羊λ3干扰素突变体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种羊λ3干扰素突变体及其制备方法和应用。本发明专利技术首先公开了一种羊λ3干扰素突变体，其氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示。本发明专利技术将所述羊λ3干扰素突变体第58位氨基酸由丙氨酸突变成缬氨酸得到氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示的突变体，其抗病毒活性明显提高。本发明专利技术进一步将氨基酸序列为SEQ ID NO.5所示突变体进行氨基酸单位点突变、双位点突变和多位点突变，获得多个抗病毒活性提高的羊λ3干扰素突变体。本发明专利技术利用家蚕杆状病毒表达系统在家蚕生物反应器中表达的所述羊λ3干扰素突变体的抗病毒活性大幅度提高。本发明专利技术提供的羊λ3干扰素突变体能够用于制备预防或治疗羊病毒性疾病的药物或试剂。

【技术实现步骤摘要】
羊λ3干扰素突变体及其制备方法和应用
本专利技术涉及一种羊λ3干扰素突变体，还涉及一种利用家蚕杆状病毒表达系统制备所述羊λ3干扰素突变体的方法；本专利技术还涉及所述羊λ3干扰素突变体在制备预防或治疗羊病毒性疾病的药物或试剂中的应用，属于羊λ3干扰素突变体的制备及应用领域。
技术介绍
干扰素是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质，其活性的发挥又受细胞基因组的调节和控制，涉及RNA和蛋白质的合成。IFN蛋白家族根据其编码基因的序列、染色体定位和受体特异性分为Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型干扰素。Ⅰ型干扰素包括IFN-α、IFN-β、IFN-ω、IFN-δ、IFN-ε、IFN-ζ、IFN-τ等，哺乳动物中主要是IFN-α和IFN-β，Ⅰ型干扰素具有较强的抗病毒活性，主要通过干扰病毒的复制抑制其增殖，还具有抗肿瘤和免疫调节的功能。Ⅱ型干扰素只有IFN-γ一个成员，又称为免疫干扰素，主要作用是激活巨噬细胞杀灭微生物。Ⅲ型干扰素是新发现的细胞因子，包括λ1(IL-29)、λ2(IL-28a)和λ3(IL-28b)。Ⅲ型干扰素与Ⅰ型干扰素关系密切，但有特殊的生理学功能，如刺激主要组织相容性复合体(majorh本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种羊λ3干扰素，其特征在于：其氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示，其编码基因的多核苷酸序列为(a)或(b)或(c)所示：(a)、SEQ ID No.2所示的多核苷酸序列；或(b)、与SEQ ID No.2的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸序列，该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；或(c)、与SEQ ID No.2的多核苷酸序列至少有80％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；优选的，与SEQ ID No.2的多核苷酸序列至少有85％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；更优选的，与SEQ I...

【技术特征摘要】
1.一种羊λ3干扰素，其特征在于：其氨基酸序列为SEQIDNO.1所示，其编码基因的多核苷酸序列为(a)或(b)或(c)所示：(a)、SEQIDNo.2所示的多核苷酸序列；或(b)、与SEQIDNo.2的互补序列在严谨杂交条件能够进行杂交的多核苷酸序列，该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；或(c)、与SEQIDNo.2的多核苷酸序列至少有80％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；优选的，与SEQIDNo.2的多核苷酸序列至少有85％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性；更优选的，与SEQIDNo.2的多核苷酸序列至少有90％以上同源性的多核苷酸序列，且该多核苷酸编码的蛋白仍具有干扰素的功能或活性。2.一种羊λ3干扰素突变体，其特征在于：将权利要求1所述羊λ3干扰素的第19位氨基酸由丝氨酸突变成脯氨酸得到的突变体；所述突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.3所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.4所示。3.一种羊λ3干扰素突变体，其特征在于：将权利要求2所述羊λ3干扰素突变体的第58位氨基酸由丙氨酸突变成缬氨酸得到的突变体；所述突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.5所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.6所示。4.一种羊λ3干扰素突变体，其特征在于：将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行P30L、M41L、R59K、D64E、Q68P、G74S、G75S、L77I、T81S、L100V、M110L、G116H、R117S、E120D、Q127R、H128N、V129I、G144S、P145S、Q162R或F179L中的任何一种氨基酸单位点突变获得的突变体；优选为，将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行G74S、G75S、T81S、R117S、H128N或V129I中的任何一种氨基酸单位点突变获得的突变体；其中，将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行G75S氨基酸单位点突变获得的突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.7所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.8所示。5.一种羊λ3干扰素突变体，其特征在于：将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行G74S-G75S、G74S-T81S、G74S-R117S、G74S-H128N、G74S-V129I、G75S-T81S、G75S-R117S、G75S-H128N、G75S-V129I、T81S-R117S、T81S-H128N、T81S-V129I、R117S-H128N、R117S-V129I或H128N-V129I中的任何一种氨基酸双位点突变获得的突变体；优选为，将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行G74S-G75S、G75S-R117S或H128N-V129I任何一种氨基酸双位点突变获得的突变体；其中，将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行G75S-R117S氨基酸双位点突变获得的突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.9所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.10所示。6.一种羊λ3干扰素突变体，其特征在于：将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行G74S-G75S-R117S、G74S-G75S-H128N、G74S-G75S-V129I、G75S-R117S-H128N、G75S-R117S-V129I或R117S-H128N-V129I任何一种氨基酸多位点突变获得的突变体；优选为，将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行G74S-G75S-R117S氨基酸多位点突变获得的突变体；其中，将权利要求3所述的羊λ3干扰素突变体进行G74S-G75S-R117S氨基酸多位点突变获得的突变体的氨基酸序列为SEQIDNO.11所示，其编码基因的核苷酸序列为SEQIDNO.12所示。7.含有权利要求1所述羊λ3干扰素的编码基因或者含有权利要求2至6任何一项所述羊λ3干扰素突变体的编码基因的重组载体或重组宿主...

【专利技术属性】
技术研发人员：李轶女，张志芳，胡小元，易咏竹，赵泽，邵丽萍，刘兴健，杨鑫，邹媛媛，
申请(专利权)人：中国农业科学院生物技术研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11