：质谱碰撞电压TrapCE为6.0V、梯度变化的碰撞电压TrapCERamp为10-40V。6.根据权利要求1-5任一项所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述共母核特征离子数据库包含以下至少一组特征碎片离子信息：第一组：泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O3和C21H22O2；第二组：氟轻松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H20O4和C21H18O3；第三组：泼尼松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O4和C21H22O3；第四组：氢化可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H22O3和C21H20O2；第五组：可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H26O4和C21H24O3；第六组：甲基泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C24H28O4和C24H26O3；第七组：曲安奈德类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C24H26O4和C24H24O3；第八组：氟米松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H24O4和C22H22O3；第九组：倍他米松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H24O3和C22H22O2；第十组：氯倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H25ClO3和C22H23ClO2；第十一组：氯倍他松丁酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H23ClO3和C21H23ClO2；第十二组：卤倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H23ClO3和C22H21ClO2。7.一种用于飞行时间质谱法筛查糖皮质激素及其衍生物的共母核特征离子数据库，其特征在于，包含以下至少一组特...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭建华，王继才，魏海峰，陈意光，李鑫宇，熊小婷，夏泽敏，谭焯针，梁文耀，王亚茹，
申请(专利权)人：广州质量监督检测研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44