一种蜂蛹提取物及在保护顺铂诱导肾损伤中的应用制造技术

本发明专利技术公开蜂蛹提取物及在保护顺铂诱导肾损伤中的应用，涉及蜂蛹及应用技术领域。本发明专利技术首先制备得到蜂蛹提取物，并将其物应用于治疗顺铂诱导肾损伤，具有治疗顺铂引起的肾损伤的作用；实验发现蜂蛹提取物具有极高的自由基清除活力，能提高机体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH‑Px)的活力，通过抑制顺铂诱导形成超氧自由基的分子机制，而从具有减轻其肾毒性的作用；同时，蜂蛹提取物具有极高营养价值，能够改善动物体质，增强抵抗力，并且蜂蛹提取物因来源于生物体内的活性成分，具有药食两用的功能，无毒副作用，可通过摄食获取，有望进一步开发为安全可靠的治疗药物。

A Bee Pupa Extract and Its Application in Protecting Kidney Injury Induced by Cisplatin

The invention discloses a bee pupa extract and its application in protecting cisplatin-induced kidney injury, and relates to the field of bee pupa and application technology. The invention first prepares and obtains the bee pupa extract, and applies it to treat cisplatin-induced kidney injury, which has the effect of treating cisplatin-induced kidney injury; the experiment finds that the bee pupa extract has extremely high free radical scavenging activity, can improve the activity of superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GSH_Px) in vivo, and can form superoxide freedom by inhibiting cisplatin-induced formation. At the same time, the extract of honeybee pupae has high nutritional value, can improve animal constitution and enhance resistance, and the extract of honeybee pupae has the function of both medicine and food, has no toxic side effects, and can be obtained by feeding. It is hopeful to be further developed as a safe and reliable therapeutic drug.

【技术实现步骤摘要】
一种蜂蛹提取物及在保护顺铂诱导肾损伤中的应用
本专利技术涉及蜂蛹及应用
，具体的涉及一种蜂蛹提取物及在保护顺铂诱导肾损伤中的应用。
技术介绍
顺铂(顺式-二氯二氨合铂Ⅱ，Cisplatin，CDDP)是目前临床上常用的抗癌药物之一。顺铂具有抗癌作用强，毒副作用大，与多种抗肿瘤药有协同作用，缺乏交叉耐药性等特点。注射过顺铂后，顺铂会随着血液循环到达全身器官组织，主要出现于肝、肾、卵巢、皮肤、子宫等。顺铂引起的肾毒性主要涉及细胞毒作用、氧化应激、细胞凋亡、炎症反应等多种机制。临床上，顺铂的疗效与其剂量成正比，顺铂剂量越大，其治疗效果越好，但是其毒副作用也越大。已有研究表明，抗氧化剂及具有自由基清除活性的物质对顺铂所致的氧化应激有保护作用。因此，研究一种能与顺铂结合使用、降低其毒副作用、更好发挥其作用的物质具有重要意义。目前市场上并无专门针对顺铂肾毒副作用的特效治疗药物，使用较为普遍的治疗药物是氨磷汀(AFT)，是一种被国际机构认可的广谱细胞保护剂。AFT是一种化学合成的药物，在治疗顺铂肾损伤的同时也具有一定的毒副作用，其毒副作用主要表现为造成患者低血压。蜂蛹是一种具有良好的抗氧化作用的蜜蜂的蛹,蜂蛹的食用及药用历史悠久，早在公元前1200年前的古籍《尔雅》,以及公元前3世纪的《礼记》中就已经有其食用的记载。在长沙马王堆出土的古医方帛书《五十二病例》就有用蜂胎和蜂子治病的配方。在许多研究中表明，蜂蛹具有抗氧化、降血糖、抗衰老、抗疲劳、抗炎等多种功能；现有技术中对于蜂蛹的利用主要针对蜂蛹干粉制备、食用的加工方式、泡酒和保健酒的制作；综上所述，目前现有技术中还没有能与顺铂结合使用、降低其毒副作用、更好发挥其作用的物质；同时目前在蜂蛹的利用没有对对蜂蛹药用或保护作用进行过深入的技术创新。因此，研究和利用蜂蛹提取物对顺铂诱导的肾损伤的保护作用，具有非常重要现实意义，是对食用资源非常好的技术上的重要创新。
技术实现思路
针对现有技术存在的上述问题，本专利技术提供了一种蜂蛹提取物的制备方法，同时将蜂蛹提取物应用于顺铂诱导肾损伤中，具有治疗顺铂引起的肾损伤的作用。为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本专利技术是通过以下技术方案实现：一种蜂蛹提取物的制备方法，包括以下步骤：步骤一、用注射器吸取蜂蛹组织液体，用玻璃匀浆器匀浆后，电压150V，超声破碎细胞30min，超声波功率150W，12000rpm/min离心10min，取上清；步骤二、按石油醚：蜂蛹＝1：2的比例在涡旋振荡器上混匀3-5min，12000rpm/min离心5min，重复此步骤，直至完全脱脂；步骤三、在真空冷冻干燥机中制成冻干粉，用离心管分装，封口膜封紧，置-80℃冰箱冷冻保存。进一步的，所述步骤一和步骤二都在冰上进行操作。本专利技术的另一目的在于，提供一种蜂蛹提取物在保护顺铂诱导肾损伤药物制备中的应用。本专利技术的另一目的在于，提供一种蜂蛹提取物在制备对顺铂诱导小鼠肾损伤起保护作用的药物中的应用。本专利技术的另一目的在于，提供一种治疗顺铂引起的肾损伤的药物，包括所述的蜂蛹提取物。本专利技术的有益效果：本专利技术首先制备得到蜂蛹提取物，并将其物应用于治疗顺铂诱导肾损伤，具有治疗顺铂引起的肾损伤的作用；实验发现蜂蛹提取物具有极高的自由基清除活力，能提高机体内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力，通过抑制顺铂诱导形成超氧自由基的分子机制，而从具有减轻其肾毒性的作用；同时，蜂蛹提取物具有极高营养价值，能够改善动物体质，增强抵抗力，并且蜂蛹提取物因来源于生物体内的活性成分，具有药食两用的功能，无毒副作用，可通过摄食获取，有望进一步开发为安全可靠的治疗药物。当然，实施本专利技术的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例所述蜂蛹提取物的制备方法的流程图；图2为本专利技术实施例所述蜂蛹提取物清除DPPH自由基的活性(A)和对超氧阴离子的清除作用(B)曲线图；图3为本专利技术实施例所述血清SOD和GSH-PX活性，MDA、Cr和BUN含量的变化结果(A蜂蛹提取物对小鼠血清中SOD的影响；B蜂蛹提取物对小鼠血清中GSH-PX的影响；C蜂蛹提取物对小鼠血清中MDA的影响；D蜂蛹提取物对小鼠血清中Cr的影响；E蜂蛹提取物对小鼠血清中BUN的影响；F蜂蛹提取物对小鼠肾脏SOD活性的影响；G蜂蛹提取物对小鼠肾脏GSH-Px活性的影响)；图4为本专利技术实施例所述身体指标变化示意图(图3A为小鼠尿液Cr，B为尿液Bun；C表示小鼠的体重变化)；图5为本专利技术实施例所述肾脏组织切片HE染色显微图(D为对照组，E为顺铂组，F为蜂蛹组；细胞疏松(黑色三角形)，炎性细胞浸润(黑色箭头)，细胞碎片(空心箭头))；具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。实施例1一种蜂蛹提取物的制备方法，包括以下步骤：步骤一、用注射器吸取蜂蛹组织液体，用玻璃匀浆器匀浆后，电压150V，超声破碎细胞30min，12000rpm/min离心10min，取上清；步骤二、按石油醚：蜂蛹＝1：2的比例在涡旋振荡器上混匀3-5min，12000rpm/min离心5min，重复此步骤，直至完全脱脂；步骤三、在真空冷冻干燥机中制成冻干粉，用离心管分装，封口膜封紧，置-80℃冰箱冷冻保存。所述步骤一和步骤二都在冰上进行操作。本次实验研究采用的蜂蛹提取物来自野生胡蜂幼虫。实施例2蜂蛹提取物在保护顺铂诱导肾损伤中的应用顺铂诱导的肾损伤小鼠模型制备选取18只健康雄性小鼠，随机分为空白对照组、顺铂(CDDP)组和蜂蛹组，每组各6只；对照组和CDDP组分别给予0.3mL0.9％生理盐水，每天一次，共15天；蜂蛹组按200mg/kg的剂量灌胃蜂蛹提取物(蜂蛹提取物用0.9％生理盐水配置)，每天一次，连续15天；于灌胃的第11天开始，CDDP组和蜂蛹组分别按2mg/kg注射顺铂溶液(顺铂用0.9％生理盐水配置)，每天一次，连续5天，对照组注射0.9％生理盐水。期间，小鼠饲喂基础饲料，自由摄食，自由饮水。在灌胃前，每天称量小鼠体重。蜂蛹提取物对DPPH自由基的清除作用DPPH自由基是一种稳定的氮中心的自由基，在517nm波长处有强吸收，在溶液中呈现深紫色，被中和后会变为无色或浅黄色。利用这一特性，可得到初始自由基的量，计算得到其清除率。DPPH自由基的清除能力可有效的评价抗氧化剂的抗氧化活性。准确称取DPPH25mg，用无水乙醇定容至500mL。取不同浓度的样品溶液0.1mL，加入1.4mLDPPH乙醇溶液，充分混匀后，立即置于暗处反应30min，用紫外分光光度计于517nm测定其吸光度(A)，以无水乙醇调零。按照下式计算各样品对DPPH的清除率(SA)：清除本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.蜂蛹提取物在保护顺铂诱导肾损伤中的应用。

【技术特征摘要】
1.蜂蛹提取物在保护顺铂诱导肾损伤中的应用。2.如权利要求1所述的蜂蛹提取物的应用，其特征在于：所述蜂蛹提取物的制备方法，包括：步骤一、用注射器吸取蜂蛹组织液体，用玻璃匀浆器匀浆后，电压150V，超声破碎细胞30min，超声波功率150W，12000rpm/min离心10min，取上清；步骤二、按石油醚：蜂蛹＝1：2的比例在涡旋振荡器上混匀3-5min，12000rpm/min离心5min，重复此步骤，直至完全脱脂；步骤三、在真空...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵锋，杨绍伟，赵芳，熊萧然，冯玄，
申请(专利权)人：普洱学院，
类型：发明
国别省市：云南,53