荧光定量PCR法检测外周血CA125 mRNA的试剂盒制造技术

本发明专利技术涉及一种实时荧光定量PCR检测外周血CA125 mRNA的试剂盒，该试剂盒通过逆转录（RT）mRNA样品得到cDNA,再结合实时荧光定量PCR检测技术，可以定量检测标本CA125的mRNA表达量。本发明专利技术所提供的试剂盒可以用于临床及科研中检测患者的外周血中CA125的表达，为卵巢癌患者的确定及预后的判断提供重要的参考依据。

A Kit for Detecting CA125 mRNA in Peripheral Blood by Fluorescence Quantitative Polymerase Chain Reaction

【技术实现步骤摘要】
荧光定量PCR法检测外周血CA125mRNA的试剂盒
本专利技术属生物
，为一种通过逆转录(RT)mRNA样品得到cDNA,再结合实时荧光定量PCR检测技术，可以精确定量检测标本中人外周血CA125mRNA的表达量的试剂盒。
技术介绍
本专利技术属生物
，为一种通过逆转录(RT)mRNA样品得到cDNA,再结合实时荧光定量PCR检测技术，可以精确定量检测标本中人外周血CA125mRNA的表达量的试剂盒。卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。许多患者确诊时即已为晚期，失去了最佳的手术时机。即使早期卵巢癌患者，有近很大一部分患者5年内死于复发和转移。其原因可能是在术前或术时已有非常少量肿瘤细胞，转移到血液、淋巴结、骨髓、或其它远处器官，形成肿瘤微转移，而普通的检测方法不能发现。早期发现、早期诊断是卵巢癌早期治疗的基础和前提，也是有效提高卵巢癌患者生存率、改善其预后的重要保证。由于癌瘤早期体积微小，采用B超、CT扫描等手段均难以早期发现。血液转移是肿瘤扩散的主要途径之一，因此在患者外周血进行肿瘤细胞基因表达检测、肿瘤特异性标记产物检本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.CA125 mRNA荧光定量RT‑PCR检测试剂盒，特征为：包含红细胞裂解液、总RNA抽提试剂、无RNA酶的水、反转录缓冲液、dNTP混合物、逆转录酶储存液、PCR反应液、探针、标准品、对照品；除标准品用TE溶解外，其他各种溶液所用溶剂均为纯化水；红细胞裂解液的配制方法为在1000ml水中加入8.29克氯化铵，1.00克碳酸氢钾，37.2mg Na2EDTA, pH值为7.2‑7.4；总RNA抽提试剂的主要成分为苯酚，此外还含有异硫氰酸胍和β‑巯基乙醇；无RNA酶的水制备方法为：向去离子水加入焦炭酸二乙酯，至体积终浓度为0.05%，22‑25℃放置10‑12小时后，121℃，20min高压...

【技术特征摘要】
1.CA125mRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒，特征为：包含红细胞裂解液、总RNA抽提试剂、无RNA酶的水、反转录缓冲液、dNTP混合物、逆转录酶储存液、PCR反应液、探针、标准品、对照品；除标准品用TE溶解外，其他各种溶液所用溶剂均为纯化水；红细胞裂解液的配制方法为在1000ml水中加入8.29克氯化铵，1.00克碳酸氢钾，37.2mgNa2EDTA,pH值为7.2-7.4；总RNA抽提试剂的主要成分为苯酚，此外还含有异硫氰酸胍和β-巯基乙醇；无RNA酶的水制备方法为：向去离子水加入焦炭酸二乙酯，至体积终浓度为0.05%，22-25℃放置10-12小时后，121℃，20min高压，22-25℃放置备用；反转录缓冲液包含9.1umol/LOligo(dT)12-18、3.6U/ulRNA酶抑制剂、182mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸、273mmol/L氯化钾、11mmol/L氯化镁、纯化水；其中182mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液在25℃条件下，pH值为8.3；逆转录酶储存液包含20mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸、100mmol/L氯化钠、0.1mmol/L乙二胺四乙酸、1.0mmol/L二硫苏糖醇、体积比为50%的甘油、体积比为0.01%的Nonidetp-40、200U/ul逆转录酶、纯化水；其中20mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液在25℃条件下，pH值为7.5；dNTP混合物包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP，为其钠盐-纯化水溶液，pH7.0-7.5，四种dNTP浓度均为10mmol/L；PCR反应液包含18.5mmol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸溶液、2.78mmol/L氯化镁、92.6mmol/L氯化钾、0.37mmol/L上下游引物、0.1U/ulTaq酶、400nmol/LdATP、400nmol/L...

【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：安徽普元生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽,34