年龄相关疾病和病症的基因治疗方法技术

提供基因治疗方法，用于通过调控与年龄相关疾病或病症关联的一种或多种功能性蛋白来治疗或预防年龄相关疾病或病症。

Gene Therapy for Age-related Diseases and Diseases

Provide gene therapy for the treatment or prevention of age-related diseases or diseases by regulating one or more functional proteins associated with age-related diseases or diseases.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】年龄相关疾病和病症的基因治疗方法相关申请数据本申请要求2016年5月20日提交的美国临时申请号62/339,182和2016年11月14日提交的美国临时申请号62/421,665的优先权，其全部内容通过引用纳入本文用于所有目的。背景衰老是细胞，组织和器官水平的功能逐渐丧失和恶化，导致对疾病和外部应激源的易感性增加，并最终导致死亡。所有生物都会衰老，但衰老的影响可以被减缓或减小或操纵。许多实验已经显示出增加最大寿命以及健康寿命的能力，同时对年龄相关病症的易感性降低。迄今为止测试的衰老干预措施包括环境操纵，如热量限制(CR)，小分子药物如雷帕霉素，以及通过创造转基因动物如Ames和Snell矮小鼠实现的遗传操纵。虽然这些实验已经使人们更加了解衰老所涉及的机制，但它们并不适合转化至衰老的人类和宠物群体。热量限制要求严格遵守饮食限制，迄今为止的证据表明这不是治疗的可能途径。雷帕霉素具有免疫调节作用，可增加对某些病原体的易感性。而且创造转基因动物并不适用于所有现存的生物。在BernardesdeJesusB.等人，(2012)EMBOMolMed.4(8):691-704中描述了将hTERT经AAV递送到抗癌遗传背景小鼠中。基因治疗方法是已知的。例如，GLYBERA是来自uniQure的人类基因疗法，其通过肌内注射AAV(腺相关病毒)来添加所涉及基因的工作拷贝来治疗脂蛋白脂肪酶缺乏症(LPLD)。SPK-RPE65来自Spark治疗公司，是一种人类基因疗法，可治疗由无功能的RPE65基因引起的罕见致盲症。
技术实现思路
本公开内容提供基因治疗方法，例如组合基因治疗方法，以提供或调控一种或多种内源蛋白质。本公开内容提供了使用基因疗法治疗或预防年龄相关疾病和病症或衰老表型的方法。本公开内容提供了对基因的鉴定，所述基因与可能与衰老关联的某些疾病和病症相关。本公开内容提供对这些基因的调控，通过增加与基因相关的蛋白质或减少与基因相关的蛋白质来实现。本公开内容提供了通过引入在细胞内表达的功能性蛋白质的编码核酸来增加与基因相关的功能性蛋白质。所述表达导致功能性蛋白质的量增加，所述功能性蛋白质可以是细胞内的或分泌的，从而提供治疗效果或预防效果。本专利技术提供了基因的抑制，从而通过引入编码抑制性RNA的核酸来减少与基因相关的功能性蛋白，所述抑制性RNA在表达时与基因或信使RNA结合以抑制功能性蛋白质的表达。本公开提供了功能性蛋白质的抑制，从而通过引入编码蛋白质抑制剂(例如可溶性受体蛋白质)的核酸来降低功能性蛋白质的活性，所述蛋白质抑制剂在表达时与功能性蛋白质结合。本公开内容提供了使用靶向动物细胞的遗传构建体的基因治疗方法，以及使用载体(例如病毒载体)对此类遗传构建体的递送。本公开内容提供了使用靶向动物细胞的遗传构建体的基因治疗方法，以及使用诸如脂质体、合成或天然存在的聚合物、电穿孔、涂覆或未涂覆的纳米颗粒递送、扩散粒子递送、激光介导转染(光穿孔或光转染)等方法对此类遗传构建体的递送。参见例如Kim,T.K.等,(2010)AnalyticalandBioanalyticalChemistry.397(8):3173-3178。本公开内容提供了使用靶向动物细胞的遗传构建体的基因治疗方法以及对这种遗传构建体的递送，其中所述遗传构建体已经从原始DNA加工成miRNA，shRNA，RNAi，或mRNA(其中mRNA由5'帽和3'聚A或等同物组成)。根据另外的方面，使用本领域技术人员已知的5'帽类似物或本领域技术人员已知的3'聚A类似物将RNA靶向核糖体用于翻译。对于本文所述的基因治疗方法，本公开内容提供了基因或基因产物或编码该基因的DNA或对应于该基因的mRNA或对应于该基因的经加工的初-mRNA或miRNA在本文所述的基因治疗方法中的用途，只要基因或基因产物或编码该基因的DNA或对应于该基因的mRNA或对应于该基因的经加工的初-mRNA或miRNA被改变或调控以在本文所述的治疗或预防方法中提供细胞效应。调控或提供与年龄相关疾病和病症关联的某些蛋白质提供了预防方法或治疗方法以解决年龄相关疾病和病症。调控或提供与年龄相关疾病和病症关联的某些蛋白质或基因或基因产物或编码该基因的DNA或对应于该基因的mRNA或对应于该基因的经加工的初-mRNA或miRNA提供了使包括人和其他哺乳动物在内的生物体恢复活力的方法。本公开提供了基因治疗方法，其中将一个或多个或多种核酸(例如基因)递送至动物中的一种或多种靶细胞。本公开内容使用单一载体向细胞递送多种核酸，所述核酸包括驱动其表达的单一启动子。表达一个或多个或多种核酸以产生一种或多种相应的蛋白质，并且一种或多种蛋白质改变生物体的病症。本公开提供了组合疗法，其中不同细胞类型被动物中的一个或多个或多种核酸靶向。本公开提供了组合疗法，其中细胞内的一种或多种细胞过程被一个或多个或多种核酸靶向。本公开内容提供了使用病毒载体(例如细小病毒的病毒粒子)的基因治疗。本公开内容提供了使用病毒载体(例如腺相关病毒(“AAV”))的基因治疗。腺相关病毒将外源基因插入细胞中，并且由外源基因编码的蛋白质将会表达。以这种方式，蛋白质，无论是功能性蛋白质、抑制性RNA还是抑制性蛋白质，都会改变细胞和/或携带细胞的生物体。本公开内容提供了与年龄相关疾病或病症的减缓，抑制，预防或逆转。示例性的年龄相关或其他疾病或病症包括心血管疾病，糖尿病，动脉粥样硬化，肥胖症，癌症，感染和神经障碍中的一种或多种。本公开提供了长期基因疗法以治疗和/或预防年龄相关疾病或病症或其他疾病或病症。这些方法包括逆转年龄相关疾病和病症，并纠正这些病理状态，从而提高健康寿命(良好生活质量的年数)和寿命。本公开内容提供了用于鉴定待调控的基因或基因的集的方法，所述基因或基因的集预防或治疗一种或多种疾病或病症，例如与衰老相关的疾病或病症。基因或基因的集被鉴定为与年龄相关疾病或病症有关。确定基因与特定组织类型相关或不相关，从而可以确定使用所需方法对基因的适当调控。另外，与特定组织类型相关的基因可受益于使用特定载体的调控，所述特定载体向特定组织类型细胞递送核酸，抑制性RNA或抑制性蛋白质以调控特定组织类型细胞内蛋白质的量或活性。组织特异性启动子可用于表达核酸。编码特定功能蛋白，抑制性RNA或抑制性蛋白的示例性核酸在附录A中提供，其序列在附录A中提供或者是文献中容易知道或可获得的。同样，功能性蛋白质，抑制性RNA或抑制性蛋白质的序列是本领域技术人员已知的，或者可以源自核酸序列。附录B包括基因的小鼠版本的DNA和氨基酸序列以及靶向多种RNA种类的初-miRNA(pri-miRNA)DNA构建体。如本文所述的功能性蛋白质可以是全长蛋白质或是与全长蛋白质不同但保留全长蛋白质的全部或部分活性的蛋白质。本专利技术的某些实施方式的其他特征和优势将在权利要求中以及以下附图和实施方式的说明下更为显而易见。附图说明图1是AAC手术后7周后的代表性超声心动图。图2是显示TGFb1敲减对比剂量的数据图。图3是显示纤维化百分比和相关图像的数据图。图4是显示对照心脏和经处理的心脏切片的WGA染色的图像。图5是显示对照中心脏参数变化对比sTGFbR2-FC给予中心脏参数变化的数据图。图6是代表性的三色染色图像本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种病毒载体，包含：第一核酸序列，所述第一核酸序列包含能够表达哺乳动物蛋白或抑制剂mRNA产物的基因，其中所述基因选自表1，并且所述第一核酸序列与第一调控序列操作性连接，用于在哺乳动物细胞中表达产物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.20 US 62/339,182;2016.11.14 US 62/421,6651.一种病毒载体，包含：第一核酸序列，所述第一核酸序列包含能够表达哺乳动物蛋白或抑制剂mRNA产物的基因，其中所述基因选自表1，并且所述第一核酸序列与第一调控序列操作性连接，用于在哺乳动物细胞中表达产物。2.如权利要求1所述的病毒载体，其中第一调控序列包括第一启动子，其中第一启动子是组成型启动子或诱导型启动子。3.如权利要求1或2所述的病毒载体，其中第一调控序列包括选自以下的第一启动子：heFla启动子、CAGGS(巨细胞病毒、鸡β-肌动蛋白内含子、兔β-珠蛋白基因的剪接受体)、CMV、shEf1a(截短的hEf1a)、AAT启动子、甲状腺激素结合球蛋白启动子、白蛋白启动子、甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子、肝控制区(HCR)-ApoCII混合启动子、CASI、HCR-hAAT混合启动子和与小鼠白蛋白基因增强子(Ealb)元件和载脂蛋白E启动子组合的AAT启动子。4.如权利要求1至4中任一项所述的病毒载体，其中所述基因是FGF21、Klotho或sTGFbR2-FC。5.如权利要求1至4中任一项所述的病毒载体，其中第一核酸序列序列与第一3'非翻译区操作性连接，用于RNA在哺乳动物细胞中的稳定性和表达。6.如权利要求5所述的病毒载体，其中第一3'非翻译区包含第一组织特异性miRNA结合序列，以调控融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达。7.如权利要求6所述的病毒载体，其中第一组织特异性miRNA结合序列包含第一mir122a组织特异性miRNA结合序列，以阻止在肝细胞中表达。8.如权利要求5至7中任一项所述的病毒载体，其中第一3'非翻译区包含选自以下的聚腺苷酸化信号：WPRE，WPRE3，SV40后聚腺苷酸化信号(截短的SEQID：114)，HBG聚腺苷酸化信号，兔β珠蛋白聚A，牛bgpA和ETC聚腺苷酸化信号或它们的混合体。9.如权利要求1-8中任一项所述的病毒载体，其中所述病毒载体是细小病毒载体。10.如权利要求9所述的病毒载体，其中所述细小病毒载体是腺相关病毒(AAV)载体。11.如权利要求10所述的病毒载体，其中AAV载体选自AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV2.5、或AAVrh10.XX(其中xx代表不同的已知变体)病毒载体。12.如权利要求10-11中任一项所述的病毒载体，其中所述病毒载体按AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV2.5、或AAVrh10.XX(其中xx代表不同的已知变体)或它们的组合而血清分型。13.AAV载体，所述AAV载体选自表3的AAV载体。14.一种治疗年龄相关疾病或病症的方法，包括给予治疗有效量的一种或多种如权利要求1至12中任一项所述的病毒载体，或一种或多种如权利要求13所述的AAV载体。15.如权利要求14所述的方法，包括给予选自表1的多种病毒载体，或选自表3的多种AAV载体。16.一种病毒载体，包含：第一核酸序列，所述第一核酸序列编码哺乳动物可溶性转化生长因子β受体II(sTGFβ-R2)蛋白或其片段和IgFc结构域的融合蛋白，所述sTGFβ-R2蛋白或其片段具有受体细胞外结构域，其中所述融合蛋白能够结合TGFβ1，并且第一核酸序列与第一调控序列操作性连接，用于在哺乳动物细胞中表达融合蛋白。17.如权利要求16所述的病毒载体，其中哺乳动物sTGFβ-R2蛋白是人sTGFβ-R2蛋白。18.如权利要求16所述的病毒载体，其中哺乳动物sTGFβ-R2蛋白是犬sTGFβ-R2蛋白。19.如权利要求16所述的病毒载体，其中哺乳动物sTGFβ-R2蛋白选自人、犬、猫、牛、绵羊、山羊、马、鼠和猪sTGFβ-R2蛋白。20.如权利要求16所述的病毒载体，其中编码的哺乳动物sTGFβ-R2蛋白与对应于SEQIDNO：17、11、10、5的哺乳动物sTGFβ-R2蛋白的氨基酸序列(以及猫、牛、绵羊、山羊、马、鼠和猪)具有至少90％的序列相同性。21.如权利要求16-20中任一项所述的病毒载体，其中IgFc选自人、犬、猫、牛、绵羊、山羊、马、鼠和猪IgFc。22.如权利要求21所述的病毒载体，其中IgFc是选自IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgG4的IgG的Fc。23.如权利要求21所述的病毒载体，其中所述IgFc与SEQIDNO：20、27所示的IgFc的氨基酸序列具有至少90％的序列相同性。24.如权利要求16-23中任一项所述的病毒载体，其中第一调控序列包括用于在肝细胞中表达融合蛋白的第一肝组织特异性启动子。25.如权利要求16-24中任一项所述的病毒载体，其中第一调控序列包括第一启动子，其中第一启动子是组成型启动子或诱导型启动子。26.如权利要求16-24所述的病毒载体，其中第一调控序列包括选自以下的第一启动子：heF1a启动子，AAT启动子，甲状腺激素结合球蛋白启动子，白蛋白启动子，甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子的，肝控制区(HCR)-ApoCII混合启动子，HCR-hAAT混合启动子和与小鼠白蛋白基因增强子(Ealb)元件和载脂蛋白E启动子组合的AAT启动子。27.如权利要求16-26的病毒载体，其中第一调控序列包括组成型启动子。28.如权利要求16至27中任一项所述的病毒载体，其中第一核酸序列序列与第一个3'非翻译区操作性连接，用于RNA在哺乳动物细胞中的稳定性和表达。29.如权利要求28所述的病毒载体，其中第一3'非翻译区包含第一组织特异性miRNA结合序列，以调控融合蛋白在哺乳动物细胞中的表达。30.如权利要求29所述的病毒载体，其中第一组织特异性miRNA结合序列包括第一mir122a组织特异性miRNA结合序列，以阻止在肝细胞中表达。31.如权利要求28至30中任一项所述的病毒载体，其中第一3'非翻译区包含选自以下的聚腺苷酸化信号：WPRE3，SV40后聚腺苷酸化信号(截短的SEQID：113和114)，HBG聚腺苷酸化信号和ETC聚腺苷酸化信号或它们的混合体。32.如权利要求16或31中任一项所述的病毒载体，所述病毒载体还包含编码哺乳动物核因子(红系细胞衍生的2)样2(Nrf2)蛋白的第二核酸，其中第二核酸序列与第二调控序列操作性连接，用于在所述哺乳动物细胞中表达Nrf2蛋白。33.如权利要求32所述的病毒载体，其中哺乳动物sTGFβ-R2蛋白和哺乳动物Nrf2蛋白属于相同的哺乳动物物种。34.如权利要求33所述的病毒载体，其中哺乳动物物种选自人、犬、猫、牛、绵羊、山羊、马、鼠和猪。35.如权利要求32-34中任一项所述的病毒载体，其中第二调控序列包括用于在肝细胞中表达Nrf2蛋白的第二肝组织特异性启动子。36.如权利要求32-35中任一项所述的病毒载体，其中第二调控序列包括第二启动子，其中第二启动子是组成型启动子或诱导型启动子。37.如权利要求32-36中任一项所述的病毒载体，其中第二调控序列包括选自以下的第二启动子：heF1a启动子，AAT启动子，甲状腺激素结合球蛋白启动子，白蛋白启动子，甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子的，肝控制区(HCR)-ApoCII混合启动子，HCR-hAAT混合启动子和与小鼠白蛋白基因增强子(Ealb)元件和载脂蛋白E启动子组合的AAT启动子。38.如权利要求32-37中任一项所述的病毒载体，其中第二调控序列包括组成型启动子。39.如权利要求32至38中任一项所述的病毒载体，其中第二核酸序列序列与第二3'非翻译区操作性连接，调控RNA在哺乳动物细胞中的稳定性和表达。40.如权利要求32-39中任一项所述的病毒载体，其中第二3'非翻译区包含第二组织特异性miRNA结合序列，以调控哺乳动物细胞中Nrf2蛋白的表达。41.如权利要求40所述的病毒载体，其中第二组织特异性miRNA结合序列包括第二mir122a组织特异性miRNA结合序列，以阻止在肝细胞中表达。42.如权利要求32至39中任一项所述的病毒载体，其中第二3'非翻译区包含选自以下的第二聚腺苷酸化信号：WPRE3，SV40后聚腺苷酸化信号(截短的SEQID：114)，HBG聚腺苷酸化信号和ETC聚腺苷酸化信号或它们的混合体。43.如权利要求32所述的病毒载体，其中编码Nrf2蛋白的第二核酸与第一调控序列操作性连接以表达编码融合蛋白和Nrf2蛋白的多顺反子mRNA转录物，其中第二调控序列包含操作性连接的IRES或2A序列，用于由多顺反子转录物表达Nrf2蛋白。44.如权利要求16-44中任一项所述的病毒载体，其中所述病毒载体是细小病毒载体。45.如权利要求44所述的病毒载体，其中所述病毒载体是腺相关(AAV)病毒载体。46.如权利要求45所述的病毒载体，其中AAV载体选自AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV2.5、和AAVrh10.XX(其中xx代表不同的已知变体)病毒载体。47.如权利要求45-47中任一项所述的病毒载体，其中所述病毒载体按AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV2.5、和AAVrh10.XX(其中xx代表不同的已知变体)或它们的组合而血清分型。48.包含第一病毒载体和第二病毒载体的组合物，其中第一病毒载体包含第一核酸序列，所述第一核酸序列编码哺乳动物可溶性转化生长因子β受体II(sTGFβ-R2)蛋白或其片段和IgFc结构域的融合蛋白，所述sTGFβ-R2蛋白或其片段具有受体细胞外结构域，其中所述融合蛋白能够结合TGFβ1，并且第一核酸序列与合适的调控序列操作性连接，用于在哺乳动物细胞中表达，并且第一病毒载体任选地包含第一抑制剂序列，以抑制第一核酸序列在非靶组织中的表达；和第二病毒载体包含第二核酸序列，所述第二核酸序列编码哺乳动物核因子(红系细胞衍生的2)样2(Nrf2)蛋白，其中第二核酸序列与第二调控序列操作性连接以在哺乳动物细胞中表达，并且第二病毒载体任选地包含第二抑制剂序列以抑制第二核酸序列在非靶组织中的表达。49.一种减少哺乳动物中纤维化组织发育的方法，包括给予哺乳动物治疗有效量的权利要求16-47中任一项所述的病毒载体或权利要求48所述的组合物。50.一种治疗哺乳动物心脏、肝、肺或肾的纤维化的方法，包括给予哺乳动物治疗有效量的权利要求1至47中任一项所述的病毒载体或权利要求48所述的组合物。51.一种病毒载体，其包含编码哺乳动物脂连蛋白的第一核酸序列，其中第一核酸序列与调控序列操作性连接，用于在哺乳动物细胞中表达脂连蛋白，并且所述病毒载体任选地包含抑制剂序列以抑制第一核酸序列在非靶组织中的表达。52.如权利要求51所述的病毒载体，其中编码的哺乳动物脂连蛋白与对应于SEQIDNO：34人脂连蛋白的氨基酸序列具有至少90％的序列相同性。53.如权利要求51-52中任一项所述的病毒载体，还包含编码哺乳动物谷胱甘肽S-转移酶κ1(DsbA-L；GSTK1)蛋白的第二核酸序列，其中第二核酸与第二调控序列操作性连接，用于在哺乳动物细胞中表达GSTK1蛋白。54.如权利要求53所述的病毒载体，其中编码的哺乳动物GSTK1蛋白与对应于人GSTK1蛋白的氨基酸序列具有至少90％的序列相同性。55.如权利要求51-54中任一项所述的病毒载体，其中所述病毒载体包括AAV载体。56.如权利要求55所述的病毒载体，其中所述AAV载体是自身互补的AAV载体。57.如权利要求51-56中任一项所述的病毒载体，其中AAV载体选自AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV2.5、和AAVrh10.XX(其中xx代表不同的已知变体)病毒载体。58.包含第一病毒载体和第二病毒载体的组合物，其中第一病毒载体包含编码哺乳动物脂连蛋白的第一核酸序列，其中第一核酸序列与调控序列操作性连接，用于在哺乳动物细胞中表达脂连蛋白，并且所述病毒载体任选地包含抑制剂序列以抑制第一核酸序列在非靶组织中的表达，和第二病毒载体包含第二核酸序列，所述第二核酸序列编码哺乳动物谷胱甘肽S-转移酶κ1(DsbA-L；GSTK1)蛋白，其中第二核酸序列与第二调控序列操作性连接以在哺乳动物细胞中表达GSTK1蛋白，并且第二病毒载体任选地包含第二抑制剂序列以抑制第二核酸序列在非靶组织中的表达。59.如权利要求58所述的组合物，其中第一病毒载体是第一自身互补的AAV，第二种病毒载体是第二自身互补的AAV载体。60.如权利要求58-59中任一项所述的组合物，其中第一病毒载体包括选自以下的AAV载体：AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV2.5、和AAVrh10.XX(其中xx代表不同的已知变体)病毒载体。61.如权利要求58-60中任一项所述的组合物，其中第二病毒载体包括选自以下的AAV载体：AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10、AAV11、AAV12、AAV2.5、和AAVrh10.XX(其中xx代表不同的已知变体)病毒载体。62.一种治疗与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予治疗有效量的权利要求51至57中任一项所述的病毒载体或权利要求58至61中任一项所述的组合物。63.一种治疗年龄相关疾病或病症的方法，包括给予对象治疗有效量的一种或多种合适的病毒表达载体，其中所述一种或多种病毒载体在对象中表达有效量的一种或多种异源功能蛋白，所述异源功能蛋白选自：脂连蛋白，Adra1a(mut)、AMPK、Atg5、BubR1、mCat、Cebpβ、Cisd2d、FGF21、GDF15(hNAG)、HAS2(nmr)、人源化FoxP2、Klotho、Mt1、NEU1、NGF、Nrf2、NUDT1、Par4SAC结构域、Pck1、sIGF1r-Fc、Sirt1、Sirt6、TERT、TFAM、TFEB、sTGFbR2-Fc、BMP2、BMP4、Sema3a和Txn1。64.一种治疗年龄相关疾病或病症的方法，包括给予有效量的一种或多种合适的病毒表达载体以在对象中表达有效量的一种或多种异源抑制剂RNA序列，所述异源抑制剂RNA序列抑制选自以下的一种或多种内源蛋白质的表达：ADcy5、Agtr1a、Akt1、Cebpα、Coq7、Ctf1、Dgat1、Ikbkb、Insr、mTOR、nf-kb、Pappa、PACKS、PDE4b、Prkar2b、Rps6kb1(S6K1)、Slc13a1、Slc13a5(INDY)，和Ubd。65.一种治疗与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予有效量的一种或多种合适的病毒表达载体，用以在对象中表达有效量的一种或多种选自以下的异源功能蛋白：脂连蛋白，Adra1a(mut)、AMPK、Atg5、BubR1、mCat、Cebpβ、Cisd2d、FGF21、GDF15(hNAG)、HAS2(nmr)、人源化FoxP2、Klotho、Mt1、NEU1、NGF、Nrf2、NUDT1、Par4SAC结构域、Pck1、sIGF1r-Fc、Sirt1、Sirt6、TERT、TFAM、TFEB、sTGFbR2-Fc、BMP2、BMP4、Sema3a和Txn1；在对象中表达有效量的一种或多种异源抑制剂RNA序列，所述异源抑制剂RNA序列抑制一种或多种选自以下的内源蛋白的表达：ADcy5、Agtr1a、Akt1、Cebpα、Coq7、Ctf1、Dgat1、Ikbkb、Insr、mTOR、nf-kb、Pappa、PACKS、PDE4b、Prkar2b、Rps6kb1(S6K1)、Slc13a1、Slc13a5(INDY)，和Ubd。66.一种治疗哺乳动物的与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予有效量的一种或多种合适的病毒表达载体，用以在哺乳动物中表达一种或多种选自以下的异源功能蛋白：脂连蛋白、AMPK、Cebpβ、FGF21、GDF15(hNAG)、Pck1、Sirt1、PCSK9、BMP2、BMP4、Sema3a和UCP1，或在哺乳动物中表达一种或多种异源抑制剂RNA序列，所述异源抑制剂RNA序列抑制一种或多种选自以下的内源蛋白的表达：Cebpα、Dgat1、Insr、mTOR、Prkar2b、Slc13a1、Slc13a5(INDY)和Ubd。67.一种治疗哺乳动物的与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予有效量的一种或多种合适的病毒表达载体，用以在哺乳动物中表达一种或多种选自FGF21、GDF15(hNAG)、Klotho、sIGF1r-Fc、BMP2、BMP4、Sema3a和Sirt6的异源功能蛋白；和在哺乳动物中表达一种或多种异源抑制剂RNA序列，所述异源抑制剂RNA序列抑制一种或多种选自Akt1、mTOR、Pappa、Rps6kb1和(S6K1)的内源蛋白的表达。68.一种治疗哺乳动物的与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予有效量的一种或多种合适的病毒表达载体，用以在哺乳动物中表达一种或多种选自Atg5、Cisd2d和TFEB的异源功能蛋白；和在哺乳动物中表达一种或多种异源抑制剂RNA序列，所述异源抑制剂RNA序列抑制一种或多种选自Akt1和mTOR的内源蛋白的表达。69.一种治疗哺乳动物的与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予有效量的一种或多种合适的病毒表达载体，用以在哺乳动物中表达一种或多种选自Klotho、Nrf2、Sirt1、sTGFbR2-Fc和Txn1的异源功能蛋白；和在哺乳动物中表达一种或多种异源抑制剂RNA序列，所述异源抑制剂RNA序列抑制内源Ctf1蛋白的表达。70.一种治疗哺乳动物的与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予有效量的一种或多种合适的病毒表达载体，用以在哺乳动物中表达一种或多种选自BubR1、HAS2(nmr)、NUDT1、Par4SAC结构域和TERT的异源功能蛋白；和在哺乳动物中表达一种或多种抑制剂RNA序列，所述异源抑制剂RNA序列抑制一种或多种选自Coq7和Ctf1的内源蛋白的表达。71.一种治疗哺乳动物的与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予有效量的一种或多种合适的病毒表达载体，用以在哺乳动物中表达一种或多种选自以下的异源功能蛋白：mCat、Cisd2d、Mt1、Nrf2、Pck1、Sirt6和TFAM；和表达一种或多种抑制剂RNA序列，所述抑制剂RNA序列抑制一种或多种选自以下的内源蛋白的表达：ADcy5、Agtr1a、Coq7和Slc13a1。72.一种治疗哺乳动物的与年龄有关的疾病或病症的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体，用以在哺乳动物中表达一种或多种选自以下的异源功能蛋白：Adra1a(mut)、人源化FoxP2、NEU1、NGF和NUDT1；和表达一种或多种抑制剂RNA序列，所述抑制剂RNA序列抑制一种或多种选自Ikbkb和PDE4b的内源蛋白的表达。73.一种治疗哺乳动物的年龄相关疾病或病症的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自FGF21、BMP2、BMP4和SEM3A的一种或多种异源功能蛋白。74.一种治疗哺乳动物的年龄相关疾病或病症的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自GDF15、TERT、BubR1、Agtra1a、Adcy5、Coq7、Slc13a1和Ikbkb的一种或多种异源功能蛋白。75.一种治疗哺乳动物的年龄相关疾病或病症的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自BubR1、Cis2d、Txn1、FGF21、BubR1、Agtr1a、ikbkb、mTOR、Nudt1、Slc13a5、pappa、Coq7、Sdcy5、Agtr1a和Ctf1/akt1的一种或多种异源功能蛋白。76.一种治疗哺乳动物的年龄相关疾病或病症的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自BubR1、Cis2d、Txn1、FGF21、BubR1、Agtr1a、ikbkb、mTOR、Nudt1、Slc13a5、pappa、Coq7、Sdcy5、Agtr1a和Ctf1/akt1的一种或多种异源功能蛋白。77.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自FGF21、Nrf2、sTGFbR2-Fc、HAS2、Nudt1、TERT、BubR1、Par4、Ubd、Dgat1、Ctf1、Coq7Adcy5、Agtr1a和mTOR的一种或多种异源功能蛋白。78.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自Atg5、Nudt1、Adra1a(mut)、NGF、NEU1、人源化foxP2、TFEB、PDE4b、mTOR、Slc13a5、Slc13a5、Coq7、Akt1、ikbkb和Slc13a1的一种或多种异源功能蛋白。79.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自klotho、GDF15(hNAG)、sIGF1r-Fc、Mt1、Adra1a(mut)、Nrf2、Rps6kb1、PCsk9、Prkar2b、Dgat、Ctf1、Coq7、papa和ikbkb的一种或多种异源功能蛋白。80.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自Atg5、Cebpa、pb、Ctf1、akt1、Pck1、脂连蛋白、PcsK9、Nrf2、Cisd2、papa、Dgat、Ctf1、Coq7和mTOR的一种或多种异源功能蛋白。81.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自FGF21、GDF15、klotho、Adra1a(mut)、Sirt6、Bubr1、Par4、Coq7、Adcy5、Agtr1a、Agtr1a、ikbkb、mTOR、Slc13a1、papa、Ctf1、Ctf1和Slc13a5的一种或多种异源功能蛋白。82.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自FGF21、GDF15、klotho、TERT、sIGF1r-Fc、Bubr1、Par4、Rps6kb1、PCSk9、Adcy5、Coq7、Agtr1a、ikbkb、mTOR和Slc13a1的一种或多种异源功能蛋白。83.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自klotho、Txn1、Nrf2、TFEB、sTGFbr2-Fc、Nudt1、mt1、Atg5、Bubr1、Par4、Ctf1、Coq7和ikbkb的一种或多种异源功能蛋白。84.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自FGF21、sIGF1r-Fc、klotho、sTGFbr2-Fc、GDF15、HAS2、Mt1、Txn1、Nrf2、mCAT、Adra1a(mut)、TFEB、Bubr1、Par4、Atg5、Cisd2、Nudt1、Sirt1、Sirt6、mTOR、slc13a5、pappa、ikbkb、adcy5、agtr1a和akt1的一种或多种异源功能蛋白。85.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自TFEB、Atg5、klotho、UCP1、Cebpβ、miCebpa、脂连蛋白、Mt1、Txn1、Nrf2、mCAT、TERT、Bubr1、Par4、TFAM、Cisd2、Nudt1、Neu1、NGF、Sirt6、Dgat、prkar2b、insr、ubd、Coq7、Ctf1、mTOR和Slc13a5的一种或多种异源功能蛋白。86.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自sTGFbR2-FC和Nrf2的一种或多种异源功能蛋白。87.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自FGF21、TERT、BubR1、Agtra1a、Adcy5、Coq7、Slc13a1、Ikbkb、Klotho、GDF15、CTF1、mTOR、Slc13a5、Pappa、Pcsk9和Rps6kb1的一种或多种异源功能蛋白。88.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自FGF21、GDF15、Klotho、Adra1a(mut)、Sirt6、BubR1、Agtra1a、Adcy5、Akt1、MCAT、Slc13a1、Ikbkb、Ctf1、mTOR、Coq7和Slc13a5的一种或多种异源功能蛋白。89.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自Txn1、Sirt6、Mt1、TFEB、Pck1、脂连蛋白、Cisd2、Nudt1、Atg5、Ctf1、Ikbkb和Coq7的一种或多种异源功能蛋白。90.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达一种或多种选自Fgf21、Nrf2、sTGFbR2-FC、Has2、NudT1、TERT、BubR1、Dgat1、Pappa、Ctf1、mTOR、Coq7、Slc13a5、Agtra1a、Adcy5和Akt1的异源功能蛋白。91.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自Ctf1、Coq7、Agtra1a、Adcy5、mTOR、Cisd2、MCAT、FGF21、GDF15、Klotho、Slc13a1、Ikbkb、Txn1和Sirt6的一种或多种异源功能蛋白。92.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自Klotho、GDF15、Neu1、Mt1、Adra1a、hFoxP2、PCSK9、Rps6kb1、Ctf1、Ikbkb、Coq7、Slc13a1、mTOR和NudT1的一种或多种异源功能蛋白。93.一种治疗哺乳动物肥胖症和II型糖尿病的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自Atg5、Ctf1、Akt1、BubR1、Pck1、脂连蛋白、TERT、Nrf2、Cisd2、Dgat1、Pappa、Ctf1、mTOR、Coq7和Slc13a5的一种或多种异源功能蛋白。94.一种治疗哺乳动物以调节肥胖和血糖的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自FGF21、BMP2、BMP4和SEM3A的一种或多种异源功能蛋白。95.一种治疗哺乳动物的年龄相关疾病或病症的方法，包括给予一种或多种合适的病毒表达载体以在哺乳动物中表达选自GDF15、脂连蛋白、ZAG和NRF2的一种或多种异源功能蛋白。96.一种病毒载体，包含：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14种核酸序列，各核酸编码相应的功能蛋白，其中核酸序列操作性连接调控序列用于在哺乳动物中表达。97.一种病毒载体，包含：2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14种核酸序列，各核酸编码相应的抑制性RNA序列，其中核酸序列操作性连接调控序列用于在哺乳动物中表达。98.一种包含盒的病毒载体，所述盒包含第一核酸序列和第二核酸序列，第一核酸序列与编码哺乳动物可溶性转化生长因子β受体II蛋白的核酸序列具有至少90％同源性并且包含所述受体的胞外部分，第二核酸序列与编码Fc(可结晶片段)结构域的核酸序列具有至少90％同源性，其中第一和第二核酸序列的表达产生哺乳动物可溶性转化生长因子β受体II蛋白和Fc的融合蛋白，和其中第一核酸序列和第二核酸序列与...

【专利技术属性】
技术研发人员：N·戴维森，G·M·丘奇，
申请(专利权)人：哈佛学院董事及会员团体，
类型：发明
国别省市：美国,US