一种野生富硒香菇菌种的驯化方法技术

本发明专利技术涉及食用菌菌种选育技术领域，尤其是一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，包括S1种菇选择、S2种菇预处理、S3组织分离、S4组织培养、S5转管培养、S6斜面复培等步骤。本发明专利技术一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，以富硒山区的树木伴生的野生优良香菇菇体为种菇，并在驯化培养过程中的培养基中添加树叶汁液、富硒营养液，且树叶汁液、富硒营养液的比例不断调整，增强野生富硒香菇菌种对生产过程中以树木木屑、富硒营养液为培养基的适应性，提高驯化的香菇菌种对富硒营养液的吸收率，降低退化速度，提升抗逆性，降低遭污染的可能，针对性强；同时提高香菇菌种在生产中的品质与风味，经济效益高，具有实际指导意义和推广应用价值。

Domestication of a wild selenium-rich Lentinus edodes strain

The invention relates to the field of mushroom breeding technology, in particular to a domestication method of wild selenium-rich Lentinus edodes strains, including the steps of S1 mushroom selection, S2 mushroom pretreatment, S3 tissue separation, S4 tissue culture, S5 tube culture, S6 slope re-culture, etc. The invention provides a domestication method for wild selenium-enriched Lentinus edodes strains. The wild excellent Lentinus edodes body accompanied by trees in selenium-enriched mountainous areas is used as a kind of mushroom, and leaf juice and selenium-enriched nutrient solution are added to the culture medium during the domestication and cultivation process, and the proportion of leaf juice and selenium-enriched nutrient solution is constantly adjusted, so as to enhance the application of wild selenium-enriched Lentinus to the The adaptability of culture medium can improve the absorption rate of selenium-enriched nutrient solution by domesticated Lentinus edodes strains, reduce the degradation rate, enhance the resistance to stress, reduce the possibility of contamination, and have strong pertinence. At the same time, it can improve the quality and flavor of Lentinus edodes strains in production, with high economic benefits, which has practical guiding significance and application value.

【技术实现步骤摘要】
一种野生富硒香菇菌种的驯化方法
本专利技术涉及食用菌菌种选育
，尤其是一种野生富硒香菇菌种的驯化方法。
技术介绍
香菇产量在世界人工栽培食用菌中居第二位。随着生活品质的提高，人们开始逐渐认识到香菇的营养价值，由于其独特的风味和增强人体免疫功能的作用，成为人们最喜爱的健康食品之一。近年来，由于野生香菇市场的供应不求，因此将香菇从野外自然生长逐步变为人工驯化栽培，因此香菇的产量大幅度的提高，为了更加满足日益增长的市场需求，则越来越多的种植户为了提高产量应用各种化肥以及农药，使得香菇产量虽然增加但是香菇风味与野生香菇相比相差较远，随着人们不断追求健康生活理念，广大的消费者更加青睐于野生香菇，因此野生香菇资源大范围的遭到严重破坏。硒是人体必须的微量元素，硒及硒化物除具有抗氧化性能外，还具有抗肿瘤、延长寿命和提高机体免疫力等功能。世界上有40多个国家土壤中缺硒，我国有70％地区属于缺硒地区，寻找和开发富硒产品，以保证人体摄入充足的硒，正被各国科学工作者所关注。目前，以食用菌作为富集硒元素的载体，在我国正处于研究中。尤其是香菇栽培面积广，操作简单，富集能力显著，将香菇作为富集硒元素的载体，研究者较多。而目前的富硒香菇的研究，主要集中在富硒香菇的种植方面，对野生富硒香菇菌种驯化方面的研究较少。同时研究生产的香菇虽然含硒量较高，但是香菇的风味、品质较差，对硒肥的吸收利用率较低，也存在着生产中的香菇菌种易退化、易遭污染，抗逆性差的缺点，没有从根本上解决问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，包括以下步骤：S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种菇，并装入无菌纸袋内带回；S2、种菇预处理：将选取的种菇，去除菇体表面的杂物，并用含75％酒精的棉球对菇体伞盖、菌柄表面进行消毒，再用无菌水漂洗2～4次，并用灭菌的脱脂棉吸干菇体表面水分；S3、组织分离：在无菌接种室内，将手术刀用酒精灯火焰消毒，待手术刀冷却后，用手术刀将菇体的伞盖、菌柄一分为二，挑取菇体的伞盖与菌柄交界处小块菌肉，置于培养皿中的基础PDA培养基上；S4、组织培养：将S3步骤中带菇体分离组织的基础PDA培养基的培养皿，移入20～25℃的恒温箱中常规培养10～15天；培养期内，每隔1～2天观察一次，并随时淘汰掉遭霉菌或细菌污染的培养物；S5、转管培养：用接种针挑选S4步骤中以组织分离培养物为中心的菌丝外边沿1～2厘米处的无污染香菇菌丝以及少量培养基，置于试管中的含树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合培养基上，再次移入20～25℃的恒温箱中，常规斜面培养10～15天；S6、斜面复培：挑选S5步骤中、离培养基斜面顶端4～5厘米的香菇菌种，以树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合物为培养基，常规斜面培养10～15天，最后置于超低温-80～-50℃保藏，即驯化出野生富硒香菇菌种。优选地，所述S4步骤中的常规培养的时间，以菌丝长满培养皿为准。优选地，所述S5、S6步骤中的常规斜面培养的时间，以菌丝长满试管的斜面为准。优选地，在S5步骤中，所述混合培养基，以质量百分比计，其组分包括：树叶汁液5.0％～12.0％、富硒营养液0.5％～3.0％、余量为基础PDA培养基。优选地，在S6步骤中，所述树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合物，以质量百分比计，其组分包括：树叶汁液10.0％～18.0％、富硒营养液2.5％～6.0％、余量为基础PDA培养基。优选地，所述基础PDA培养基，其制备方法为：称取洗净去皮的马铃薯小块200g，切成小块，加水1000ml，煮沸20分钟后，过滤，在滤汁中补足水分到1000ml；再分别加入琼脂18g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素10mg，煮沸溶解后，补足水分；最后分装、灭菌、备用，即制得基础PDA培养基。优选地，所述树叶汁液，其原料为柞树树叶、栎树树叶、桦树树叶中的一种或多种的混合物。优选地，所述富硒营养液为亚硒酸钠溶液。本专利技术的有益效果在于：本专利技术一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，以富硒山区的树木伴生的野生优良香菇菇体为种菇，并在驯化培养过程中的培养基中添加树叶汁液、富硒营养液，且树叶汁液、富硒营养液的比例不断调整，增强野生富硒香菇菌种对生产过程中以树木木屑、富硒营养液为培养基的适应性，提高驯化的香菇菌种对富硒营养液的吸收率，降低其退化速度，提升香菇菌种的抗逆性，降低遭污染的可能，针对性强；同时提高香菇菌种在生产中的品质与风味，经济效益高，具有实际指导意义和推广应用价值。具体实施方式为了便于本领域技术人员理解，下面结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明。实施例1：一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，包括以下步骤：S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种菇，并装入无菌纸袋内带回。S2、种菇预处理：将选取的种菇，去除菇体表面的杂物，并用含75％酒精的棉球对菇体伞盖、菌柄表面进行消毒，再用无菌水漂洗2次，并用灭菌的脱脂棉吸干菇体表面水分。S3、组织分离：在无菌接种室内，将手术刀用酒精灯火焰消毒，待手术刀冷却后，用手术刀将菇体的伞盖、菌柄一分为二，挑取菇体的伞盖与菌柄交界处小块菌肉，置于培养皿中的基础PDA培养基上。S4、组织培养：将S3步骤中带菇体分离组织的基础PDA培养基的培养皿，移入20℃的恒温箱中常规培养，常规培养的时间，以菌丝长满培养皿为准；培养期内，每隔1～2天观察一次，并随时淘汰掉遭霉菌或细菌污染的培养物，当培养10天，菌丝长满培养皿时，组织培养结束。S5、转管培养：用接种针挑选S4步骤中以组织分离培养物为中心的菌丝外边沿1～2厘米处的无污染香菇菌丝以及少量培养基，置于试管中的含树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合培养基上，再次移入20℃的恒温箱中，常规斜面培养，常规斜面培养的时间，以菌丝长满试管的斜面为准；当培养12天，菌丝长满试管中的培养基时，转管培养结束；其中，上述的混合培养基，以质量百分比计，其组分包括：树叶汁液5.0％、亚硒酸钠富硒营养液3.0％、余量为基础PDA培养基。S6、斜面复培：挑选S5步骤中、离培养基斜面顶端4～5厘米的香菇菌种，以树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合物为培养基，常规斜面培养；常规斜面培养的时间，以菌丝长满试管的斜面为准，当培养15天，菌丝长满试管中的培养基时，转管培养结束；最后置于超低温-80～-50℃保藏，即驯化出野生富硒香菇菌种。其中，上述的树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合物，以质量百分比计，其组分包括：树叶汁液10.0％、亚硒酸钠富硒营养液6.0％、余量为基础PDA培养基。其中，基础PDA培养基，其制备方法为：称取洗净去皮的马铃薯小块200g，切成小块，加水1000ml，煮沸20分钟后，过滤，在滤汁中补足水分到1000ml；再分别加入琼脂18g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种菇，并装入无菌纸袋内带回；S2、种菇预处理：将选取的种菇，去除菇体表面的杂物，并用含75％酒精的棉球对菇体伞盖、菌柄表面进行消毒，再用无菌水漂洗2～4次，并用灭菌的脱脂棉吸干菇体表面水分；S3、组织分离：在无菌接种室内，将手术刀用酒精灯火焰消毒，待手术刀冷却后，用手术刀将菇体的伞盖、菌柄一分为二，挑取菇体的伞盖与菌柄交界处小块菌肉，置于培养皿中的基础PDA培养基上；S4、组织培养：将S3步骤中带菇体分离组织的基础PDA培养基的培养皿，移入20～25℃的恒温箱中常规培养10～15天；培养期内，每隔1～2天观察一次，并随时淘汰掉遭霉菌或细菌污染的培养物；S5、转管培养：用接种针挑选S4步骤中以组织分离培养物为中心的菌丝外边沿1～2厘米处的无污染香菇菌丝以及少量培养基，置于试管中的含树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合培养基上，再次移入20～25℃的恒温箱中，常规斜面培养10～15天；S6、斜面复培：挑选S5步骤中、离培养基斜面顶端4～5厘米的香菇菌种，以树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合物为培养基，常规斜面培养10～15天，最后置于超低温‑80～‑50℃保藏，即驯化出野生富硒香菇菌种。...

【技术特征摘要】
1.一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、种菇选择：在6～15℃的冬春季节，选取在安徽石台县含富硒土壤山区的树木伴生的发育健壮、菌伞盖厚大、无病虫害、成熟度适当的野生香菇菇体为种菇，并装入无菌纸袋内带回；S2、种菇预处理：将选取的种菇，去除菇体表面的杂物，并用含75％酒精的棉球对菇体伞盖、菌柄表面进行消毒，再用无菌水漂洗2～4次，并用灭菌的脱脂棉吸干菇体表面水分；S3、组织分离：在无菌接种室内，将手术刀用酒精灯火焰消毒，待手术刀冷却后，用手术刀将菇体的伞盖、菌柄一分为二，挑取菇体的伞盖与菌柄交界处小块菌肉，置于培养皿中的基础PDA培养基上；S4、组织培养：将S3步骤中带菇体分离组织的基础PDA培养基的培养皿，移入20～25℃的恒温箱中常规培养10～15天；培养期内，每隔1～2天观察一次，并随时淘汰掉遭霉菌或细菌污染的培养物；S5、转管培养：用接种针挑选S4步骤中以组织分离培养物为中心的菌丝外边沿1～2厘米处的无污染香菇菌丝以及少量培养基，置于试管中的含树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合培养基上，再次移入20～25℃的恒温箱中，常规斜面培养10～15天；S6、斜面复培：挑选S5步骤中、离培养基斜面顶端4～5厘米的香菇菌种，以树叶汁液、富硒营养液、基础PDA培养基的混合物为培养基，常规斜面培养10～15天，最后置于超低温-80～-50℃保藏，即驯化出野生富硒香菇菌种。2.根据权利要求1所述一种野生富硒香菇菌种的驯化方法，其特征在于，所...

【专利技术属性】
技术研发人员：章荣春，程叙海，程扶旗，章云时，
申请(专利权)人：绩溪县桐坑源家庭农场，
类型：发明
国别省市：安徽,34