利用干细胞重建毛囊的生发方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种利用干细胞重建毛囊的生发方法，包括以下步骤：S1针对脱发者具体生理指标，通过抑制毛囊萎缩凋亡信号通路和上调毛囊生长发育信号通路使脱发者头皮真皮层能够恢复毛囊干细胞工作所需生理条件；S2分离脱发者干细胞，优化培养条件并完成体外扩增培养；S3将体外扩增培养的干细胞植入到脱发者头皮的真皮层，调控毛囊干细胞再生的Wnt/β‑catenin信号通路，配合使用多种细胞因子使毛囊干细胞及其分化细胞通过自组织方式重建毛囊结构，毛囊自主形成并长出头发。本发明专利技术通过重建脱发者头皮局部微环境和引入毛囊干细胞的方法促进生发，遵循头发生长的本身规律解决脱发问题。

Hair follicle reconstruction using stem cells and its application

The invention relates to a hair follicle reconstruction method using stem cells, which includes the following steps: S1 aims at specific physiological indicators of hair loss, through inhibiting the apoptotic signal pathway of hair follicle atrophy and updating the signal pathway of hair follicle growth and development, enables hair loss person's scalp dermis to restore the physiological conditions required for hair follicle stem cells to work; S2 isolates hair loss person's stem cells, optimizes culture conditions and completes in vitro. Expansion culture; S3 implants expanded and cultured stem cells into the dermis of hair loss, regulates the Wnt/beta catenin signaling pathway of hair follicle stem cell regeneration, and uses a variety of cytokines to make hair follicle stem cells and their differentiated cells reconstruct hair follicle structure by self-organization, so that hair follicle can form and grow spontaneously. The invention promotes hair growth by reconstructing local microenvironment of hair loss person's scalp and introducing hair follicle stem cells, and solves hair loss problem by following the law of hair growth itself.

【技术实现步骤摘要】
利用干细胞重建毛囊的生发方法及应用
本专利技术涉及生发
与干细胞领域，特别涉及一种利用毛囊干细胞重建毛囊的生发方法及其在生发领域的应用。
技术介绍
脱发对人的整体外观形象影响较大，会衍生形成心理问题和生理问题，有时还会严重影响脱发者的正常生活。脱发的主要因素包括：遗传因素、病理因素、生理激素紊乱、营养不足以及其他因素等，人们也开发了很多治疗脱发的方法，如：强化头发的护理与养护，使用各种生发药物，进行各种饮食配方调理。但脱发问题始终不能有效解决，其根本原因在于我们并没有遵循头发生长发育的内在规律来解决脱发问题。头发的整个发育期包括四个阶段：生长期、退化期、休止期、新生期，脱发的根本原因是头发的发育停止于退化期与休止期，无法到达新生期与生长期，使得头发的死亡速率大于新生速率，最终造成脱发症状。头发产生于头皮真皮层中的毛囊，毛囊中含有毛囊干细胞，能够不断形成新的头发细胞促进头发生长。对于毛囊存在的脱发情况，可以通过对脱发者激素分泌的调理、营养平衡的调整，加强对头发的营养与护理，增强对造成脱发物质的代谢及排出，都可以达到提高毛囊生理活性和缓解脱发的效果。对于毛囊萎缩与凋亡造成的脱发，只能通过调整脱发者头皮真皮层的生理状态并重建毛囊的方法解决，不重建头皮真皮层中毛囊干细胞生长分化的生理条件，移植再多的毛囊也不可能存活，不可能真正解决脱发问题。与毛囊生长发育相关的信号通路较多，其中比较关键的有Wnt/β-catenin通路，TGF-β通路等，能否在分子机制层次对关键信号通路进行有效调控将成为解决生发问题的关键。
技术实现思路
本专利技术为解决现有技术不足，提供了一种利用干细胞重建毛囊的生发方法，有效解决毛囊再造难题，利用毛囊再生头发从根本上解决脱发问题。本专利技术的构思是：先通过对脱发者的精神状态、激素分泌、营养供应等生理状况进行全面调理，使脱发者头皮下真皮层的生理状态能够达到干细胞存活与生长的生理需求：将体外培养的干细胞植入到脱发者头皮的真皮层，配合使用细胞因子调控毛囊萎缩凋亡信号通路和毛囊生长发育信号通路，基于毛囊干细胞的再生功能与多向分化潜能，使毛囊干细胞及其分化细胞通过自组织方式重塑毛囊结构，毛囊可以自主形成头发并自动长出。为解决现有技术中存在的问题，本专利技术提供一种利用干细胞重建毛囊的生发方法及，按照先后顺序包括以下步骤：S1针对脱发者具体生理指标，抑制毛囊萎缩凋亡信号通路，增强毛囊生长发育信号通路，通过对脱发者进行系统调理使其头皮下真皮层能够恢复毛囊干细胞工作所需生理条件；S2分离脱发者毛囊干细胞，优化培养条件并完成体外扩增培养；S3将体外培养的干细胞植入到脱发者头皮的真皮层，利用表皮细胞生长因子、成纤维细胞生长因子配合启动毛囊干细胞的增殖与分化程序，使毛囊干细胞及其分化细胞通过自组织方式重塑毛囊结构，毛囊可以自主形成并长出头发。本专利技术充分利用干细胞的再生功能与多向分化潜能通过自组织方式重建毛囊结构，遵循头发生长的本身规律解决脱发问题。优选的是，步骤S1中，毛囊萎缩凋亡信号通路包括BMP信号通路与TGF-β信号通路和其他辅助调控信号通路。在上述任一方案中优选的是，步骤S1，中毛囊生长发育信号通路包括Wnt/β-catenin信号通路和其他辅助调控信号通路。在上述任一方案中优选的是，步骤S1中，对脱发者进行系统调理并使其头皮下真皮层能够恢复毛囊干细胞工作所需生理条件包括以下指标：消除精神压力等因素造成的激素紊乱与生理代谢异常，衰减造成头皮毛囊萎缩及凋亡的细胞因子；促进真皮层的纤维骨架系统重建，促进细胞基质中层黏连蛋白、纤连蛋白、各种聚糖等组成成份的恢复，促进多种间质细胞的恢复与定位。步骤S1具体为：通过精神、激素、营养、运动等多方面调整，消除脱发者精神压力造成的激素紊乱与生理代谢异常，衰减毛囊萎缩凋亡信号通路(包括BMP信号通路、TGF-β信号通路及辅助信号通路)，刺激毛囊生长发育信号通路(Wnt/β-catenin信号通路)，使脱发者的头皮真皮层能够具备毛囊干细胞的存活与生长所需生理条件。在上述任一方案中优选的是，所述步骤S2中，毛囊干细胞直接从脱发者头皮获取，但干细胞来源不局限于毛囊干细胞，还包括脂肪组织干细胞、间充质干细胞、脐带血干细胞、iPS细胞。在上述任一方案中优选的是，步骤S3中，利用毛囊干细胞的再生功能与多向分化潜能，基于自组织原理重建毛囊结构，通过毛囊自主形成并长出头发。在上述任一方案中优选的是，上述法适用于生发领域。与现有技术相比，本专利技术提供的一种利用毛囊干细胞重建毛囊的生发方法，遵循头发生长发育的自身规律，从肠道菌群、营养、激素、细胞因子四个层面调整脱发者的代谢状况，通过下调毛囊萎缩凋亡信号通路和上调毛囊生长发育信号通路使脱发者头皮真皮层能够恢复毛囊存活与生长所需的生理条件，充分利用植入毛囊干细胞的再生功能与多向分化潜能，通过多种细胞因子调控毛囊干细胞及其分化细胞以自组织方式重建毛囊，通过毛囊自主形成与长出头发，从根本上解决脱发问题。附图说明图1：Wnt/β-catenin信号通路；图2：TGF-β信号通路/BMP信号通路；图3：实施例1脱发者应用本专利技术前后对比图；图4：实施例1中身体调理前后头部皮肤超声成像结果对比；图5：实施例1干细胞移植后新生毛囊；图6：实施例2脱发者应用本专利技术前后对比图；图7：实施例2中身体调理前后头部皮肤超声成像结果对比；图8：实施例2干细胞移植后新生毛囊；图9：实施例3脱发者应用本专利技术前后对比图；图10：实施例3中身体调理前后头部皮肤超声成像结果对比；图11：实施例3干细胞移植后新生毛囊。具体实施方式为了更进一步了解本专利技术的
技术实现思路
，下面将结合具体实施例详细阐述本专利技术。本专利技术所应用的化学试剂以及仪器如未经特别说明，均可从商业渠道购买，其中所用酵素为河北中佳本草生物技术有限公司昶佳胃肠道调节酵素。本专利技术所用相关方法均依照国标和发表文献方法进行。选择Wnt信号通路(见图1)、TGF-β信号通路/BMP信号通路(见图2)的基因表达值作为患者头部真皮生理状态的评定依据。脱发患者头部皮肤用皮肤钻孔器对秃发区取样，取样大小为直径4mm，厚度3mm的饼型组织；用同样方法在未脱发区采集毛囊。用荧光定量PCR的方法对脱发患者头部皮肤组织与未脱发处基因表达水平进行检测，采用目的基因与内参基因之间Ct值之间的差异来确定目的基因的表达量，本专利技术中，以GAPDH作为内参基因，每个RNA样品的定量PCR进行三个重复以消除系统误差。用HighPureRNAIsolationKit提取总RNA，采用TaqManReverseTran-scriptionRengents试剂盒将总RNA反转录为cDNA(25μL体系)，取反转录产物cDNA模板2.5μL，按照TaqManGeneExpressionMasterMix说明书进行定量PCR检测。扩增程序为：95℃10min，95℃30S，55℃30s，72℃延伸30s共40个循环，定量PCR仪为Roche480Ⅱ。细胞培养试剂与培养条件:DMEM(SH30023.01B，美国HYCLONE公司)、胎牛血清(SH30087.01，美国HYCLONE公司)、PBS磷酸钾缓冲液(SH30256.01B，美国HYCLONE公司)、青链霉素(SH300本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用干细胞重建毛囊的生发方法及，按照先后顺序包括以下步骤：S1 针对脱发者具体生理指标，抑制毛囊萎缩凋亡信号通路，增强毛囊生长发育信号通路，通过对脱发者进行系统调理使其头皮下真皮层能够恢复毛囊干细胞工作所需生理条件；S2 分离脱发者毛囊干细胞，优化培养条件并完成体外扩增培养；S3 将体外扩增培养的干细胞植入到脱发者头皮的真皮层，利用干细胞的再生功能与多向分化潜能，配合使用多种细胞因子调控毛囊干细胞及其分化细胞通过自组织方式重建毛囊结构，毛囊自主形成并长出头发。

【技术特征摘要】
1.一种利用干细胞重建毛囊的生发方法及，按照先后顺序包括以下步骤：S1针对脱发者具体生理指标，抑制毛囊萎缩凋亡信号通路，增强毛囊生长发育信号通路，通过对脱发者进行系统调理使其头皮下真皮层能够恢复毛囊干细胞工作所需生理条件；S2分离脱发者毛囊干细胞，优化培养条件并完成体外扩增培养；S3将体外扩增培养的干细胞植入到脱发者头皮的真皮层，利用干细胞的再生功能与多向分化潜能，配合使用多种细胞因子调控毛囊干细胞及其分化细胞通过自组织方式重建毛囊结构，毛囊自主形成并长出头发。2.根据权利要求1所述的利用干细胞重建毛囊的生发方法，其特征在于，步骤S1中，毛囊萎缩凋亡信号通路包括BMP信号通路与TGF-β信号通路和其他辅助调控信号通路。3.根据权利要求1所述的利用毛囊干细胞重建毛囊的生发方法，其特征在于，步骤S1，中毛囊生长发育信号通路包括Wnt/β-catenin信号通路和其他辅助调...

【专利技术属性】
技术研发人员：华子昂，万君兴，竹添，孙宁，王娇，张健，范春兰，
申请(专利权)人：华子昂，万君兴，竹添，
类型：发明
国别省市：北京,11