一种干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法技术

本发明专利技术涉及一种干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，属于分析化学研究领域，包括如下步骤：样品预处理、分离异构体和测定异构体含量。本发明专利技术可实现干性样品中薄荷醇异构体的富集、分离和定性定量测定，操作简单，测定准确快速。

【技术实现步骤摘要】
一种干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法
本专利技术涉及一种薄荷醇异构体的分离检测方法，尤其是干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，属于分析化学领域。
技术介绍
薄荷醇有8个立体异构体，不同薄荷醇异构体具有不同物理性质，然而不同来源的薄荷醇中异构体含量和分布各异，其构型组成表现出不同的特征和功效，具有不同的应用价值，其中D–和L-薄荷醇是目前具有最重要工业价值的化合物。L-薄荷醇具有新鲜、轻快、扩散性的气味，并带有甜的辛辣的刺激性气味，并具有很强的清凉效果，可用作食品添加剂、香烟香料等，在医药上还可用作刺激药，具有清凉止痒作用，内服可用于头痛及鼻、咽、喉炎症等。D-薄荷醇却有辛辣刺激性气味，微带樟脑气味，几乎不存在清凉效果。不同样品中薄荷醇异构体含量不一，对产品的功效带来不同的影响，从产品质量控制、质量评价很产品开发出发，需要建立一个具有广泛应用价值的薄荷醇异构体的分离检测方法。目前主要采用色谱法对薄荷醇异构体分离，但目前报道的方法不能完全分离8个薄荷醇异构体。采用19FNMR核磁共振谱可以将8个薄荷醇异构体进行分离，但19FNMR核磁共振谱仪器昂贵，并需要特殊试剂、复杂的前处理和化学反应步骤，且只能用于薄荷醇纯品检测，不能用于复杂样品基质中薄荷醇异构体的分离和检测，尤其是对于干性样品。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供一种干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，该方法富集效果好，分离效率高，检测灵敏度高，方法简便快速，具有推广应用价值，本专利技术采用的技术方案具体如下：一种干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，包括以下步骤：步骤（1）、样品预处理：将样品研磨成粉末或切碎，准确称量0.1~1.0g样品于顶空瓶中，加入10μL40%乙醇水溶液，采用顶空固相微萃取进行吸附萃取；步骤（2）、分离异构体：吸附萃取后的萃取头热解析2.5～3.5min，待测物进入气相色谱进行分离，气相色谱条件如下：色谱柱为两根手性弹性毛细管柱串联，第一根色谱柱通过毛细管柱连接专用接头与第二根色谱柱相连接；气相色谱的进样口温度：180~200℃；载气：氦气，柱流量：恒流1.4~2.0mL/min；进样量：1μL；分流进样，分流比5:1~50:1；升温程序：初始温度80~100℃，然后以2~5℃/min的速率升温至120℃，并保持15~20min，最后以10℃/min的速率升温至200℃，保持5min；步骤（3）、测定异构体含量：通过串联质谱法对分离的薄荷醇异构体进行检测，根据标准曲线计算各薄荷醇异构体含量。进一步地，步骤（1）中，萃取头为50/30μm二乙烯苯/碳分子筛/聚二甲基硅烷涂层纤维萃取头。进一步地，步骤（1）中，萃取头的搅拌速率为100~600rpm。进一步地，步骤（1）中，萃取温度为50～85℃，萃取时间为25～40min。进一步地，步骤（2）中，第一根色谱柱固定相为20％叔丁基二甲基氯硅烷-β-环糊精溶解于BGB-15，规格为长度25m~35m×内径0.25mmid×膜厚0.25μmdf。BGB-15为15％的苯基取代和85％甲基取代的聚硅氧烷。进一步地，步骤（2）中，第二根色谱柱固定相为30%七-(2,3-二-O-甲基-6-O-叔丁基二甲基硅基)-β-环糊精溶解于DB-1701，规格为长度30m~40m×内径0.25mmid×膜厚0.25μmdf。进一步地，步骤（3）中，所述串联质谱条件如下：电子轰击源EI；传输线温度：200~220℃；离子源温度：180~200℃；电离能量：70eV；溶剂延迟：12min；扫描模式为MRM多反应监测扫描模式，碰撞能为7eV，定量离子对均为95/67，定性离子对均为123/81。进一步地，步骤（3）中，标准曲线绘制方法如下：用40%乙醇水溶液配制8个薄荷醇异构体的混合标准溶液，浓度范围为：0.5mg/L~5000mg/L，按步骤（1）称取不含薄荷醇的相同样品基质，分别准确加入10μL各级标准溶液，相当于加入薄荷醇质量为5ng~50mg，按步骤（1）至（3）进行测定，根据各物质定量离子峰面积为纵坐标，以各薄荷醇异构体质量为横坐标，作各薄荷醇异构体的标准曲线。与现有技术相比，本专利技术有益效果具体如下：（1）本专利技术的方法富集能力强，可实现干性样品中微量、痕量薄荷醇的富集，并避免基质干扰。（2）本专利技术借助两根手性色谱柱的串联组合，结合两根手性色谱柱的分离能力，可实现8个薄荷醇异构体完全分离，解决普通色谱柱或单独一根手性色谱柱无法将8个薄荷醇异构体分离的难题，分离效率高，效果好；（3）本专利技术方法无需溶剂萃取，环境友好，简便快速，检测灵敏度高，精密度小于3.4%，回收率在91%~104%，方法准确可靠，具有推广应用价值。附图说明以上说明为本专利技术技术方案的概述，为了更清楚的了解本专利技术的技术手段，而可依照说明书的内容予以实施，并且为了让本专利技术的上述和其它目的、特征和优点能够更明显易懂，现特举较佳实施例，并配合附图，详细说明如下。图1为8种薄荷醇异构体标准溶液测定的气相色谱-串联质谱图；图2为无糖薄荷糖中荷醇异构体测定的气相色谱-串联质谱图；图3为烟丝中荷醇异构体测定的气相色谱-串联质谱图；图4为薄荷喉片中荷醇异构体测定的气相色谱-串联质谱图。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的详细描述，但其并不限制本专利技术。本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限定本专利技术的范围。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过购买获得的常规产品。实施例1本实施例的干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，包括以下步骤：步骤（1）、样品预处理：本实施例的样品为某无糖薄荷糖。将无糖薄荷糖研磨成粉末状，准确称量0.1g粉碎的样品于20mL顶空瓶中，加入10μL40%乙醇水溶液，加盖密闭。插入50/30μm二乙烯苯/碳分子筛/聚二甲基硅烷涂层纤维萃取头，于搅拌速率为100rpm、萃取温度50℃条件下进行顶空-固相微萃取进行富集吸附30min。步骤（2）、分离异构体：吸附萃取后，将萃取头插入进样口后热解析3.0min，待测物进入气相色谱进行分离，气相色谱条件如下：色谱柱为两根手性弹性毛细管柱串联，第一根色谱柱通过毛细管柱连接专用接头与第二根色谱柱相连接。第一根色谱柱固定相为20％叔丁基二甲基氯硅烷-β-环糊精溶解于BGB-15（15％苯基，85％甲基聚硅氧烷），规格为长度30m×内径0.25mmid×膜厚0.25μmdf。第二根色谱柱固定相为30%七-(2,3-二-O-甲基-6-O-叔丁基二甲基硅基)-β-环糊精溶解于DB-1701（(14%-氰丙基-苯基)甲基聚硅氧烷），规格为长度35m×内径0.25mmid×膜厚0.25μmdf。进样口温度：180℃；载气：氦气（纯度≥99.999%），柱流量：恒流1.5mL/min；进样量：1μL；分流进样，分流比5：1；升温程序：初始温度100℃，然后以5℃/min的速率升温至120℃，并保持20min，最后以10℃/min的速率升温至200℃，保持5min。步骤（3）、测定异构体含量：通过串联质谱法对分离的薄荷醇异构体进行检测，根据标准曲线计算各薄荷醇异构本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤（1）、样品预处理：将样品研磨成粉末或切碎，准确称量0.1~1.0g样品于顶空瓶中，加入10 μL40%乙醇水溶液，采用顶空固相微萃取进行吸附萃取；步骤（2）、分离异构体：吸附萃取后的萃取头热解析2.5～3.5min，待测物进入气相色谱进行分离，气相色谱条件如下：色谱柱为两根手性弹性毛细管柱串联，第一根色谱柱通过毛细管柱连接专用接头与第二根色谱柱相连接；气相色谱的进样口温度：180~200℃；载气：氦气，柱流量：恒流1.4~2.0mL/min；进样量：1 μL；分流进样，分流比5:1~50:1；升温程序：初始温度80~100℃，然后以2~5℃/min的速率升温至120 ℃，并保持15~20 min，最后以10℃/min的速率升温至200 ℃，保持5min；步骤（3）、测定异构体含量：通过串联质谱法对分离的薄荷醇异构体进行检测，根据标准曲线计算各薄荷醇异构体含量。

【技术特征摘要】
1.一种干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤（1）、样品预处理：将样品研磨成粉末或切碎，准确称量0.1~1.0g样品于顶空瓶中，加入10μL40%乙醇水溶液，采用顶空固相微萃取进行吸附萃取；步骤（2）、分离异构体：吸附萃取后的萃取头热解析2.5～3.5min，待测物进入气相色谱进行分离，气相色谱条件如下：色谱柱为两根手性弹性毛细管柱串联，第一根色谱柱通过毛细管柱连接专用接头与第二根色谱柱相连接；气相色谱的进样口温度：180~200℃；载气：氦气，柱流量：恒流1.4~2.0mL/min；进样量：1μL；分流进样，分流比5:1~50:1；升温程序：初始温度80~100℃，然后以2~5℃/min的速率升温至120℃，并保持15~20min，最后以10℃/min的速率升温至200℃，保持5min；步骤（3）、测定异构体含量：通过串联质谱法对分离的薄荷醇异构体进行检测，根据标准曲线计算各薄荷醇异构体含量。2.根据权利要求1所述的干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，其特征在于：步骤（1）中，萃取头为50/30μm二乙烯苯/碳分子筛/聚二甲基硅烷涂层纤维萃取头。3.根据权利要求1所述的干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，其特征在于：步骤（1）中，萃取头的搅拌速率为100~600rpm。4.根据权利要求1所述的干性样品中薄荷醇异构体的分离检测方法，其特征在于：步骤（1）中，萃取温度为50～85℃，萃取时间为25～40mi...

【专利技术属性】
技术研发人员：司晓喜，张凤梅，朱瑞芝，刘志华，杨建云，蒋薇，申钦鹏，刘春波，尤俊衡，唐石云，李振杰，王昆淼，何沛，苏钟璧，
申请(专利权)人：云南中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：云南,53