The present invention relates to a composition comprising: transforming growth factor beta, i.e. TGF beta; Notch ligand; stem cell growth factor, i.e. SCF; Fms-related tyrosine kinase receptor 3, i.e. Flt3L; thrombopoietin, i.e. TPO; interleukin 6, i.e. IL 6; and UM171 molecule. The structural formula of the UM171 molecule is shown in formula I. The invention also relates to a serum-free medium for long-term culture and expansion of hematopoietic stem cells in vitro and a culture method using the medium.
【技术实现步骤摘要】
一种造血干细胞的培养组合物、培养基以及造血干细胞的培养方法
本专利技术涉及一种体外长期培养、扩增造血干细胞的无血清培养方法。具体而言，本专利技术涉及一种包含调控造血干细胞和祖细胞自我更新的生长因子的组合物，以及包含该组合物的无血清培养基，以及使用该培养基培养、扩增造血干细胞的方法，以及利用所述方法制备成的造血干细胞及其用途。
技术介绍
造血干细胞(hematopoieticstemcells,HSCs)具有自我更新细胞增殖和分化到各种血液组织的能力。造血干细胞对于血液系统的发育、维持和再生发挥着至关重要的作用。通常情况下，造血干细胞在正常的血液系统中处于静息状态，但是一旦发生如移植器官过程中的血液损失和感染，造血干细胞被立即激活以发生快速造血的功能。大部分的造血干细胞处于细胞周期的G0期，大约每个月会更新一次，造血干细胞进入细胞周期启动增殖的程序是相对随机发生的。造血干细胞的生长主要由两种机制调控。第一是细胞周期G0期的调节，第二是命运决定(fatedetermination)，即分化或者自我更新。其中在调控造血干细胞生长的过程中，有多种结合于细胞膜表面的蛋白质参...
【技术保护点】
1.一种组合物，其包括：转化生长因子‑β，即TGF‑β；Notch配体；干细胞生长因子，即SCF；Fms相关的酪氨酸激酶受体3，即Flt3L；促血小板生成素，即TPO；白介素‑6，即IL‑6；以及UM171分子，所述UM171分子的结构式如式I所示
【技术特征摘要】
2017.10.27 CN 20171102770861.一种组合物，其包括：转化生长因子-β，即TGF-β；Notch配体；干细胞生长因子，即SCF；Fms相关的酪氨酸激酶受体3，即Flt3L；促血小板生成素，即TPO；白介素-6，即IL-6；以及UM171分子，所述UM171分子的结构式如式I所示2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述TGF-β的浓度为50-200ng/ml，优选为50-100ng/ml；所述Notch配体的浓度为10-100ng/ml，优选为20-50ng/ml。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中，所述SCF的浓度为50-200ng/ml，优选为50-100ng/ml；所述Flt3L的浓度为50-200ng/ml，优选为50-100ng/ml；所述TPO的浓度为50-200ng/ml，优选为50-100ng/ml；所述IL-6的浓度为10-100ng/ml，优选为20-50ng/ml；所述UM171分子的浓度为20nmol-1μmol/ml，优选为100-350nmol/ml。4.一种体外长期培养、扩增造血干细胞和/或祖细胞的无血清培养基，其包括：基础培养基以及权利要求1～3中任一项所述的组合物。5.根据权利要求4所述的无血清培养基，其中，所述基础培养基为无血清基础培养基。6.一种体外长期培养、扩增造...
【专利技术属性】
技术研发人员：方日国，袁鹏飞，
申请(专利权)人：博雅辑因北京生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11
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