一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法技术

本发明专利技术涉及天然药物提取检测技术领域，为解决传统碘提取检测工艺无法同时测定多种碘的问题，提供了一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法，所述无机碘为碘化钾，所述有机碘为3‑碘‑L‑酪氨酸和3,5‑二碘‑L‑酪氨酸，包括以下步骤：精密称取1.0g磨碎的昆布颗粒样品，加入10mL离子液体，调节pH值为5.0～7.0，于40℃温度条件下在超声仪中提取15～75min，离心、收集上清液，通过超高效液相色谱分析检测。本发明专利技术将ILs作为LSE的提取溶剂，通过单一的过程且使用简单和相对经济的设备，快速高效地从复杂样品基质中提取生物活性碘，实现同时提取检测实际样品中的I

A Combined Extraction and Detection Method of Inorganic Iodine and Organic Iodine in Kunbu

The invention relates to the technical field of extraction and detection of natural medicines. To solve the problem that traditional iodine extraction and detection technology can not simultaneously determine various iodines, a combined extraction and detection method of inorganic iodine and organic iodine in Kunbu is provided. The inorganic iodine is potassium iodide, and the organic iodine is 3_iodine_L_tyrosine and 3,5_diiodine_L_tyrosine, including the following steps: precisely weighing and grinding 1.0g. The crushed Kunbu granule sample was added with 10mL ionic liquid, and the pH value was adjusted to 5.0-7.0. The supernatant was centrifuged and collected for 15-75 minutes at 40 C. The supernatant was analyzed by Ultra High Performance Liquid Chromatography (Ultra High Performance Liquid Chromatography). The invention takes ILs as the extraction solvent of LSE, extracts biologically active iodine from complex sample matrix quickly and efficiently through a single process and using simple and relatively economical equipment, and realizes simultaneous extraction and detection of I in actual samples.

【技术实现步骤摘要】
一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法
本专利技术涉及天然药物提取检测
，尤其涉及一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法。
技术介绍
碘在1811年由法国化学家Courtois发现，是周期表VIIA族中天然存在的非金属元素。碘作为必需的微量元素对动物和人类的健康发展至关重要。作为甲状腺激素的组成成分，碘缺乏会导致儿童神经发育严重延迟以及成人甲状腺肿大和甲状腺功能减退。因此，日常饮食和水中不同碘物质的准确浓度具有相当大的科学意义。在自然界中碘有各种无机和有机形态，包括碘化物，碘酸盐和有机碘(四碘甲腺原氨酸(T4)，三碘甲腺原氨酸(T3)，二碘甲腺原氨酸(T2)，3-碘-L-酪氨酸(MIT)和3,5-二碘-L-酪氨酸(DIT))，它们可以用作膳食补充剂，催化剂，药物制剂，稳定剂和摄影应用。环境和生物样品中碘浓度的测定很困难，这主要是由于样品中碘的浓度很低。因此采用高度灵敏的用于测定碘的分析方法是非常重要的。目前，测定碘的主要方法包括比色法，电位滴定法，同位素交换法，X射线荧光法(XRF)，气相色谱法(GC)，高效液相色谱结合电感耦合等离子质谱法(HPLC-ICP-MS)和中子活化分析(NAA)。在这些方法中，由于HPLC-ICP-MS具有高灵敏度，元素特异性和低检测限的优点，因而是用于确定各种样品中碘物质的最重要的方法，此外，由于可以通过MS鉴定分析物，所以分析物不需要被完全分离。然而，几乎没有报道可以通过单一的过程且使用简单和相对经济的设备同时测定I-，MIT和DIT三种物质，尤其是没有使用绿色的溶剂萃取方法。海藻被分类为大型藻类，并被分成三大组：棕色，红色和绿色藻类。自古以来在东亚国家如日本，韩国和中国以及一些西方国家，包括爱尔兰，布列塔尼和威尔士，海藻是食品，补充品，药品和肥料的重要来源。近年来对纤维，矿物质和微量元素，维生素，多不饱和脂肪酸，必需氨基酸，酚类和类胡萝卜素等有益健康的营养素的研究引起了广泛的关注，这些营养素具有很强的抗炎，抗菌，抗氧化，抗病毒和抗肿瘤活性。由于海藻是一种复杂的基质，因此需要剧烈的操作条件和特殊的提取溶剂来提取其中的生物活性成分。在海藻中存在的不同生物活性化合物中，碘是人类正常甲状腺功能所需的重要微量营养元素。通常用于从海藻中提取目标碘化合物的提取方法包括干碱萃取法，涡旋提取，热萃取，微波辅助的碱性和体外消化，和微波辅助提取。但是，目前这些方法都需要大量的提取溶剂和较长的提取时间。而且，目前大多数样品前处理方法都使用四甲基氢氧化铵(TMAH)来评估碘。TMAH是强碱性的而且如果摄入或皮肤接触对人体是剧毒的，此外其液体会产生有害且可能导致失明的有毒腐蚀性蒸气。因此，有必要找到TMAH的替代溶剂。中国专利文献上公开了“一种饲料中碘含量检测方法”，其公告号为CN104458965A，该专利技术采用碘酸根在酸性条件下具有强氧化性，采取在稀硫酸条件下，加入过量的偏重亚硫酸钠，使样品中的碘全部还原成碘离子，再用离子对色谱法测定溶液中的碘离子，但是该专利技术无法同时检测多种碘含量。因此，开发一个简单、环保的方法用于同时测定实际样品中的无机和有机碘是非常有意义的。
技术实现思路
本专利技术为了克服上述现有技术中存在的问题，提供了一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法，将ILs作为液固萃取(LSE)的提取溶剂用于同时提取昆布中的无机和有机碘，该方法不仅代替了有毒溶剂，降低了对人体健康和环境的危害，而且能获得较高的提取效率。为了实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法，所述无机碘为碘化钾(KI)，所述有机碘为3-碘-L-酪氨酸(MIT)和3,5-二碘-L-酪氨酸(DIT)，包括以下步骤：精密称取1.0g磨碎的昆布颗粒样品，加入10mL离子液体，调节pH值为5.0～7.0，于40℃温度条件下在超声仪中提取15～75min，离心、收集上清液，通过超高效液相色谱(UHPLC)分析检测。离子液体(IonicLiquid，简称IL或ILs)是由特定的有机阳离子和无机或有机阴离子组成，其熔点等于或低于100℃，且已被广泛用作传统有机溶剂的替代溶剂。对阳离子或阴离子的适当改性可以调节IL的疏水性/亲水性，从而可以根据反应条件的需要来使用。由于其独特的物理和化学性质，如化学稳定性，极性，可忽略的蒸汽压，不可燃性，低熔点，较高的离子电导率，较好的热稳定性，良好催化性能，较宽的液线温度以及抗摩擦和抗磨损性，ILs已被广泛用于各种领域，如润滑，合成，电化学以及分离和提取领域。目前还没有关于使用ILs从食品中同时萃取有机和无机碘化合物的报道。本专利技术开发了一种简单，环境友好的基于IL的LSE方法结合HPLC用于定量测定植物性食品中的含碘物质。IL与LSE的结合可以实现廉价的样品预处理，且能确保获得满意的提取效率和低的检测限。3-碘-L-酪氨酸(MIT)和3,5-二碘-L-酪氨酸(DIT)在pH为5.0～7.0范围内主要以中性形式存在，离子液体与两种有机酸的羧基，氨基和羟基之间有强的氢键形成，故pH值5.0～7.0为较佳的提取环境。pH值更为优选为6.5，当样品溶液的pH值高于6.5时，两种有机酸的羧基，氨基和羟基开始解离，削弱了离子液体与目标化合物之间的氢键，从而导致目标分析物萃取效率降低，故最优选的pH值为6.5。该方法简便，快速，准确，灵敏度高，重现性好。本专利技术创造性地采用离子液体(ILs)替代传统溶剂TMAH，在水浴中使用IL和超声波从海藻等复杂基质中同时浸出无机和有机碘，该方法不需要剧烈的条件，且会更加环保并在更短的提取时间内获得更高的提取效率。作为优选，所述超高效液相色谱分析检测条件为：流动相由A相和B相组成，所述A相为10mMKH2PO4，所述B相为乙腈，流速设为0.5mL/min；梯度洗脱程序如下：0-1分钟，10-15％B；1-2分钟，15-25％B；2-3分钟，25-35％B；3-4分钟，35-40％B；4-5分钟，40-40％B；5-6分钟，40-45％B；6-7分钟，45-45％B；7-8分钟，45-50％B；8-9分钟，50-10％B；样体积为2μL，检测波长230nm。本方法用频率为40kHz的KQ-100B型超声波仪(恒功率为100W)从昆布中提取碘化物。该超声系统是浸入与温度控制器连接的水浴中并保持所需的提取温度。所述磨碎的昆布颗粒样品选自三种不同产地的昆布样品：浙江，福建，山东三省的当地市场采购。所有样品均为脱水产品。所述磨碎的昆布颗粒样品由脱水的昆布样品用粉碎机充分研磨成粉末状颗粒，并用100目不锈钢筛过筛后得到。所述通过超高效液相色谱(UHPLC)分析检测的方法为：用KI的对照品配制一系列不同浓度的对照品溶液，按昆布提取液的同样条件用UHPLC检测，获得KI对照品的液相色谱图，以KI的浓度为横坐标，以KI色谱峰的峰面积为纵坐标绘制KI的标准曲线，按同样方法制作MIT和DIT的标准曲线；根据提取液的液相色谱图中各色谱峰的峰面积及各成分的标准曲线，计算得到昆布提取液中KI、MIT和DIT的含量，可相应计算得到提取液中的有效成分相对于昆布样品的含量。作为优选，所述离子液体(ILs)选自1-乙基-3-甲基咪唑-1-(+)-乳酸([Emi本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法，其特征在于，所述无机碘为碘化钾，所述有机碘为3‑碘‑L‑酪氨酸和3,5‑二碘‑L‑酪氨酸，包括以下步骤：精密称取1.0g磨碎的昆布颗粒样品，加入10mL离子液体，调节pH值为5.0～7.0，于40℃温度条件下在超声仪中提取15～75min，离心、收集上清液，通过超高效液相色谱分析检测。

【技术特征摘要】
1.一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法，其特征在于，所述无机碘为碘化钾，所述有机碘为3-碘-L-酪氨酸和3,5-二碘-L-酪氨酸，包括以下步骤：精密称取1.0g磨碎的昆布颗粒样品，加入10mL离子液体，调节pH值为5.0～7.0，于40℃温度条件下在超声仪中提取15～75min，离心、收集上清液，通过超高效液相色谱分析检测。2.根据权利要求1所述的一种昆布中无机碘和有机碘的联合提取检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱分析检测条件为：流动相由A相和B相组成，所述A相为10mMKH2PO4，所述B相为乙腈，流速设为0.5mL/min；梯度洗脱程序如下：0-1分钟，10-15％B；1-2分钟，15-25％B；2-3分钟，25-35％B；3-4分钟，35-40％B；4-5分钟，40-40％B；5-6分钟，40-45％B；6-7分钟，45-45％B；7-8分钟，45-50％B；8-9分钟，50-10％B；样体积为2μL，检测波长2...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹君，胡雨涵，王秋燕，杨娟，彭黎卿，董新，杜丽晶，
申请(专利权)人：杭州师范大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33