一种铁皮石斛嫩芽中多糖的检测方法技术

技术编号:21086987 阅读:47 留言:0更新日期:2019-05-11 09:04
本发明专利技术公开一种铁皮石斛嫩芽中多糖的检测方法,包括:制作标准曲线;将铁皮石斛嫩芽进行热浸提,冷却、定容,并取上清液备用;取所述上清液与水、DNS混合,加热,冷却,再加水,测A520,根据标准曲线,计算样品还原糖含量;取所述上清液与水、浓硫酸混合,加热后冷却,加1滴酚酞,调节pH至中性,再加水并混合均匀,4℃冷藏2小时,得到混合液;取所述混合液与DNS溶液混合,加热,冷却,再加水,测A520,根据标准曲线,计算样品总糖含量;利用样品总糖含量减去还原糖含量得到多糖含量。本发明专利技术提供的检测方法,误差小,速度较快,方便操作。

【技术实现步骤摘要】
一种铁皮石斛嫩芽中多糖的检测方法
本专利技术涉及一种分析化学检测领域,具体涉及一种铁皮石斛嫩芽中多糖的检测方法。
技术介绍
铁皮石斛(Dendrobiumofficinale)是一种多年草本中草药植物,在中国药典(2015年版)中记载,铁皮石斛具有清热泻火,解毒,利水消肿,治疗热病烦渴,咽喉肿痛,水肿尿少,热淋涩痛和痈肿疔毒等功效。同样,现代医学研究表明,铁皮石斛具有增强免疫T细胞的功能,可提高人体免疫力,清除人体衰老和突变的细胞,稳定血糖,提高细胞代谢速率,维持机体生理稳定的功能。铁皮石斛现虽已大规模人工种植,但由于铁皮石斛自身生长缓慢和种植面积少,其年产量仅能满足一个省份的需求。利用植物组织培养技术,不仅可以解决传统铁皮石斛种植所面临的问题,而且还可以对培养体系进行有目的定向调控,以提高植物组织营养成分或获取特定细胞代谢产物。在铁皮石斛嫩芽的有效成分中,醇溶性多糖占比相当高,用传统的药典检测方法中醇沉一步损耗超过50%的醇溶性多糖,严重影响了数据的可信性。因此,建立新的检测方法来检测铁皮石斛嫩芽中的石斛多糖迫在眉睫。在20世纪90年代,美国公职分析化学家协会(Associatio本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种铁皮石斛嫩芽中多糖的检测方法,其特征在于,包括:制作标准曲线;将铁皮石斛嫩芽进行热浸提,冷却、定容,并取上清液备用;取所述上清液与水、DNS混合,加热,冷却,再加水,测A520,根据标准曲线,利用公式I计算样品还原糖含量;还原糖含量:

【技术特征摘要】
1.一种铁皮石斛嫩芽中多糖的检测方法,其特征在于,包括:制作标准曲线;将铁皮石斛嫩芽进行热浸提,冷却、定容,并取上清液备用;取所述上清液与水、DNS混合,加热,冷却,再加水,测A520,根据标准曲线,利用公式I计算样品还原糖含量;还原糖含量:取所述上清液与水、浓硫酸混合,加热后冷却,加1滴酚酞,调节pH至中性,再加水并混合均匀,得到混合液;取所述混合液与DNS溶液混合,加热,冷却,再加水,测A520,根据标准曲线,利用公式II计算样品总糖含量;总糖含量:通过公式III计算得到石斛嫩芽中多糖的含量:C多糖(%)=C总-C还(III)。2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述制作标准曲线具体为取标准葡萄糖25-30mg,记录实际称量质量,定容至250mL,分别吸取0mL,0.2mL,0.4mL,0.6mL,0.8mL,1.0mL,并补水至2mL;然后,分别加入5mLDNS,并沸水浴15min,最后放入冰水中冷却15min,补水至25mL,测A520;以标准葡糖浓度为横坐标,以A520为纵坐标绘制标准曲线。3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述将铁皮石斛进行热提劲具体为:取0.5g铁皮石斛嫩芽干粉m0,于20mL水中,40-50℃时350-450W超声25-30min,再沸水浴热浸提40-60min。4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述DNS溶液的制备方法为:取3,5-二硝基水杨酸与水混合,加热至(30~50)℃,然后逐...

【专利技术属性】
技术研发人员:张杰王昕怡吴红升
申请(专利权)人:苏州天成新农生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏,32

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