一种新型的氰醇酶及其用于手性氰醇的合成的方法技术

本发明专利技术公开了一种新型的氰醇酶及其用于手性氰醇的合成的方法，具体涉及生物技术领域，所述新型的氰醇酶为野生氰醇裂解酶的第103位氨基酸残基、第128位氨基酸残基、141位氨基酸残基和第220位氨基酸残基发生突变而产生，并且第103位氨基酸残基突变为丙氨酸、精氨酸、天门冬酰胺或天门冬氨酸，第128位氨基酸残基突变为丙氨酸、半胱氨酸或谷氨酰胺。本发明专利技术通过采用冷冻干燥的方式取代现有技术中干燥浓缩分步进行的方式对手性氰醇半成品进行加工，在实际运用时，有效缩短了制备手性氰醇所需要的时间，降低了手性氰醇半成品的制备难度，可用于实验室制备的同时，还可以有效适用于工业化生产。

A Novel Cyanogenase and Its Application in the Synthesis of Chiral Cyanohydrin

The invention discloses a novel cyanogenase and a method for synthesizing chiral cyanohydrin, which specifically relates to the field of biotechnology. The novel cyanogenase is produced by mutation of 103 amino acid residue, 128 amino acid residue, 141 amino acid residue and 220 amino acid residue of wild cyanohydrin lyase, and the 103 amino acid residue is changed into alanine and 220 amino acid residue. Arginine, asparagine or aspartic acid, the 128th amino acid residue mutated to alanine, cysteine or glutamine. The chiral cyanohydrin semi-finished product is processed by freeze-drying instead of drying and concentrating step by step in the prior technology. In practical application, the time required for preparing chiral cyanohydrin is effectively shortened, the difficulty of preparing chiral cyanohydrin semi-finished product is reduced, and it can be used for laboratory preparation and also can be effectively applied to industrial production.

【技术实现步骤摘要】
一种新型的氰醇酶及其用于手性氰醇的合成的方法
本专利技术涉及生物
，更具体地说，本专利技术涉及一种新型的氰醇酶及其用于手性氰醇的合成的方法。
技术介绍
手性氰醇及其酯是一类在现代不对称合成研究中有重要学术价值的手性源。此外，它很容易转化为手性α-羟基酸(酯)，α-氨基酸，β-氨基醇等具有重要商业价值的医药和农药中间体。因此，它的合成一直受到学术界和工业界的高度重视。手性氰醇的合成一直是不对称合成领域中具有挑战性的课题。手性氰醇的不对称合成一般需要手性催化剂：化学手性催化剂或生物催化剂。后者由于来源丰富，催化效率高，其反应条件温和，产率和光学纯度高，底物适用范围广等特点而受到重视。专利申请公布号CN102417917B的专利技术专利公开了一种直接使用氰盐为氰源的酶催化合成手性乙酸氰醇酯的方法，该方法是：在反应容器中依次加入酶、氰盐、水、有机溶剂和醋酸并搅拌均匀，滴加醛类化合物，反应在室温条件下进行，反应时间为6-100h；反应结束后，将经分液后得到的有机相滴加到盛有乙酸酐和吡啶的混合液中，室温反应3-24h；经饱和碳酸氢钠和水洗、干燥、浓缩和柱层析纯化处理后，获得相应的目标化合物本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型的氰醇酶，其特征在于：所述新型的氰醇酶为野生氰醇裂解酶的第103位氨基酸残基、第128位氨基酸残基、141位氨基酸残基和第220位氨基酸残基发生突变而产生，并且第103位氨基酸残基突变为丙氨酸、精氨酸、天门冬酰胺或天门冬氨酸，第128位氨基酸残基突变为丙氨酸、半胱氨酸或谷氨酰胺，第141位氨基酸残基突变为丝氨酸、谷氨酸或赖氨酸，第220位氨基酸残突变为亮氨酸、丝氨酸或色氨酸。

【技术特征摘要】
1.一种新型的氰醇酶，其特征在于：所述新型的氰醇酶为野生氰醇裂解酶的第103位氨基酸残基、第128位氨基酸残基、141位氨基酸残基和第220位氨基酸残基发生突变而产生，并且第103位氨基酸残基突变为丙氨酸、精氨酸、天门冬酰胺或天门冬氨酸，第128位氨基酸残基突变为丙氨酸、半胱氨酸或谷氨酰胺，第141位氨基酸残基突变为丝氨酸、谷氨酸或赖氨酸，第220位氨基酸残突变为亮氨酸、丝氨酸或色氨酸。2.根据权利要求1所述的一种新型的氰醇酶，其特征在于：所述新型的氰醇酶具体制备方法包括以下步骤：S1：在适合的条件下，培养宿主细胞，从而表达出所述的新型的氰醇酶；S2：分离所述的新型的氰醇酶。3.根据权利要求1所述的一种新型的氰醇酶，其特征在于：所述野生氰醇裂解酶设置为木薯氰醇裂解酶MeHNL。4.根据权利要求1所述的一种新型的氰醇酶，其特征在于：所述第103位氨基酸残基突变为天门冬酰胺，所述第128位氨基酸残基突变为丙氨酸，所述141位氨基酸残基突变为丝氨酸，所述第220位氨基酸残基突变为亮氨酸。5.根据权利要求2所述的一种新...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘志斌，刘经辉，吴庆斌，周敦秀，
申请(专利权)人：南京普瑞特生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32