初免靶向制造技术

本发明专利技术涉及包含至少第一组合物和第二组合物的试剂盒，所述第一和第二组合物各自包含肝脏疾病抗原的至少一个表位，其中所述表位是CD8+T细胞表位，其用于通过肌内(i.m.)、皮下(s.c.)，皮内(i.d.)或气雾剂途径施用所述第一组合物，并通过静脉内(i.v.)或皮下(s.c.)途径施用所述第二组合物，诱导哺乳动物受试者的肝脏中的免疫应答，其特征在于，所述第一和第二组合物通过不同途径施用。本发明专利技术还涉及用途、方法和治疗。

Initial targeting

The present invention relates to a kit containing at least one of the first and second compositions, each containing at least one epitope of liver disease antigen, wherein the first and second compositions are CD8+T cell epitopes, which are used for intramuscular (i.m.), subcutaneous (s.c.), intracutaneous (i.d.) or aerosol application of the first composition, and intravenous (i.v.) or subcutaneous (s.c.) application of the first composition. Diameter application of the second composition induces immune response in the liver of a mammalian subject. The first and second compositions are applied in different ways. The invention also relates to use, method and treatment.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】初免靶向专利
本专利技术属于靶向免疫应答领域，特别是靶向肝脏的免疫应答。专利技术背景抗原特异性T细胞的诱导被认为对于保护免受许多细胞内病原体是重要的，例如人免疫缺陷病毒(HIV)、结核分枝杆菌(Mtb)、疟原虫物种、利什曼原虫和其他病毒病原体。除了传染病之外，细胞适应性免疫对于清除表达肿瘤相关抗原的肿瘤也很重要。因此，许多新型疫苗策略的目标是产生大量旨在杀死受感染细胞的记忆CD8+T细胞。用病毒载体疫苗进行的异种的初免(prime)-加强免疫接种已被证明是产生大量循环T淋巴细胞的最有效策略之一。一种由肌内注射(i.m.)腺病毒(Ad)初免随后是改良安卡拉痘苗病毒(MVA)i.m.加强免疫组成的疫苗接种方案能够显著增加循环中抗原特异性(Ag特异性)T细胞的总数以及它们的亲和力，使它们能够识别表达极低水平抗原的靶细胞(Estcourt,M.J.,etal.,Prime-boostimmunizationgeneratesahighfrequency,high-avidityCD8(+)cytotoxicTlymphocytepopulation.Internationalimmunology,2002.14(1):p.31-7)。该策略已成功地在各种疾病的临床前和人体临床试验中仅产生部分水平的保护性免疫。由疟原虫物种引起的疟疾是世界上最重要的传染病之一，与高发病率和死亡率相关，特别是在撒哈拉以南非洲五岁以下儿童中。随着抗疟药物和抗药性的增加，迫切需要一种有效的高效疫苗接种方案。已经研究了针对疟原虫生命周期的不同阶段的各种不同的亚单位疫苗策略，迄今为止观察到的最大成功是子孢子和肝脏阶段疟疾候选物的。特别是RTS,S/AS01(一种诱导针对环子孢子(CS)蛋白的抗体的佐剂制剂中的蛋白质)以部分功效完成了III期现场试验，但尚未达到WHO的资格预审。诱导针对疟疾的红细胞前期阶段的保护的另一种方法是产生针对感染的肝细胞的细胞免疫。已经证明了干扰素-γ+(IFNγ)CD8+T细胞在小鼠中预防肝脏阶段疟疾的能力。为此，已经投入大量精力来优化病毒载体、异种的初免-加强免疫策略，其能够产生高频率的抗原(Ag)特异性CD8+T细胞。在临床前和临床研究中均最有希望的方案包括腺病毒(Ad)病毒载体初免，其随后用表达相同抗原的改良安卡拉痘苗病毒(MVA)加强免疫。除疟疾外，该策略还已临床上用于许多疾病，例如埃博拉病毒、结核分枝杆菌、HIV和流感。用异种的初免-加强免疫Ad和表达TRAP的MVA接种可诱导大量循环疟疾特异性CD8+T细胞，在初次接触疟疾和暴露前的个体中具有一定程度的临床功效。但是为了获得更高水平的功效，最有可能需要更多数量的循环CD8+T细胞，如小鼠中的情况。尽管在过去20年取得了大量进展，但旨在诱导细胞介导的抗疟疾免疫力的疫苗可能受到与寄生虫生物学和肝脏微观解剖学相关的许多具有挑战性的时空因素的阻碍。因此，仍然迫切需要一种高效的抗疟疾疫苗，主要的疫苗接种策略主要针对疟原虫生命周期的红细胞前期、子孢子和肝脏阶段。已知产生高水平干扰素-γ的细胞毒性抗原特异性CD8+T细胞是保护性的，异种的初免-加强免疫病毒载体免疫是一种特别有效的诱导方法。因此，开发高效疟疾疫苗已成为主要的研究目标，特别是通过诱导针对恶性疟原虫感染的肝脏阶段的保护性CD8+T细胞免疫。已经开发出基于黑猩猩腺病毒(ChAd)和MVA的病毒载体，其已经安全地用于超过一千个疟疾疫苗接种者，诱导非常大量的循环T细胞，并且在英国和非洲的II期临床试验中提供部分功效。然而，这种疫苗接种方法诱导特别高数量的循环CD8+T细胞，这些细胞是功效所必需的并且与功效相关，但仍然只能提供针对小鼠和人类中子孢子攻击的部分保护(在受控的人类疟疾感染中针对异源菌株的20-30％无菌功效)。这是现有技术的问题。先前有一些尝试将T细胞应答定位于尤其是粘膜表面，以及许多通过在粘膜部位免疫诱导粘膜免疫的尝试。但是，这种方法取得的成功有限。多年来，在肝脏中诱导细胞免疫应答一直是一项研究挑战。这是一种待产生的极具挑战性的效果。现有技术试图为某些类型的肝病提供保护的尝试已成功地在血液中产生高水平的应答。例如，专利技术人自己在免疫受试者以实现高免疫应答方面的工作已经引领该领域。然而，尽管有这些“同类最佳”免疫结果，但对于诸如疟疾等疾病仍然只有大约20％至25％的保护作用。因此，现有技术方法需要非常高的循环T细胞反应以实现有意义的保护。这是现有技术的问题。已用作病毒载体的病毒包括但不限于Ad、MVA、牛痘病毒、其他痘病毒、腺病毒相关病毒、黄病毒、疱疹病毒和α病毒。然而，越来越多的证据表明，如果应答在空间上与感染部位或入口无关，那么大量循环T细胞的产生可能仍然不足以保护。重要的是，最近描述了一种新的记忆淋巴细胞子集，称为组织驻留T淋巴细胞(TRM)。TRM包含非再循环记忆T细胞群，其仍位于非淋巴组织中，例如粘膜组织、皮肤和内部器官，例如脑、肾、胰腺和肝脏。尽管在不同器官之间存在高度异质的群体，但在许多情况下，当TRM存在于再感染部位时，它们能够加速对二次病原体暴露的保护，部分用作早期组织哨兵。然而，尚不知道通过疫苗接种强力诱导这种组织驻留记忆T细胞的可靠方法，这是现有技术的问题。本专利技术试图克服与现有技术相关的问题。专利技术概述专利技术人研究了身体周围各种物理位置的T细胞。例如，通过在淋巴结和其他离散位置染色来研究T细胞。专利技术人对研究和改进免疫方案感兴趣。通常，使用肌内和其他施用途径。然而，当专利技术人进行静脉内(I.V.)和随后的皮下(s.c.)施用实验时，他们惊讶地获得了显著的结果。特别是，通过提供I.V.第二(“靶”)免疫，取得了非常有效的结果，包括100％的疟疾疾病保护。已知肝脏是免疫耐受器官，肝脏中特别难以诱导和/或维持免疫应答。因此，更令人惊讶的是，本专利技术人已经在产生靶向肝脏的免疫应答方面取得了其强有力的结果。令人惊讶的是，本专利技术的方法导致在特定区域例如肝脏位置产生T细胞。更令人惊讶的是，那些T细胞保留在该位置，例如肝脏，并在那里发挥其作用。因此，在一个方面，本专利技术提供试剂盒，其至少包含第一组合物和第二组合物，所述第一和第二组合物各自包含肝脏疾病抗原的至少一个表位，其中所述表位是CD8+T细胞表位，用于通过肌内(i.m.)、皮下(s.c.)、皮内(i.d.)、口服或气雾剂途径施用所述第一组合物和通过静脉内(i.v.)、皮下(s.c.)或口服途径施用所述第二组合物来诱导哺乳动物受试者的肝脏中的免疫应答，其特征在于，所述第一和第二组合物通过不同途径施用。在一个方面，本专利技术涉及诱导哺乳动物受试者的肝脏中的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用第一组合物和第二组合物，所述第一和第二组合物各自包含肝脏疾病抗原的至少一个表位，其中所述表位是CD8+T细胞表位，其中通过肌内(i.m.)、皮下(s.c.)、皮内(i.d.)、口服或气雾剂途径施用所述第一组合物和通过静脉内(i.v.)、皮下(s.c.)或口服途径施用所述第二组合物，其特征在于，所述第一和第二组合物通过不同途径施用。在一个方面，本专利技术涉及如上所述的试剂盒在治疗或预防肝脏疾病中的用途。在一个方面，本专利技术涉及如上所述的试剂盒、如上所述的方法或如上所本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.试剂盒，其至少包含第一组合物和第二组合物，所述第一和第二组合物各自包含肝脏疾病抗原的至少一个表位，其中所述表位是CD8+T细胞表位，其中所述第一和第二组合物各自包含编码所述表位的病毒载体，所述病毒载体选自由以下组成的组：腺病毒载体、腺相关病毒载体或痘病毒载体，用于通过肌内(i.m.)、皮下(s.c.)、皮内(i.d.)或气雾剂途径施用所述第一组合物和通过静脉内(i.v.)或皮下(s.c.)途径施用所述第二组合物来诱导哺乳动物受试者的肝脏中的免疫应答，其特征在于，所述第一和第二组合物通过不同途径施用。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.04.12 GB 1606271.3;2016.04.29 GB 1607503.8;201.试剂盒，其至少包含第一组合物和第二组合物，所述第一和第二组合物各自包含肝脏疾病抗原的至少一个表位，其中所述表位是CD8+T细胞表位，其中所述第一和第二组合物各自包含编码所述表位的病毒载体，所述病毒载体选自由以下组成的组：腺病毒载体、腺相关病毒载体或痘病毒载体，用于通过肌内(i.m.)、皮下(s.c.)、皮内(i.d.)或气雾剂途径施用所述第一组合物和通过静脉内(i.v.)或皮下(s.c.)途径施用所述第二组合物来诱导哺乳动物受试者的肝脏中的免疫应答，其特征在于，所述第一和第二组合物通过不同途径施用。2.诱导哺乳动物受试者的肝脏中的免疫应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用第一组合物和第二组合物，所述第一和第二组合物各自包含肝脏疾病抗原的至少一个表位，其中所述表位是CD8+T细胞表位，其中所述第一和第二组合物各自包含编码所述表位的病毒载体，所述病毒载体选自由以下组成的组：腺病毒载体、腺相关病毒载体或痘病毒载体，其中通过肌内(i.m.)、皮下(s.c.)、皮内(i.d.)或气雾剂途径施用所述第一组合物和通过静脉内(i.v.)或皮下(s.c.)途径施用所述第二组合物，其特征在于，所述第一和第二组合物通过不同途径施用。3.根据权利要求1的试剂盒在治疗或预防肝脏疾病中的用途。4.根据权利要求1的试剂盒、根据权利要求2的方法或根据权利要求3的用途，其中在施用所述第一组合物之后约2周施用所述第二组合物。5.根据权利要求1或权利要求4的试剂盒、根据权利要求2的方法或根据权利要求3的用途，其中静脉内或皮下、优选静脉内施用所述第二组合物。6.根据权利要求1、权利要求4或权利要求5的试剂盒、根据权利要求2的方法或根据权利要求3的用途，其中肌内施用所述第一组合物。7.根据权利要求1的试剂盒、根据权利要求2的方法或根据权利要求3的用途，其中肌内施用所述第一组合物并且静脉内施用所述第二组合物。8.根据前述任一项权利要求的试剂盒、方法或用途，其中所述第一组合物包含粒子-或颗粒-结合表位，或编码所述表位的病毒载体，所述病毒载体选自由以下组成的组：腺病毒载体或痘病毒载体。9.根据前述任一项权利要求的试剂盒、方法或用途，其中所述第二组合物包含粒子-或颗粒-结合表位，或编码所述表位的病毒载体，所述病毒载体选自由以下组成的组：腺病毒载体或痘病毒载体。10.根据前述任一项权利要求的试剂盒、方法或用途，其中所述第一组合物包含编码所述表位的腺病毒载体，并且所述第二组合物包含编码所述表位的痘病毒载体。11.根据前述任一项权利要求的试剂盒、方法或用途，其中所述第一组合物包含编码所述表位的猴或人腺病毒载体，并且所述第二组合物包含编码所述表位的改良安卡拉病毒(MVA)痘病毒载体。12.根据权利要求1-9中任一项的试剂盒、方法或用途，其中所述第一和第二组合物的病毒载体是相同的。13.根据前述任一项权利要求的试剂盒、方法或用途，其中免疫应答是CD8+细胞毒性T细胞(CTL)应答。14.根据前述任一项权利要求的试剂盒、方法或用途，其中所述第一和第二组合物的至少一个表位来自相同的肝脏疾病抗原。15.根据前述任一项权利要求的试剂盒、方法或用途，其中所述第一和第二组合物中的至少一个表位是相同的。16.根据前述任一项权利要求的试剂盒、方法或用途，其中所...

【专利技术属性】
技术研发人员：A·V·S·希尔，A·戈拉，A·沃尔特斯，A·斯宾塞，
申请(专利权)人：牛津大学创新有限公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB