基于光切割基序的蛋白纯化方法技术

本发明专利技术涉及一种基于光切割基序对目的肽进行纯化的方法。具体而言，本发明专利技术的蛋白纯化方法通过光切割基序将功能片段与目的肽相连，利用功能片段进行纯化，随后通过使用365‑450nm的光照射使得光切割基序光解，将所述目的肽与所述功能片段分离，从而获得目的肽。该纯化方法适用于对多种表达系统表达的蛋白(特别是分子量低的小肽)进行纯化，具有成本低、流程简单、易于工业化实现等优点，可用于实验室规模的蛋白纯化，也有利于工业化规模的低成本蛋白生产。

Protein Purification Method Based on Optical Cutting Base Sequence

【技术实现步骤摘要】
基于光切割基序的蛋白纯化方法
本专利技术涉及一种基于光切割基序对目的肽进行纯化的方法。具体而言，本专利技术通过光切割基序将功能片段与目的肽相连，利用功能片段进行纯化，随后通过使用特定波长的光照射使得光切割基序处发生断裂(光解)，从而获得目的肽。
技术介绍
无论是实验室规模还是工业生产领域，蛋白纯化都是基因工程和蛋白质工程中的关键环节。据统计，基因工程产品的分离纯化成本约占到其全部成本的60％～80％(陈浩、陈玉红、朱德煦、刘建宁，重组蛋白纯化技术，中国生物工程杂志，2002，22(5)：87-92)。已经开发出高效的原核、真菌和真核细胞类蛋白表达体系，然而，不论通过何种体系表达，目的肽都可能与组织和细胞中的其它蛋白相互作用形成复杂的混合物，造成分离纯化十分困难。目前使用的纯化方法主要包括层析(例如离子交换层析、疏水性相互作用层析、亲和层析等)和电泳技术。然而，就层析技术而言，离子交换层析和疏水性相互作用层析对初始样品的理化性质有一定的要求，通用性和纯化效率不高；亲和层析需要使用带有不同特异性标签的凝胶树脂，并且在纯化后需要添加蛋白酶去除特殊的标签氨基酸序列，纯化成本高昂。另一方面，对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白纯化方法，所述方法包含如下步骤：a)在宿主细胞中表达融合蛋白，所述融合蛋白包含目的肽、用于纯化的功能片段以及连接所述目的肽和所述功能片段的光切割基序；b)使得所述融合蛋白与所述宿主细胞分离；c)利用365‑450nm波长的光对所述融合蛋白照射30‑100min；以及d)将所述目的肽从所述片段混合物中分离，从而获得纯化的所述目的肽。

【技术特征摘要】
1.一种蛋白纯化方法，所述方法包含如下步骤：a)在宿主细胞中表达融合蛋白，所述融合蛋白包含目的肽、用于纯化的功能片段以及连接所述目的肽和所述功能片段的光切割基序；b)使得所...

【专利技术属性】
技术研发人员：王靖，王磊，安泰，陈博，朱镜羲，杨凯，牛兴和，郝小明，
申请(专利权)人：中粮集团有限公司，中粮营养健康研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11