参一胶囊原料药全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法技术

本发明专利技术公开了参一胶囊原料药生产过程中多波长融合指纹图谱的质量控制方法，它是将现代分析检测手段和信息处理手段结合起来，建立综合、全面、有效的质量评价标准，可消除单一指标反映该活性成分作为治疗药物原料和含有该活性成分的药物制剂质量的不完备性，进而对原料药和制剂质量作出全面清晰的评价。本发明专利技术的质量控制方法操作简单、安全有效、重现性较好，可用于参一胶囊原料药产业化的质量评价、质量检测及新药研发。

【技术实现步骤摘要】
参一胶囊原料药全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法
本专利技术涉及一种中药原料药的质量控制方法，尤其涉及一种参一胶囊原料药的质量控制方法，特别是涉及该原料全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法。
技术介绍
肿瘤的诊断与治疗是人类至今未能攻克的一大难题，人们一直在寻找肿瘤治疗的有效药物。到目前为止，治疗肿瘤除了传统的手术，化疗和放疗外，还有生物疗法和热疗等，这些方法都在一定范围内取得了很大的进展，但是仍然不能达到彻底根治肿瘤目的。化疗药物通过促进肿瘤细胞死亡或阻止其增殖而达到目的，但化疗药物多具有广泛的细胞毒性，特异性，容易引发多种严重的并发症，因此寻找高效低毒的抗肿瘤药物及治疗方法一直是临床治疗以及药物开发的研究热点。从中草药中研究寻找抗肿瘤药物已经成为药物学家研究的热点，我国古代很早就有关于中草药治疗肿瘤的文献记载。近年来对人参皂苷预防和抑制肿瘤的研究不断深入，研究结果发现，人参总皂苷和单体人参皂苷对促进肿瘤细胞凋亡，促进肿瘤细胞分化，提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性以及提高身体免疫力等方面都有重要意义。人参是属于五加科人参属的植物，在中国、韩国、日本被广泛应用，已有2000多年历史，以预防疾病和延长寿命为主要使用目的。据《神农本草经》记载，人参有：“补五脏，安神经，定魂魄，止惊悸，除邪气，名目益智，久服轻身延年”的作用。现代医学研究表明人参的主要功效和作用有：对于神经中枢系统的作用，抗癌抗肿瘤作用，免疫功能调节作用，抗糖尿病的作用，增强肝功能作用，心脑血管障碍改善，抗动脉硬化作用，血压调节作用，以及更年期障碍和抗骨质疏松作用，抗疲劳，抗氧化，抑制衰老等。人参皂苷作为人参主要有效成分，被广泛研究和使用，其中以20(R)-人参皂苷Rg3最为引人瞩目，其作为人参的主要有效成分，安全性良好，已经被制成抗肿瘤口服制剂应用于临床，作为注射剂被深入研究。中药指纹图谱是中药质量控制的有效技术手段，多波长融合技术更是提供更多的指纹图谱信息，故通过多波长融合技术手段建立指纹图谱成为中药质量检测和评价的一种发展模式，更能真实客观的反映中药材提取的有效成分及其制剂内在质量，是一种潜移默化的从相对定量到绝对定量的提升，为以中药材为基础提取原料和制剂的质量检测和物质基础提供新的参考依据，为规范中药制剂及其合理使用奠定基础。随着科学技术的创新与进步，现代先进分析检测技术以及信息处理技术的日渐成熟，使中药分析检测水平有了显著提高，中药质量控制方法得到不断完善。单一波长测定不能全面、综合的评价其质量。随着人们对药品质量要求的日益提高，现有的参一胶囊原料药是纯度达到95％的中药，其中含有一定量的其他成分，这些成分对原料的安全性和作用效果有一定的影响。而现有质量检测方法仅仅是对其进行定性鉴别、定量检测和一些理化检测，不能够满足人们对参一胶囊的安全性、可控性的要求。因此，建立综合、全面、有效的质量评价标准具有重大的意义。中药指纹图谱是中药质量检测的有效技术手段，多波长融合技术更是提供更多的指纹图谱信息，故通过多波长融合技术手段建立指纹图谱成为中药质量检测和评价的一种发展模式，更能真实客观的反映中药单体及制剂的内在质量，是一种潜移默化的从相对定量到绝对定量的提升，为中药单体及制剂的质量检测和物质基础提供新的参考依据，为规范中药制剂及其合理使用奠定基础。参一胶囊，为胶囊剂，内容物为白色粉末；味微苦。由人参皂苷Rg3单一成分组成，具有培元固本，补益气血的功效。与化疗配合用药，有助于提高原发性肺癌、肝癌的疗效，可改善肿瘤患者的气虚症状，提高机体免疫功能。为了保证参一胶囊药物的质量和疗效，需要建立参一胶囊原料药或制剂有关物质全方面信息的质量标准，本专利技术在大量的实验基础上，公开了一种参一胶囊原料药全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法，为质量检测提供依据。本检测方法先进科学，满足药品质量特别是相关物质检测的要求。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种参一胶囊原料药全时段多波长融合指纹图谱质量控制方法，该方法将现代分析检测技术和信息处理手段结合起来，为参一胶囊原料药的质量控制提供一种全面、稳定、可靠的评估方法，有利于相关制药企业控制中药制剂的质量，保证药物的药效稳定。为实现本专利技术的目的，本专利技术一方面提供一种参一胶囊原料药全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法，包括如下步骤：1)测定参一胶囊原料药中20(R)-人参皂苷Rg3的含量；2)检测相关物质。其中，步骤1)中所述参一胶囊原料药中20(R)-人参皂苷Rg3的含量测定包括如下顺序进行的步骤：1A)制备对照品溶液将精密称取的20(R)-人参皂苷Rg3对照品溶于乙睛-水的混合溶液中，制成20(R)-人参皂苷Rg3对照品溶液，其中，每1ml对照品溶液中含有0.01-0.2mg的20(R)-人参皂苷Rg3对照品；1B)制备供试品溶液将精密称取的参一胶囊原料药溶于乙睛-水的混合溶液中，制成参一胶囊原料药供试品溶液，其中，每1ml供试品溶液中含有0.01-0.2mg的参一胶囊原料药；1C)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以乙睛-水为流动相进行液相色谱测定洗脱；流速：0.5-1.5ml/min；柱温为25-50℃；紫外检测器检测，检测波长203-320nm下同时进行检测；进样量10μL；理论板数按20(R)-人参皂苷Rg3峰计算≥3000；1D)全时段多波长融合：将203-320nm波长下的谱图数据利用计算机软件进行全时段融合，得到一张能够同时反映多个波长融合后的参一胶囊原料药中20(R)-人参皂苷Rg3的HPLC色谱图和一组图谱数据；1E)样品含量测定：应用融合后的指纹图谱数据，计算样品中指标成分的含量；1F)对上述确定的含量测定方法进行有效性评价，其中包括专属性、准确度、精密度、重复性、稳定性、线性、范围以及耐用性。其中，步骤1A)中所述Rg3对照品溶液的浓度为每1mL对照品溶液中含有Rg3对照品0.1mg，即所述20(R)-人参皂苷Rg3对照品溶液的浓度优选为1mL溶液中含20(R)-人参皂苷Rg3对照品0.1mg。其中，步骤1B)中所述参一胶囊原料药为20(R)-人参皂苷Rg3。特别是，步骤1B)中所述供试品溶液按照如下步骤制备而成：经密称取参一胶囊原料药0.1-20mg，加乙睛-水混合溶液80mL超声溶解后，再加乙睛-水混合溶液定容至100mL容量瓶中，摇匀，即为供试品溶液；尤其是，步骤1A)、1B)中所述乙睛-水的混合溶液中乙腈与水的体积之比为50-95：5-50，优选为90:10。其中，步骤1C)中所述色谱柱的规格为4.6mm×250mm，5μm；所述流动相乙腈-水混合溶液中乙腈与水的体积之比为50-95：5-50，优选为90:10。特别是，所述色谱柱选择规格为4.6mm×250mm，5μm的AglientTC-C18色谱柱；所述流动相为乙睛与水的混合溶液；所述检测波长选择203、210、225、270、320nm。尤其是，步骤1C)所述液相色谱测定的色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，色谱柱尺寸为4.6mm×250mm，HypersilODS2，5μm；所述流动相中乙睛与水的体积之比为50-95：5-50，优选为90:10。特别是，步骤1C)中检测波长选择2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种参一胶囊原料药全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法，其特征是，包括如下步骤：1)测定参一胶囊原料药中20(R)‑人参皂苷Rg3的含量；2)检测相关物质。

【技术特征摘要】
1.一种参一胶囊原料药全时段多波长融合指纹图谱的质量控制方法，其特征是，包括如下步骤：1)测定参一胶囊原料药中20(R)-人参皂苷Rg3的含量；2)检测相关物质。2.如权利要求1所述的方法，其特征是，步骤1)中所述参一胶囊原料药中20(R)-人参皂苷Rg3的含量测定包括如下顺序进行的步骤：1A)制备对照品溶液将精密称取的20(R)-人参皂苷Rg3对照品溶于乙睛-水的混合溶液中，制成20(R)-人参皂苷Rg3对照品溶液，其中，每1ml对照品溶液中含有0.01-0.2mg的20(R)-人参皂苷Rg3对照品；1B)制备供试品溶液将精密称取的参一胶囊原料药溶于乙睛-水的混合溶液中，制成参一胶囊原料药供试品溶液，其中，每1ml供试品溶液中含有0.01-0.2mg的参一胶囊原料药；1C)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；以乙睛-水为流动相进行液相色谱测定洗脱；流速：0.5-1.5ml/min；柱温为25-50℃；紫外检测器检测，检测波长203-320nm下同时进行检测；进样量10μL；理论板数按20(R)-人参皂苷Rg3峰计算≥3000；1D)全时段多波长融合：将203-320nm波长下的谱图数据利用计算机软件进行全时段融合，得到一张能够同时反映多个波长融合后的参一胶囊原料药中20(R)-人参皂苷Rg3的HPLC色谱图和一组图谱数据；1E)样品含量测定：应用融合后的指纹图谱数据，计算样品中指标成分的含量；其中，所述样品中指标成分为20(R)-人参皂苷Rg3。1F)对上述确定的含量测定方法进行有效性评价，其中包括专属性、准确度、精密度、重复性、稳定性、线性、范围以及耐用性。3.如权利要求2所述的方法，其特征是，步骤1A)、1B)中所述乙睛-水的混合溶液中乙睛与水的体积比为50-95:50-5。4.如权利要求2所述的方法，其特征是，步骤1C)中检测波长选择203、210、225、270、320nm的波长。5.如权利要求1所述的方法，其特征是，步骤2)中所述检测相关物质包括如下顺序进行的步骤：2A)制备参一胶囊原料药有关物质检测的供试品溶液精密称取参一胶囊原料药溶于三氯甲烷-甲醇-水的混合溶液中，制成参一胶囊原料药有关物质检测的供试品溶液；2B)制备参一胶囊原料药相关物质检测的供试品自身对照溶液精密量取步骤2A)制备的供试品溶液适量，用三氯甲烷-甲醇-水的混合溶液稀释，配制成参一胶囊原料药有关物质检测的供试品自身对照溶液；2C)液相色谱测定灵敏度调节试验精密量取步骤...

【专利技术属性】
技术研发人员：富力，惠敏，鲁明明，王硕，刘正贤，鲁岐，冯雪，
申请(专利权)人：富力，
类型：发明
国别省市：辽宁,21