一种香梨枝条离体水培法测定梨火疫病菌致病力的方法技术

本发明专利技术涉及植物保护技术领域，具体公开了一种香梨枝条离体水培法测定梨火疫病菌致病力的方法，包括以下步骤：（1）梨火疫病菌接种液的制备；（2）离体枝条制备；（3）接种；（4）接种结果观察与致病力评价。本发明专利技术方法简便易行，病原菌致病性表现稳定，重复性好，结果可靠，可准确地反映梨火疫病菌的致病力及其致病强度；在实际操作中，可批量进行，具有占用空间小、节约劳动成本、缩短实验周期的优点。因此，本发明专利技术方法适合推广应用。

A Method for Determining the Pathogenicity of Pear Fire Blight in Vitro Hydroponics of Fragrant Pear Branches

【技术实现步骤摘要】
一种香梨枝条离体水培法测定梨火疫病菌致病力的方法
本专利技术涉及植物保护
，具体的说，本专利技术涉及一种香梨枝条离体水培法测定梨火疫病菌致病力的方法。
技术介绍
梨火疫病是由解淀粉欧文氏菌（Erwiniaamylovora）侵染多种蔷薇科植物造成的最具毁灭性的细菌病害，为我国进境植物检疫性有害生物。该病害1780年首次发生于美国纽约州，目前已扩散分布于世界近60个国家和地区。梨火疫病菌寄主范围广，可以危害蔷薇科40余属的220多种植物，其中最感病的是梨、苹果、山楂等果树，病原菌侵染花器、叶片、嫩梢、幼果、枝条和树干，病菌从病梢可很快扩展到枝条和树干，直至根部，引起花序枯死、枯枝、果实腐烂和整株死亡。果树苗木、候鸟、带菌果实和被污染的包装材料都是重要的传播途径，昆虫、鸟类和风雨是重要的传播介体。病原菌一旦入侵，在寄主植物上定殖，进而扩散蔓延，迅速流行，难以控制和根除，造成严重的经济损失。我国尚无梨火疫病发生的报道，但最近十年内与我国毗邻的哈萨克斯坦、吉尔吉斯斯坦和俄罗斯等国相继有发现梨火疫病的报道，进境风险分析显示该病害为我国特高风险有害生物。目前国内对梨火疫病的研究十分有限。库本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种香梨枝条离体水培法测定梨火疫病菌致病力的方法，其特征在于通过以下步骤实现：（1）梨火疫病菌接种液的制备：将梨火疫病待测菌株接种于NA+5%蔗糖培养基上，28.5℃培养48h活化，挑取单菌落接种于NA+5%蔗糖培养液中，28.5℃、160 r/min振荡培养12h，测定OD600值为1.2左右的菌液，无菌水稀释至浓度为10

【技术特征摘要】
1.一种香梨枝条离体水培法测定梨火疫病菌致病力的方法，其特征在于通过以下步骤实现：（1）梨火疫病菌接种液的制备：将梨火疫病待测菌株接种于NA+5%蔗糖培养基上，28.5℃培养48h活化，挑取单菌落接种于NA+5%蔗糖培养液中，28.5℃、160r/min振荡培养12h，测定OD600值为1.2左右的菌液，无菌水稀释至浓度为108CFU/mL作为接种液；（2）离体枝条制备：选择对梨火疫病极感病品种，健康库尔勒香梨树的当年生新生枝条作为供试材料，将采集的枝条截至30cm左右的茎段，用75%酒精消毒后，将其1/3插入装有0.5‰NaCl灭菌盐水的三角瓶中；（3）接种：用灭菌手术刀在枝条顶端向下第3~4片叶的叶腋处切开一个5mm2的伤口，用移液枪吸取2mL的待测菌液滴加在一块约2cm2灭菌脱脂棉片上，将棉片贴敷在伤口部位，再用保鲜膜包裹保湿，每个待测病原菌菌株接种30个离体枝条，以无菌水代替菌液作为对照；（4）接种结果观察与致病力评价：将接种后的离体枝条置于相对湿度75%，温度28.5℃，光照12h的人工气候箱中培养，枝条接种后2d开始每天连续观察发病情况，接种7d后对接种枝条进行病情调查，计算病情指数...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗明，袁英哲，韩剑，李洪涛，张静文，张祥林，
申请(专利权)人：新疆农业大学，
类型：发明
国别省市：新疆,65