酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法技术

本发明专利技术公开一种直观、精密度更高、预测性更好的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，它包括如下步骤：S1.供试品溶液制备；S2.竹节香附素A标准溶液制备；S3.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液进行洗脱，建立酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定；S4.对建立的HPLC含量测定进行方法学考察；S5.统计响应面法因素水平编码表；S6.响应值结果及拟合模型数据统计；S7.对步骤S6中数据进行多元回归拟合，得回归方程；S8.求解回归方程，以竹节香附素A含量为参考指标，得酒炙两头尖药材炮制工艺的最佳参数。

【技术实现步骤摘要】
酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法
本专利技术涉及酒炙两头尖药材内竹节香附素A提取工艺
，具体公开一种酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法。
技术介绍
两头尖系毛莨科银莲花属植物多被银莲花(AnemoneraddeanaRegel)的根茎，收载于2015版中国药典。其味辛热，为有毒中药。具有祛风湿，消痈肿的功效。主要用于四肢拘挛，风寒湿痹，痈肿溃烂，骨节疼痛等疾病的治疗。研究表明，两头尖具有抗肿瘤、抗炎、镇痛、解热、抗惊厥等多种药理作用，含有三萜皂苷、挥发油、内酯、多糖等多种成分，其中三萜皂苷类成分竹节香附素A是两头尖发挥抗肿瘤活性的主要活性成分，是用于评价两头尖药材质量的主要指标成分。中药炮制是根据中医药理论，依照辨证施治用药的需要和药物自身性质，以及制剂的不同要求所采取的一种制药技术。中药经辅料制后，在性味、功效、作用趋向归经和毒副作用方面都会发生某些变化，从而最大限度地发挥疗效。为降低两头尖药材毒性，保证临床用药的安全性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，适应现实需要，提供一种直观、精密度更高、预测性更好的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，以解决当前的技术问题。为了实现本专利技术的目的，本专利技术所采用的技术方案为：设计一种一种酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：它包括如下步骤：S1.供试品溶液制备；S2.竹节香附素A标准溶液制备；S3.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液分别进行等度洗脱，建立酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定；S4.对S3中建立的HPLC含量测定进行方法学考察；S5.统计响应面法因素水平编码表；S6.响应值结果及拟合模型数据统计；S7.对步骤S6中数据进行多元回归拟合，得回归方程；S8.求解回归方程，以竹节香附素A含量为参考指标，得酒炙两头尖药材炮制工艺的最佳参数。步骤S1具体为：取不同条件下炮制的酒炙两头尖药材粉碎，过60目筛，精密称取1.0g置50ml锥形瓶中，加入70％乙醇溶液25ml，超声提取30min，过滤，滤液蒸干，过滤后形成的残渣加甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加甲醇至10ml，摇匀，即得供试品溶液。步骤S2具体为：精密称取竹节香附素A对照品10.24mg，置10ml的容量瓶中，加入甲醇至10ml，摇匀，得质量浓度为1.024mg·ml-1的竹节香附素A标准溶液；精密吸取上述溶液0.25、0.5、1.25、2.5、5.0、10.0ml置10ml的容量瓶中，加入甲醇至10ml，摇匀，得不同浓度的竹节香附素A标准溶液。步骤S3具体为：S31.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液进行洗脱，得酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定：以乙腈-0.1％甲酸水溶液(53:47)为流动相等度洗脱，流速1.0ml·min-1，柱温30℃，检测波长206nm，进样量10μL；S32.在建立的液相色谱条件下，将供试品溶液和竹节香附素A标准溶液注入HPLC分析，得色谱图。步骤S4具体为：S41.吸取上述S2中不同浓度的对照品溶液，按S31色谱条件进样分析，以峰面积值为纵坐标(Y)，以竹节香附素A质量浓度为横坐标(X)，得回归方程：Y＝336.16X-10.999，r＝0.9999。S42.对所建立的HPLC含量测定进行精密度、重复性、稳定性以及加样回收试验。步骤S5具体为：以黄酒用量(A)、闷润温度(B)、炮制温度(C)及炮制时间(D)为考察因素，竹节香附素A的含量为响应指标，采用DesignExpert8.06软件的Box-Behnken响应面法试验设计的4因素3水平设计方案，统计响应面法因素水平编码表。步骤S6具体为：采用Box-Behnken中心组合试验设计原理，结合单因素试验结果，分析黄酒用量(A)、闷润温度(B)、炮制温度(C)及炮制时间(D)对竹节香附素A提取率的影响，得统计数据。步骤S7具体为：利用Design-Expert8.0Trial软件对步骤S6中统计数据进行多元回归拟合，得统计数据，统计数据经回归拟合后，得回归方程：Y＝4.22+0.080A+0.095B+0.100C+0.059D+0.065AB-0.045AC-0.190AD+0.055BC-0.075BD-0.095CD-0.190A2-0.250B2-0.350C2-0.180D2。步骤S8具体为：运用DesignExpert8.06统计软件求解回归方程，以竹节香附素A含量为参考指标，得到酒炮制两头尖的最佳工艺参数为：黄酒用量32.79％(每100g两头尖药材拌入黄酒32.79g)，浸润时间61.59min,炮制温度81.55℃，炮制时间43.85min。在此最优工艺条件下，预测竹节香附素A含量可达4.19mg/g。本专利技术的有益效果在于：本文通过对两头尖药材进行酒炙，并以竹节香附素A的含量为指标，采取分析方法直观、精密度更高、预测性更好的响应面法优化两头尖药材的酒炙工艺，为两头尖酒炙饮片的制备提供依据。附图说明图1为竹节香附素A对照品和供试品溶液的色谱图；图1中，A：对照品色谱图B：供试品色谱图1-竹节香附素A图2为黄酒用量(A)与闷润时间(B)、炮制温度(C)和炮制时间(D)的交互作用对竹节香附素A含量影响的响应面图；图3为炮制温度(C)与闷润时间(B)，闷润时间(B)与炮制时间(D),炮制温度(C)与炮制时间(D)的交互作用对竹节香附素A含量影响的响应面图。具体实施方式下面结合附图和实施例对本专利技术进一步说明：实施例1：一种酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，参见图1至图3；本方法它包括如下步骤：S1.供试品溶液制备；S2.竹节香附素A标准溶液制备；S3.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液分别进行等度洗脱，对酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定；S4.对S3中HPLC含量测定进行方法学考察；S5.统计响应面法因素水平编码表；S6.响应值结果及拟合模型数据统计；S7.对步骤S5中数据进行多元回归拟合，得回归方程；S8.求解回归方程，以竹节香附素A含量为参考指标，得酒炙两头尖药材炮制工艺的最佳参数。具体如下：首先需说明的是：本专利技术所述方法在实施中所使用到的仪器设备如下：Agilent1200液相色谱仪(DAD检测器，G1316A恒温柱箱，G1312A二元泵，G1322A在线脱气机，G1329A自动进样器)；AG285电子分析天平(中国梅特勒托利多仪器厂)；SB-2000旋转蒸发器(中国上海市安科仪器设备有限公司)；1011B-2真空烤箱(中国上海市神光仪器有限公司)；KQ-2200B超声机(中国昆山市超声波仪器厂)。本专利技术所述方法所用两头尖购于江西东港中药饮片有限公司，经上饶市食品药品检定所鉴定为毛茛科银莲花属植物多被银莲花AnemoneraddeanaRegel的干燥根茎；竹节香附素A对照品(纯度99.2％，购于成都曼斯特生物科技有限公司)；试剂均为分析纯。S1.供试品溶液制备：取不同条件下炮制的酒炙两头尖药材(现有技术)粉碎，过60目筛，精密称取1.0g置50ml锥形瓶中，加入70％的乙醇溶液25ml，超声提取30min，过滤，滤液蒸干，过滤后的残渣加甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加甲醇至10ml刻度，摇匀，即得供试品溶液。S2.竹节香附素A标准溶液制备；本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：它包括如下步骤：S1.供试品溶液制备；S2.竹节香附素A标准溶液制备；S3.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液分别进行等度洗脱，建立酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定；S4.对S3中建立的HPLC含量测定进行方法学考察；S5.统计响应面法因素水平编码表；S6.响应值结果及拟合模型数据统计；S7.对步骤S6中数据进行多元回归拟合，得回归方程；S8.求解回归方程，以竹节香附素A含量为参考指标，得酒炙两头尖药材炮制工艺的最佳参数。

【技术特征摘要】
1.一种酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：它包括如下步骤：S1.供试品溶液制备；S2.竹节香附素A标准溶液制备；S3.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液分别进行等度洗脱，建立酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定；S4.对S3中建立的HPLC含量测定进行方法学考察；S5.统计响应面法因素水平编码表；S6.响应值结果及拟合模型数据统计；S7.对步骤S6中数据进行多元回归拟合，得回归方程；S8.求解回归方程，以竹节香附素A含量为参考指标，得酒炙两头尖药材炮制工艺的最佳参数。2.如权利要求1所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S1具体为：取不同条件下炮制的酒炙两头尖药材粉碎，过60目筛，精密称取1.0g置50ml锥形瓶中，加入70％乙醇溶液25ml，超声提取30min，过滤，过滤后形成的残渣加甲醇溶解并转移至10ml容量瓶中，加甲醇至10ml，摇匀，即得供试品溶液。3.如权利要求2所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S2具体为：精密称取竹节香附素A对照品10.24mg，置10ml的容量瓶中，加入甲醇至10ml，摇匀，得质量浓度为1.024mg·ml-1的竹节香附素A标准溶液；精密吸取上述溶液0.25、0.5、1.25、2.5、5.0、10.0ml置10ml的容量瓶中，加入甲醇至10ml，摇匀，得不同浓度的竹节香附素A标准溶液。4.如权利要求3所述的酒炙两头尖药材的炮制工艺优化方法，其特征在于：步骤S3具体为：S31.对供试品溶液和竹节香附素A标准溶液进行洗脱，得酒炙两头尖中竹节香附素A的HPLC含量测定：以乙腈-0.1％甲酸水溶液(53:47)为流动相等度洗脱，流速1.0ml·min-1，柱温30℃，检测波长206nm，进样量10μL；S32.在建立的液相色谱条件下，将供试品溶液和竹节香附素A标准溶液注入HPLC分析，得色谱图。5.如权利要求4所述的酒炙两头尖药...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄平，毛坤军，
申请(专利权)人：江西医学高等专科学校，
类型：发明
国别省市：江西,36