一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，包括以下步骤：(1)制备发酵菌液、(2)制备菌肥、(3)施用底肥、(4)浇灌发酵菌液；本发明专利技术利用沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)与特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)制备发酵菌液和菌肥，并且采用将菌液和菌肥联合使用的方法，使两种芽孢杆菌以固态和液态的形式施用，促进两种芽孢杆菌在土壤中定植并最终形成优势菌群，菌肥以及菌液二者有机结合，能够有效提高烟叶含钾量。本发明专利技术减少了化学肥料和化学农药的使用，保护和促进了烟草的生长，促进环境友好。

A Method of Increasing Potassium Content in Tobacco Leaves by Microbial Fertilizer Combined with Fermentation Broth

The invention discloses a method for improving potassium content in tobacco leaves by combining microbial bacterial fertilizer with its fermentation broth, which comprises the following steps: (1) preparing fermentation broth, (2) preparing bacterial fertilizer, (3) applying base fertilizer and (4) irrigating fermentation broth; the invention uses Bacillus safensis and Bacillus tequilensis to prepare fermentation broth and bacterial fertilizer, and uses the bacterial broth and the bacterial fertilizer. The combination of bacterial fertilizer and bacterial liquid can effectively improve the potassium content of tobacco leaves by applying the two kinds of Bacillus in solid and liquid forms, promoting the colonization of the two kinds of Bacillus in soil and eventually forming dominant bacterial flora. The organic combination of bacterial fertilizer and bacterial liquid can effectively improve the potassium content of tobacco leaves. The invention reduces the use of chemical fertilizers and pesticides, protects and promotes the growth of tobacco and promotes environmental friendliness.

【技术实现步骤摘要】
一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法
本专利技术属于生物农药
，具体涉及利用沙福芽孢杆菌(Bacillussafensis)与特基拉芽孢杆菌(Bacillustequilensis)生产的菌肥联合其发酵液提高烟叶的含钾量。
技术介绍
钾是评价烟叶质量好坏的一个至关重要的指标，烟叶钾含量越低，其燃烧性就越差，单料烟气的焦油含量就有可能偏高，对于开发高档卷烟不利，而钾含量越高，其燃烧性越强，烟叶燃烧越完全,焦油含量相应的会有所降低，改善烟叶的商品价值。美国优质烤烟烟叶钾含量在4％～6％，有的甚至达到8％～10％，而我国主要烟区烟叶钾含量一般低于2％，较低的烟叶钾含量制约着我国烟叶质量的进一步提高。因此，一直以来，提高烟叶钾含量，尤其是提高上部烟叶的钾含量就成为科学家们追逐的目标。目前，主要通过物理、化学、生理等3个方面的调控措施来提高烟叶钾含量，但是效果不明显。本专利技术所采用的是通过菌肥与复合菌剂共同作用将土壤中的有效钾转化为植物能够吸收的速效钾，从而提高烟叶含钾量。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决现有采用物理、化学、生理等提高烟叶含钾量技术的不足。提供2种将具有解钾效果的菌株生产的菌肥与其发酵液共同提高烟叶含钾量的新技术。通过复合作用能够提高这两种有益菌在土壤中的定植能力，有效提高其对土壤中的难溶性钾进行溶解转化，进而提高烟草对钾的吸收能力。对改善烟田微环境，促进烟叶高品质具有重要意义。为达上述目的，本专利技术采用以下技术方案：1、制备发酵菌液将固体保存的沙福芽孢杆菌(Bacillussafensis)与特基拉芽孢杆菌(Bacillustequilensis)分别采用不同的改良产芽孢液体培养基进行发酵培养，得到沙福芽孢杆菌发酵菌液和特基拉芽孢杆菌发酵菌液，混合上述两种发酵菌液。所述发酵菌液中有效活菌数≥1.0亿/g(cfu)。所述沙福芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基成分如下：葡萄糖2.5g、酵母提取物1.5g、蛋白胨1g、KH2PO40.3g、NaCl2.0g、(NH4)2SO41.0g、Na2B4O7·10H2O4.5mg、无水CaCl20.33g、Na2MoO4·2H2O0.03mg、H2O1000m1。所述特基拉芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基成分如下：葡萄糖2.0g、蛋白胨1.0g、NaCl1.5g、(NH4)2SO41.0g、CaCl2·2H2O0.07g、CuCl2·2H2O0.05mg，CoSO40.01mg，H2O1000m1。所述沙福芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基及发酵菌液通过以下方法制备：分别称取上述组分并溶于1L蒸馏水中，待溶解后用pH计调节pH至6.6～7.3，将上述溶液装于三角瓶中放在灭菌锅中于121℃灭菌20分钟，待培养基冷却后用接种环沾取1ml沙福芽孢杆菌转接到该培养基中，于37℃摇床100rpm振荡培养48hr。所述特基拉芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基及发酵菌液通过以下方法制备：分别称取上述组分并溶于1L蒸馏水中，待溶解后用pH计调节pH至6.8～7.4，将上述溶液装于三角瓶中放在灭菌锅中于121℃灭菌20分钟，待培养基冷却后用接种环沾取1ml特基拉芽孢杆菌转接到该培养基中，于37℃摇床100rpm振荡培养48hr。2、制备菌肥利用双次堆捂发酵的方法制备含有沙福芽孢杆菌与特基拉芽孢杆菌的生物菌肥，双次堆捂发酵的方法为：第一次发酵：以质量百分比计，取40～50％的泥碳、10～20％的油枯、10～15％的花渣、20～25％的碳氨水以及1～5％的混合发酵菌液，先混合均匀泥碳、油枯、花渣、碳氨水，加入总体积10％的水，每隔5天进行一次翻堆，堆捂时间为40天；第二次发酵：第一次发酵完成后，加入混合发酵菌液，每隔5天进行一次翻堆，以利于通氧和水分蒸发，二次发酵时间为15天，堆捂发酵结束后，各项指标达到国家有机肥标准NY525-2011。所述生物菌肥有效活性菌≥0.5亿/g(cfu)。3、施用底肥将步骤2所述含有该沙福芽孢杆菌和特基拉芽孢杆菌的生物菌肥作为底肥施用，每塘施用90克，每亩施用100公斤。4、浇灌发酵菌液进行步骤3的同时将步骤1所述的混合发酵菌液按照5000倍稀释，用以浇灌烟株。浇灌烟株的具体方法为：待烟株移栽后浇灌烟株根部，每亩用量为10kg。在烟株生长幼苗期，比较稀疏时采用浇灌，待烟株生长后期，烟叶茂密时采用喷灌。使用喷灌系统喷施在烟株叶面上，叶部以及根部每次喷施均要浸透，每15天喷施1次，每个月喷施2次。在烟草的种植中，施用本专利技术中的沙福芽孢杆菌和特基拉芽孢杆菌菌肥可以减少化肥的用量，两种芽孢杆菌经再增殖后含有大量的固氮菌，可以大大提高土壤中的中微量元素含量，减少氮磷钾和其它中微量元素的施用量；同时含有多种高效活性有益微生物菌，增加土壤有机质，加速有机质降解转化为作物能吸收的营养物质，大大提高土壤肥力，减少化肥用量。改善烟草的品质，使烟草增收。还可重构健康的土壤，提高烟草抵抗病虫害，同时无毒、无害、无污染。此外，两种芽孢杆菌发酵液及菌肥有效提高其对土壤中的难溶性钾进行溶解转化，进而提高烟草对钾的吸收能力。对改善烟田微环境，促进烟叶高品质具有重要意义。本专利技术采用双次堆捂发酵的方法，第一次堆捂发酵会发生部分物料无法全部腐熟的情况，进行第一次发酵后，加入发酵菌液，菌更好的作用于未完全腐熟的物料中，可快速繁殖使物料达到无害化处理(杀灭病菌、虫卵、杂草种子)。充分腐熟物料，使菌肥具有更多营养物质。第二次堆捂发酵添加发酵菌液能够杀灭物料中的病毒、病菌、虫卵、杂草种子等，有效遏制土壤中的病虫害发生。经过发酵菌液充分发酵后的物料无异臭味，不烧根苗，并且固氮能力强，可增加土壤养分有效性，促进植物吸收。增加土壤有益微生物活动，使其产生生物调节物质刺激根系生长和促进养分吸收，有效的提高营养物质的吸收利用率。而本项专利技术使两种芽孢杆菌以固态和液态的形式施用，促进两种芽孢杆菌在土壤中定植并最终形成优势菌群，二者有机结合从而提高烟草对钾的吸收能力。本专利技术保护和促进了烟草的生长，对生态环境无不良影响，同时还可以逐步改良种植土壤的生态环境，对全球环境友好。附图说明图1为本专利技术中沙福芽孢杆菌(Bacillussafensis)菌落图；图2为本专利技术中沙福芽孢杆菌(Bacillussafensis)细胞形态图；图3为本专利技术中特基拉芽孢杆菌(Bacillustequilensis)菌落图；图4为本专利技术中特基拉芽孢杆菌(Bacillustequilensis)细胞形态图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术做进一步的说明，以下所述，仅是对本专利技术的较佳实施例而已，并非对本专利技术做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的
技术实现思路
加以变更或改型为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本专利技术方案内容，依据本专利技术的技术实质对以上实施例所做的任何简单修改、等同变化与改型，均落在本专利技术的保护范围内。实施例1本专利技术中的沙福芽孢杆菌(Bacillussafensis)菌落图具有以下生物学特性：在LB固体培养基上菌落较小,呈乳黄色,边缘光滑细腻，直径为0.3-1.1mm，见图1、图2。本专利技术中的特基拉芽孢杆菌(Bacillustequilensis)菌落图具有以下生物学特性：在LB固体培养本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征包括以下步骤：(1)制备发酵菌液：将固体保存的沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)与特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)采用不同改良产芽孢液体培养基进行发酵培养，得到沙福芽孢杆菌发酵菌液和特基拉芽孢杆菌发酵菌液，混合上述两种菌液，得到混合发酵菌液。(2)制备菌肥：利用双次堆捂发酵的方法制备含有沙福芽孢杆菌和特基拉芽孢杆菌的生物菌肥；(3)施用底肥：将步骤(2)所述含有沙福芽孢杆菌和特基拉芽孢杆菌的生物菌肥作为底肥施用，每塘施用90克，每亩施用100公斤。(4)浇灌发酵菌液：进行步骤(3)的同时将步骤(1)所述的混合发酵菌液按照5000倍稀释，浇灌烟株。

【技术特征摘要】
1.一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征包括以下步骤：(1)制备发酵菌液：将固体保存的沙福芽孢杆菌(Bacillussafensis)与特基拉芽孢杆菌(Bacillustequilensis)采用不同改良产芽孢液体培养基进行发酵培养，得到沙福芽孢杆菌发酵菌液和特基拉芽孢杆菌发酵菌液，混合上述两种菌液，得到混合发酵菌液。(2)制备菌肥：利用双次堆捂发酵的方法制备含有沙福芽孢杆菌和特基拉芽孢杆菌的生物菌肥；(3)施用底肥：将步骤(2)所述含有沙福芽孢杆菌和特基拉芽孢杆菌的生物菌肥作为底肥施用，每塘施用90克，每亩施用100公斤。(4)浇灌发酵菌液：进行步骤(3)的同时将步骤(1)所述的混合发酵菌液按照5000倍稀释，浇灌烟株。2.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：所述步骤(1)中混合发酵菌液中有效活菌数≥1.0亿/g(cfu)。3.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：步骤(1)中沙福芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基成分如下：葡萄糖2.5g、酵母提取物1.5g、蛋白胨1g、KH2PO40.3g、NaCl2.0g、(NH4)2SO41.0g、Na2B4O7·10H2O4.5mg、无水CaCl20.33g、Na2MoO4·2H2O0.03mg、H2O1000m1；步骤(1)中特基拉芽孢杆菌采用的改良产芽孢液体培养基成分如下：葡萄糖2.0g、蛋白胨1.0g、NaCl1.5g、(NH4)2SO41.0g、CaCl2·2H2O0.07g、CuCl2·2H2O0.05mg，CoSO40.01mg，H2O1000m1。4.根据权利要求1所述的一种微生物菌肥联合其发酵液提高烟叶钾含量的方法，其特征在于：步骤(2)中生物菌肥有效活性菌≥0.5亿/g(c...

【专利技术属性】
技术研发人员：周晓罡，张滨，姚春馨，余萍，丁玉梅，杨映平，
申请(专利权)人：云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所，云南天腾化工有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53