多色荧光染料和荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法技术

本发明专利技术揭示了一种适用于多色荧光染料以及荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法，包括：将荧光标记的生物组织样本进行预处理；依次放入不同浓度TB的树脂溶液中梯度渗透，每个浓度1h‑2h,之后作用浓度TB的树脂溶液中渗透12‑24h；用树脂渗透液对上述所述的经梯度处理的样本进行包埋、加热聚合后，得到包埋的荧光标记样本。本发明专利技术以TB作为背景抑制剂，可以抑制背景光，且可以兼容多色荧光染料和荧光蛋白的使用。本发明专利技术所提供的包埋方法，适用于多种树脂包埋，同时适用于多种荧光染料以及荧光蛋白标记的样本。

Plastic Embedding Method for Polychromatic Fluorescent Dyes and Fluorescent Protein Labeled Samples

【技术实现步骤摘要】
多色荧光染料和荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法
本专利技术涉及生物医学工程
，具体涉及一种多色荧光染料标记样本塑性包埋方法。
技术介绍
目前，通过荧光蛋白以及荧光染料标记技术，可以同时获取荧光蛋白以及荧光染料标记信息，对深入研究生物组织的结构和功能与疾病等关系有着重要的作用。现有的包埋方法，采用纯树脂或者溶解了SBB和DTT的树脂样本渗透包埋荧光生物组织，可包埋多种颜色荧光蛋白标记的生物组织，例如绿色/红色/蓝色荧光蛋白标记的组织，它的不足之处在于：这种包埋方法不适于各种荧光染料标记生物样本，从而大大限制了其应用，例如采用SBB作为背景抑制剂，但SBB在红色及红外波段有自发荧光，限制了其在多色特别是红色荧光蛋白以及多种荧光染料样本中的使用。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术存在的不足，提供一种适用于多种荧光染料和荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法。为解决以上技术问题，本专利技术的技术方法包括：将生物组织样本进行预处理；将预处理后的生物组织样本依次放入0。5-95wt%的梯度浓度酒精中进行渗透，每个梯度0。5-3小时，随后分别在含0。7-1wt/%TB不同质量浓度的梯度树脂中渗本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种多色荧光染料以及荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法，其特征在于，包括：将生物组织样本进行预处理；将预处理后的生物组织样本依次放入0；5‑95wt%的梯度浓度酒精中进行渗透，每个梯度0；5‑3小时，随后分别在含0；7‑1wt/%TB不同质量浓度的梯度树脂中渗透6‑24小时；用树脂渗透液对所述经梯度浓度渗透后的样本进行包埋、加热聚合后得到包埋的荧光染料标记样本。

【技术特征摘要】
1.一种多色荧光染料以及荧光蛋白标记样本的塑性包埋方法，其特征在于，包括：将生物组织样本进行预处理；将预处理后的生物组织样本依次放入0；5-95wt%的梯度浓度酒精中进行渗透，每个梯度0；5-3小时，随后分别在含0；7-1wt/%TB不同质量浓度的梯度树脂中渗透6-24小时；用树脂渗透液对所述经梯度浓度渗透后的样本进行包埋、加热聚合后得到包埋的荧光染料标记样本。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对生物组织样本进行预处理包括：将生物组织样本在多聚甲醛固定液中固定12-24小时；将固定后的生物组织样本在漂洗液中漂洗6-12小时；将所述漂洗后的生物组织样本依次放入冰水预冷却的50%、70%乙醇溶液中进行梯度脱水，再在95%或100%乙醇溶液中进行脱水，每次5分钟到2小时。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述不同质量浓度的梯度树脂的质量浓度为第一梯度40%~60%、第二梯度60%~70%、第三梯度70~90%和第四梯度90%~100...

【专利技术属性】
技术研发人员：李向宁，龚辉，田娇娇，任淼，
申请(专利权)人：华中科技大学苏州脑空间信息研究院，
类型：发明
国别省市：江苏,32