一种毛细管电泳的在线富集方法技术

本发明专利技术涉及天然药物提取技术领域，针对目前碘化物在线富集可持续操作时间有限的问题，公开了一种毛细管电泳的在线富集方法。该方法包括样品的处理和利用在线固相萃取‑毛细管电泳程序进行富集。该方法首次采用离子液体作为洗脱溶剂应用在在线固相萃取毛细管电泳的富集的技术中，并且应用在天然产物提取富集领域。经过富集方法处理之后，仪器的灵敏度大大提高，每种样品的检测限均比传统方法大大降低。本发明专利技术采用的离子液体，以及固相萃取中所用的吸附剂，大大减少了有机溶剂的使用，显著降低了提取过程中的污染与危害，改善了提取效果与提取效率，并且该方法简单，应用范围广泛，易于使用，富集效果显著。

An on-line enrichment method for capillary electrophoresis

The present invention relates to the field of natural drug extraction technology. To solve the problem of limited sustainable operation time of on-line enrichment of iodide, an on-line enrichment method of capillary electrophoresis is disclosed. The method includes sample preparation and enrichment by on-line solid phase extraction and capillary electrophoresis. Ionic liquids were first used as eluting solvents in on-line solid phase extraction (SPE) and capillary electrophoresis (CE) for the enrichment of natural products. After enrichment, the sensitivity of the instrument is greatly improved, and the detection limit of each sample is much lower than that of the traditional method. The ionic liquids and adsorbents used in solid phase extraction greatly reduce the use of organic solvents, significantly reduce the pollution and hazards in the extraction process, improve the extraction effect and efficiency, and the method is simple, widely used, easy to use and remarkable enrichment effect.

【技术实现步骤摘要】
一种毛细管电泳的在线富集方法
本专利技术涉及天然药物提取
，尤其涉及一种毛细管电泳的在线富集方法。
技术介绍
为了提高毛细管电泳的灵敏性，一种通过在线固相萃取-毛细管电泳连用的方法被提出。在这种方法中，将由实验室自制的小段裸熔石英毛细管内含有固相萃取吸附剂的分析物浓缩器插入毛细管的入口部分，将分析的化合物加载到固相萃取的吸附剂上，然后进行分析物的洗脱和分离。为了最大限度地减少因使用筛板构建分析物浓缩器时造成的电渗流干扰、电流不稳定和迁移时间的不可再现性问题，这种构建装置已发展为不使用两块筛板来固定吸附剂材料，而是要求进行固相萃取吸附剂的粒径比两端的毛细管的直径大。这种改善后的分析方法克服了分析复杂样品基质时毛细管电泳的低灵敏度问题，此外，在高压条件下的大样品加载也有效地避免了分析物的损失。整个在线固相萃取过程实现了一个消耗少量试剂的集成自动化模型，目前，这种富集方法已用于分析酸性抗生素，生物碱和生物样品等，而几乎没有用这种方法分析含有特定官能团的化合物。此外，一些传统的有机溶剂通常用于洗脱加载在集中器上的分析物，然而，由于它具有高挥发性和低粘度，可持续操作时间有限，导致少量分析本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于包括以下步骤：（1）样品处理：将TBAH和水加入粉碎后的海带和海藻干燥品中，用氮气流纯化后，立即盖上盖子，混匀后超声提取，然后加入蒸馏水并调节pH得到混合样品溶液，离心、过滤；（2）在线固相萃取‑毛细管电泳程序：（A）定期用甲醇和硼砂缓冲液对嵌入固相萃取装置的毛细管进行冲洗；（B）样品加载；（C）用注射缓冲液清洁毛细管；（D）用洗脱溶剂洗脱加载到浓缩器中的化合物；（E）引入缓冲液推动洗脱塞；（F）分离。

【技术特征摘要】
1.一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于包括以下步骤：（1）样品处理：将TBAH和水加入粉碎后的海带和海藻干燥品中，用氮气流纯化后，立即盖上盖子，混匀后超声提取，然后加入蒸馏水并调节pH得到混合样品溶液，离心、过滤；（2）在线固相萃取-毛细管电泳程序：（A）定期用甲醇和硼砂缓冲液对嵌入固相萃取装置的毛细管进行冲洗；（B）样品加载；（C）用注射缓冲液清洁毛细管；（D）用洗脱溶剂洗脱加载到浓缩器中的化合物；（E）引入缓冲液推动洗脱塞；（F）分离。2.如权利要求1所述的一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于：步骤（1）中，所述混合样品溶液的PH为2.1~9.0。3.如权利要求1所述的一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于：步骤（2）中，所述洗脱溶剂为甲醇、乙腈、乙醇、氯仿、乙酸乙酯、乙腈/水、[BMIM]PF6和[EPy][BF4]中的至少一种。4.如权利要求3所述的一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于：所述乙腈/水中乙腈和水的体积比为5:44~46；[BMIM]PF6的浓度为4.9~5.1mM，[EPy][BF4]的浓度为5~15mM。5.如权利要求1所述的一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于：步骤（2）中，所述洗脱溶剂的洗脱时间为30~80s。6.如权利要求1所述的一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于：步骤（2）中，所述所选样品加载时间为10~50min。7.如权利要求1所述的一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于：步骤（1）中，所述海带和海藻干燥品与TBAH和水的质量体积比为1g:1g:18~22mL:28~32mL，TBAH的浓度为8~12wt％。8.如权利要求1所述的一种毛细管电泳的在线富集方法，其特征在于：步骤（1）中，所述粉碎后的海带和海藻干燥品的粒径为100~120目；氮气流纯化时间为4~6min，超声提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹君，王秋燕，董雪漫，胡雨涵，杨娟，董新，张芹，
申请(专利权)人：杭州师范大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33