【技术实现步骤摘要】
一种检测草贝母和轮叶贝母成分的方法
:本专利技术属生物
,涉及中药成分的检测方法,具体涉及检测草贝母和轮叶贝母成分的引物、探针以及检测方法。
技术介绍
贝母为多年生草本植物,其鳞茎供药用,因其形状得名,《本草经集注》说:“形似聚贝子”,故名贝母,能止咳化痰、清热散结之功。川贝母(Fritillariacirrhosa)是贝母中的珍品,是百合科多年生草本植物乌花贝母、卷叶贝母、罗氏贝母、甘肃贝母、梭砂贝母等贝母的地下鳞茎。因主产于四川而得名,但在西藏、甘肃、新疆、华北、东北均有出产。川贝母性微寒而味甘苦,止咳化痰之效较强,入心肺经,功能润肺,临床常与沙参、麦冬、天冬、桑叶、菊花等配伍用于热痰、燥痰、肺虚劳嗽、久嗽、痰少咽燥、痰中带血以及心胸郁结、肺痿、肺痈等病症的治疗。现代药理研究证实,川贝母含有川贝母碱等多种生物碱,川贝母碱有降低血压,兴奋子宫等多种药理作用。因为川贝母在贝母中药效最好且无法人工种植,导致川贝价格一直居高不下,而贝母类药材来源较多,致使一些人用其他与川贝母外观相似的贝母冒充川贝母销售,导致市场上出现了众多的混淆品和伪品,其中主要以浙贝母(Fr ...
【技术保护点】
1.一种检测草贝母和轮叶贝母成分的方法,其特征为,实时荧光PCR检测草贝母和轮叶贝母成分的引物探针,分别为:实时荧光PCR检测草贝母源性成分的引物探针,分别为:上游引物P1:CCAGTCTTGATCGTTACAAAGG,下游引物P2:GAACCTTCTTCAAAAAGGTCTAAAGG,带有荧光染料的探针序列为:AGCATCGAGAAAGTTATTGGGGAAGAAAATCA实时荧光PCR检测轮叶贝母成分的引物探针,分别为:上游引物P1:CTACTCGGGACCTCGCAAT,下游引物P2:CACCGCAGAGGCATCGAC,带有荧光染料的探针序列为:TCCTCGGACACTATTT。
【技术特征摘要】
1.一种检测草贝母和轮叶贝母成分的方法,其特征为,实时荧光PCR检测草贝母和轮叶贝母成分的引物探针,分别为:实时荧光PCR检测草贝母源性成分的引物探针,分别为:上游引物P1:CCAGTCTTGATCGTTACAAAGG,下游引物P2:GAACCTTCTTCAAAAAGGTCTAAAGG,带有荧光染料的探针序列为:AGCATCGAGAAAGTTATTGGGGAAGAAAATCA实时荧光PCR检测轮叶贝母成分的引物探针,分别为:上游引物P1:CTACTCGGGACCTCGCAAT,下游引物P2:CACCGCAGAGGCATCGAC,带有荧光染料的探针序列为:TCCTCGGACACTATTT。2.根据权利要求1所述的一种快速检测草贝母和轮叶贝母成分的方法,其特征在于:检测草贝母成分探针的荧光染料为:5‘端为FAM标记,3’端为TAMRA标记;检测轮叶贝母成分探针的荧光染料为:5‘端为VIC标记,3’端为MGB标记。3.根据权利要求1所述的一种快速检测草贝母和轮叶贝母成分的方法,其特征在于如下步骤:1)提取待检样品基因组DNA;2)以所提取的DNA作为模板,加入权利要求1所述的引物对和荧光染料标记的探针以及酶反应液进行实时荧光PCR反应,记录样品反应的Ct值。4.根据权利要求3所述的一种快速检测草贝母和轮叶贝母成分的方法,其特征在于:将检测草贝母和轮叶贝母的上游引物、下游引物和探针稀释至10μmol/L,然后等体积合并为混合引物(探针),所述的实时荧光PCR反应体系为:5.根据权利要求4所述的一种...
【专利技术属性】
技术研发人员:宋薇,张斌,崔山,
申请(专利权)人:青岛谱尼测试有限公司,
类型:发明
国别省市:山东,37
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