一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法技术

本发明专利技术涉及食用菌菌种技术领域，尤其是一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，包括S1种菇选择、S2组织分离培养、S3制备母种、S4制备一级种、S5第一次转管培养、S6第二次转管培养、S7第三次转管培养、S8第四次转管培养、S9扩展原种、S10制备生产种等步骤。本发明专利技术，在选育时，以富硒山区的树木伴生的野生优良香菇菇体为种菇，并提取母种，在母种多次复壮培养过程中，利用培养基的不断变化，来提高富硒香菇菌种与生产培养基的适应性，实现野生富硒香菇菌种的复壮，提高菌种对硒肥的吸收利用率，生产的香菇含硒量、风味、品质高，针对性强，污染报废率低，菌菇转化率高，经济效益好。

A Rejuvenation Method of Wild Selenium-enriched Lentinus edodes Cultivated with Poplar Sawdust Bags

The invention relates to the technical field of edible mushroom strains, in particular to a rejuvenation method of wild selenium-rich Lentinus edodes strains cultivated with poplar sawdust bags, including selection of S1 mushroom, isolation and culture of S2 tissue, preparation of S3 mother strain, preparation of S4 first-class strain, first-time transfer culture of S5, second transfer culture of S6, third transfer culture of S7, fourth transfer culture of S8, expansion of S9 original strain and preparation and production of S10. Sort of steps. The invention takes the wild excellent mushroom body accompanied by trees in selenium-rich mountainous areas as the breeding mushroom, and extracts the mother seed. During the process of multiple rejuvenation of the mother seed, the adaptability of the selenium-rich mushroom strain to the production medium is improved by the continuous change of the culture medium, the rejuvenation of the wild selenium-rich mushroom strain is realized, the utilization rate of selenium fertilizer is increased, and the content of the produced mushroom is increased. Selenium content, flavor and quality are high, pertinence is strong, waste rate of pollution is low, transformation rate of mushroom is high, and economic benefit is good.

【技术实现步骤摘要】
一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法
本专利技术涉及食用菌菌种
，尤其是一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法。
技术介绍
香菇产量在世界人工栽培食用菌中居第二位。随着生活品质的提高，人们开始逐渐认识到香菇的营养价值，由于其独特的风味和增强人体免疫功能的作用，成为人们最喜爱的健康食品之一。近年来，由于野生香菇市场的供应不求，因此将香菇从野外自然生长逐步变为人工驯化栽培，因此香菇的产量大幅度的提高，为了更加满足日益增长的市场需求，则越来越多的种植户为了提高产量应用各种化肥以及农药，使得香菇产量虽然增加但是香菇风味与野生香菇相比相差较远，随着人们不断追求健康生活理念，广大的消费者更加青睐于野生香菇，因此野生香菇资源大范围的遭到严重破坏。硒是人体必须的微量元素，硒及硒化物除具有抗氧化性能外，还具有抗肿瘤、延长寿命和提高机体免疫力等功能。世界上有40多个国家土壤中缺硒，我国有70％地区属于缺硒地区，寻找和开发富硒产品，以保证人体摄入充足的硒，正被各国科学工作者所关注。目前，以食用菌作为富集硒元素的载体，在我国正处于研究中。尤其是香菇栽培面积广，操作简单，富集能力显著，将香菇作为富集硒元素的载体，研究者较多。而目前的富硒香菇的研究，主要集中在富硒香菇的种植方面，对野生富硒香菇菌种驯化复壮方面的研究较少。同时研究生产的香菇虽然含硒量较高，但是香菇的风味、品质较差；在生产转接种中，香菇菌种退化问题严重，对硒肥的吸收利用率也较低，易遭污染，抗逆性差，菌菇转化率低，种植户的经济效益不高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，包括以下步骤：S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种菇，并装入无菌纸袋内带回；S2、组织分离培养：将选取的种菇，采用组织分离法分离种菇伞盖与菌柄交界处小块菌肉组织，置于培养皿中的基础PDA培养基上，培养一段时间并及时去除遭污染的培养物；S3、制备母种：用接种针挑选上一步骤中制得的性状优良的组织培养菌种，置于试管中的含杨树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合培养基上，再次移入18～22℃的恒温箱中，常规斜面培养10～15天，最后置于超低温-80～-50℃保藏，制得野生富硒香菇母种；以质量百分比计，所述混合培养基，其组分包括：杨树叶汁液1.0％～3.0％、富硒营养液0.5％～0.8％、余量为基础PDA培养基；S4、制备一级种：用接种针挑选上一步骤中制得的野生富硒香菇母种，以杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物为培养基，接种，常规斜面培养10～15天，制得一级种；以质量百分比计，所述杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物，其组分包括：杨树叶汁液3.0％～5.0％、富硒营养液0.8％～1.2％、小米粉1.0％～3.0％、余量为基础PDA培养基；S5、第一次转管培养：用接种针挑选上一步骤中制得的一级种，以杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S6、第二次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树叶汁液、杨树树叶粉、富硒营养液、小米粉、米糠粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S7、第三次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树叶汁液、杨树树叶粉、富硒营养液、小米粉、米糠粉、石膏、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S8、第四次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树树叶粉、杨树木屑粉、富硒营养液、米糠粉、石膏、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S9、扩展原种：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树木屑粉、富硒营养液、米糠粉、米糠、石膏、维生素、水为培养基，接种，广口瓶常规培养，至广口瓶中菌丝发满为止；S10、制备生产种：选取步骤S9培养的香菇菌种，以杨树木屑、富硒营养液、米糠、石膏、维生素、水为培养基，装袋、灭菌、接种，常规培养，直至菌袋中菌丝发满为止，即制得可应用于杨木木屑袋料栽培大生产的复壮的野生富硒香菇菌种。优选地，在S5步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树叶汁液5.0％～8.0％、富硒营养液1.2％～1.5％、小米粉3.0％～5.0％、余量为基础PDA培养基。优选地，在S6步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树叶汁液8.0％～10.0％，杨树树叶粉3.0％～5.0％，富硒营养液1.5％～1.8％，小米粉5.0％～8.0％，米糠粉2.0％～4.0％，余量为磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素和水。优选地，在S7步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树叶汁液8.0％～10.0％，杨树树叶粉5.0％～8.0％，富硒营养液1.8％～2.2％，小米粉5.0％～8.0％，米糠粉4.0％～8.0％，余量为石膏、维生素、和水。优选地，在S8步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树树叶粉10.0％～15.0％，杨树木屑粉8.0％～15.0％，富硒营养液2.2％～2.5％，米糠粉8.0％～12.0％，余量为石膏、维生素、和水。优选地，在S9步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树木屑粉18.0％～30.0％，富硒营养液2.5％～3.5％，米糠粉4.0％～8.0％、米糠3.0％～7.0％，余量为石膏、维生素、和水。优选地，在S10步骤中，以质量百分比计，所述培养基，其组分包括：杨树木屑30.0％～50.0％，富硒营养液3.5％～5.0％，米糠10.0％～20.0％，余量为石膏、维生素、和水。优选地，所述基础PDA培养基，其制备方法为：称取洗净去皮的马铃薯小块200g，切成小块，加水1000ml，煮沸20分钟后，过滤，在滤汁中补足水分到1000ml；再分别加入琼脂18g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素10mg，煮沸溶解后，补足水分；最后分装、灭菌、备用，即制得基础琼脂培养基。优选地，所述富硒营养液为亚硒酸钠溶液。本专利技术的有益效果在于：本专利技术一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，在选育时，以富硒山区的树木伴生的野生优良香菇菇体为种菇，并提取母种，在母种多次复壮培养过程中，利用培养基的不断变化，来提高富硒香菇菌种与生产培养基的适应性，实现针对杨木木屑袋料栽培生产的香菇菌种的复壮，提高中的香菇菌种对硒肥的吸收利用率，生产的香菇含硒量、风味、品质高，针对性强，污染报废率低，菌菇转化率高，经济效益好，具有实际指导意义和推广应用价值。具体实施方式为了便于本领域技术人员理解，下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1：一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，包括以下步骤：S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种菇，并装入无菌纸袋内带回；S2、组织分离培养：将选取的种菇，采用组织分离法分离种菇伞盖与菌柄交界处小块菌肉组织，置于培养皿中的基础PDA培养基上，培养一段时间并及时去除遭污染的培养物；S3、制备母种：用接种针挑选上一步骤中制得的性状优良的组织培养菌种，置于试管中的含杨树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合培养基上，再次移入18～22℃的恒温箱中，常规斜面培养10～15天，最后置于超低温‑80～‑50℃保藏，制得野生富硒香菇母种；以质量百分比计，所述混合培养基，其组分包括：杨树叶汁液1.0％～3.0％、富硒营养液0.5％～0.8％、余量为基础PDA培养基；S4、制备一级种：用接种针挑选上一步骤中制得的野生富硒香菇母种，以杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物为培养基，接种，常规斜面培养10～15天，制得一级种；以质量百分比计，所述杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物，其组分包括：杨树叶汁液3.0％～5.0％、富硒营养液0.8％～1.2％、小米粉1.0％～3.0％、余量为基础PDA培养基；S5、第一次转管培养：用接种针挑选上一步骤中制得的一级种，以杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S6、第二次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树叶汁液、杨树树叶粉、富硒营养液、小米粉、米糠粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S7、第三次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树叶汁液、杨树树叶粉、富硒营养液、小米粉、米糠粉、石膏、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S8、第四次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树树叶粉、杨树木屑粉、富硒营养液、米糠粉、石膏、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S9、扩展原种：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树木屑粉、富硒营养液、米糠粉、米糠、石膏、维生素、水为培养基，接种，广口瓶常规培养，至广口瓶中菌丝发满为止；S10、制备生产种：选取步骤S9培养的香菇菌种，以杨树木屑、富硒营养液、米糠、石膏、维生素、水为培养基，装袋、灭菌、接种，常规培养，直至菌袋中菌丝发满为止，即制得可应用于杨木木屑袋料栽培大生产的复壮的野生富硒香菇菌种。...

【技术特征摘要】
1.一种杨木木屑袋料栽培的野生富硒香菇菌种的复壮方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种菇，并装入无菌纸袋内带回；S2、组织分离培养：将选取的种菇，采用组织分离法分离种菇伞盖与菌柄交界处小块菌肉组织，置于培养皿中的基础PDA培养基上，培养一段时间并及时去除遭污染的培养物；S3、制备母种：用接种针挑选上一步骤中制得的性状优良的组织培养菌种，置于试管中的含杨树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合培养基上，再次移入18～22℃的恒温箱中，常规斜面培养10～15天，最后置于超低温-80～-50℃保藏，制得野生富硒香菇母种；以质量百分比计，所述混合培养基，其组分包括：杨树叶汁液1.0％～3.0％、富硒营养液0.5％～0.8％、余量为基础PDA培养基；S4、制备一级种：用接种针挑选上一步骤中制得的野生富硒香菇母种，以杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物为培养基，接种，常规斜面培养10～15天，制得一级种；以质量百分比计，所述杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物，其组分包括：杨树叶汁液3.0％～5.0％、富硒营养液0.8％～1.2％、小米粉1.0％～3.0％、余量为基础PDA培养基；S5、第一次转管培养：用接种针挑选上一步骤中制得的一级种，以杨树叶汁液、富硒营养液、小米粉、基础PDA培养基的混合物为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S6、第二次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树叶汁液、杨树树叶粉、富硒营养液、小米粉、米糠粉、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S7、第三次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树叶汁液、杨树树叶粉、富硒营养液、小米粉、米糠粉、石膏、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S8、第四次转管培养：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树树叶粉、杨树木屑粉、富硒营养液、米糠粉、石膏、维生素、水为培养基，接种，常规斜面培养10～15天；S9、扩展原种：以上一步骤中制得的斜面培养菌丝为菌种，以杨树木屑粉、富硒营养液、米糠粉、米糠、石膏、维生素、水为培养基，接种，广口瓶常规培养，至广口瓶中菌丝发满为止；S10、制备生产种：选取步骤S9培养的香菇菌种，以杨树木屑、富硒营养液、米糠、石膏、维生素、水为培养基，装袋、灭菌、接种，常规培养，直至菌袋中菌丝发满为止，即制得可应用于杨木木屑袋料栽培大生产的复壮的...

【专利技术属性】
技术研发人员：章荣春，程叙海，程扶旗，章云时，
申请(专利权)人：绩溪县桐坑源家庭农场，
类型：发明
国别省市：安徽,34