一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法技术

一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，属于微生物发酵技术领域。其包括以下工艺步骤：1）斜面菌种制备；2）摇瓶菌种制备；3）一级种子罐培养；4）二级种子罐培养；5）发酵罐培养；6）板框过滤；7）滤液浓缩；8）滤饼烘干。本发明专利技术采用了特定的培养基以及特定的条件对蝙蝠蛾拟青霉进行培养发酵，其中培养基原料简单，原料来源广泛，制备成本低，采用特定条件培养，缩短了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产周期，原料利用率高。同时与野生虫草相比，有效成分含量高、重金属含量低，滤液回收再利用，有效减少工业污染，能产生极大的社会经济效益，对民众的健康得到很好的保障。

A Method for Producing Mycelium of Paecilomyces batmoth

The invention relates to a production method of the mycelium of Paecilomyces batmoth, belonging to the technical field of microbial fermentation. It includes the following technological steps: 1) preparation of inclined bacteria; 2) preparation of shaking flask bacteria; 3) primary seed tank culture; 4) secondary seed tank culture; 5) fermentation tank culture; 6) plate and frame filtration; 7) concentration of filtrate; 8) drying of filter cake. The invention adopts a specific culture medium and specific conditions to culture and ferment Paecilomyces batmoth. The culture medium has simple raw materials, wide sources of raw materials, low preparation cost, and adopts specific conditions to culture, shortens the production cycle of Paecilomyces batmoth mycelium, and has high utilization rate of raw materials. At the same time, compared with wild Cordyceps sinensis, the content of active ingredients is high, the content of heavy metals is low, the filtrate is recycled and reused, the industrial pollution is effectively reduced, which can produce great social and economic benefits, and the health of the people is well guaranteed.

【技术实现步骤摘要】
一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法
本专利技术属于微生物发酵
，具体涉及一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法。
技术介绍
蝙蝠蛾拟青霉菌丝体是青海产新鲜冬虫夏草（Cordycepssinesis(Berkele)sacco）中分离所得的虫草菌——蝙蝠蛾拟青霉（Paecilomyceshepialichen）经深层发酵培养，将发酵产物过滤干燥制成。虫草系冬虫夏草寄生在鳞翅目蝙蝠蛾昆虫幼虫上所形成的子座（即草部分）与菌核（即虫的部分）二部分组成的复合体，经干燥而得，故简称虫草。有关单位对冬虫夏草深层发酵进行了广泛研究，取得了一定的成果，其发酵物与青海产天然虫草比较，两者的化学成分和药理作用基本相同。化学成分：核苷类化合物、甾醇类、氨基酸、肽类、甘露醇、单糖和多糖、有机酸、无机元素、维生素类、蛋白质及多胺类物质。蝙蝠蛾拟青霉菌丝体与冬虫夏草的指纹谱很相似。另外根据《蝙蝠蛾拟青霉菌与冬虫夏草关系的分子系统学研究》显示，冬虫夏草和僵虫基因组DNA模板与蝙蝠蛾拟青霉的rDNA-ITS序列具有100%的一致性。冬虫夏草具有重要的食用与药用价值，野生资源被极度采集致使资源越来越少,国内外市场货源紧缺,因此研究一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体及其发酵应用技术很有必要。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法的技术方案。所述的一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于包括以下工艺步骤：1）斜面菌种制备：在无菌条件下进行分离蝙蝠蛾拟青霉并接种于斜面培养基，放置于恒温条件25℃-26℃条件下进行培养10-15天，得到蝙蝠蛾拟青霉斜面菌种；所述斜面培养基由马铃薯1-3份、葡萄糖1-3份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、琼脂1-3份、水900-1100份配制而成；2）摇瓶菌种制备：将蝙蝠蛾拟青霉斜面菌种接入摇瓶培养基中，置于摇床上以160-200r/min震荡培养，培养温度25±1℃，培养时间2-4天，得到蝙蝠蛾拟青霉摇瓶菌种；所述摇瓶培养基由麸皮3-7份、葡萄糖1-3份、蛋白胨0.2-0.8份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、豆油0.02-0.06份、水90-110份配制而成；3）一级种子罐培养：将摇瓶菌种接入一级种子罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，保持罐压0.05Mpa，培养周期60-80小时，得到一级种子罐发酵液；所述一级种子罐培养基由豆粕粉1-3份、葡萄糖1-3份、蛋白胨0.2-0.8份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、消泡剂0.02-0.06份、豆油0.04-0.08份、水90-110份配制而成；4）二级种子罐培养：将一级种子罐发酵液接种到二级种子罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，保持罐压0.05Mpa，培养周期50-65小时，得到二级种子罐发酵液；所述二级种子罐培养基由豆粕粉1-3份、葡萄糖1-3份、蛋白胨0.2-0.8份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、消泡剂0.02-0.06份、豆油0.04-0.08份、水90-110份配制而成；5）发酵罐培养：将二级种子罐发酵液接入到发酵罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，接种率5%-20%，保持罐压0.05Mpa，培养周期40-60小时，还原糖显示低于0.5%，PH显示低于4时发酵成熟，得到蝙蝠蛾拟青霉菌丝体发酵液；所述发酵罐培养基由豆粕粉1-3份、白糖1-3份、葡萄糖1-3份、蛋白胨0.2-0.8份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、消泡剂0.02-0.06份、豆油0.04-0.08份、水90-110份配制而成；6）板框过滤：将发酵完成的发酵液通过板框压滤机进行过滤，得到滤饼及滤液；7）滤液浓缩：将过滤好的滤液进行双效浓缩得到浓缩液，浓缩液通过喷雾干燥得到虫草胞外多糖粉；8）滤饼烘干：将滤饼烘干、粉碎、混合后获得虫草菌丝体。所述的一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于所述步骤1）中斜面培养基由马铃薯2份、葡萄糖2份、磷酸二氢钾0.1份、硫酸镁0.03份、琼脂1.5-2份、水950-1000份配制而成。所述的一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于所述步骤2）中摇瓶培养基由麸皮5份、葡萄糖2份、蛋白胨0.5份、磷酸二氢钾0.1份、硫酸镁0.03份、豆油0.04份、水95-100份配制而成。所述的一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于所述步骤3）中一级种子罐培养基由豆粕粉2份、葡萄糖2份、蛋白胨0.5份、磷酸二氢钾0.1份、硫酸镁0.03份、消泡剂0.04份、豆油0.06份、水95-100份配制而成。所述的一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于所述步骤4）中二级种子罐培养基由豆粕粉2份、葡萄糖2份、蛋白胨0.5份、磷酸二氢钾0.1份、硫酸镁0.03份、消泡剂0.04份、豆油0.06份、水95-100份配制而成。所述的一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于所述步骤5）中发酵罐培养基由豆粕粉2份、白糖2份、葡萄糖2份、蛋白胨0.5份、磷酸二氢钾0.1份、硫酸镁0.03份、消泡剂0.04份、豆油0.06份、水95-100份配制而成。所述的一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于所述步骤7）中双效浓缩至密度为1.0-1.1g/cm3。所述的一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于所述步骤8）中烘箱温度80℃-100℃，烘干时间24-60h。本专利技术采用了特定的培养基以及特定的条件对蝙蝠蛾拟青霉进行培养发酵，其中培养基原料简单，原料来源广泛，制备成本低，采用特定条件培养，缩短了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产周期，原料利用率高。同时与野生虫草相比，有效成分含量高、重金属含量低，滤液回收再利用，有效减少工业污染，能产生极大的社会经济效益，对民众的健康得到很好的保障。附图说明图1为腺苷标准品的HPLC图谱；图2为蝙蝠蛾拟青霉菌粉样品的HPLC图谱。具体实施方式以下结合实施例来进一步说明本专利技术，本专利技术中涉及的份数均为重量份。实施例1：一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法1）斜面菌种制备：在无菌条件下进行分离蝙蝠蛾拟青霉并接种于斜面培养基，放置于恒温条件25℃-26℃条件下进行培养10-15天，得到蝙蝠蛾拟青霉斜面菌种；所述斜面培养基由马铃薯1-3份、葡萄糖1-3份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、琼脂1-3份、水900-1100份配制而成；2）摇瓶菌种制备：将蝙蝠蛾拟青霉斜面菌种接入摇瓶培养基中，置于摇床上以160-200r/min震荡培养，培养温度25±1℃，培养时间2-4天，得到蝙蝠蛾拟青霉摇瓶菌种；所述摇瓶培养基由麸皮3-7份、葡萄糖1-3份、蛋白胨0.2-0.8份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、豆油0.02-0.06份、水90-110份配制而成；3）一级种子罐培养：将摇瓶菌种接入一级种子罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，保持罐压0.05Mpa，培养周期60-80小时，得到一级种本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于包括以下工艺步骤：1）斜面菌种制备：在无菌条件下进行分离蝙蝠蛾拟青霉并接种于斜面培养基，放置于恒温条件25℃‑26℃条件下进行培养10‑15天，得到蝙蝠蛾拟青霉斜面菌种；所述斜面培养基由马铃薯1‑3份、葡萄糖1‑3份、磷酸二氢钾0.05‑0.15份、硫酸镁0.01‑0.05份、琼脂1‑3份、水900‑1100份配制而成；2）摇瓶菌种制备：将蝙蝠蛾拟青霉斜面菌种接入摇瓶培养基中，置于摇床上以160‑200r/min震荡培养，培养温度25±1℃，培养时间2‑4天，得到蝙蝠蛾拟青霉摇瓶菌种；所述摇瓶培养基由麸皮3‑7份、葡萄糖1‑3份、蛋白胨0.2‑0.8份、磷酸二氢钾0.05‑0.15份、硫酸镁0.01‑0.05份、豆油0.02‑0.06份、水90‑110份配制而成；3）一级种子罐培养：将摇瓶菌种接入一级种子罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，保持罐压0.05Mpa，培养周期60‑80小时，得到一级种子罐发酵液；所述一级种子罐培养基由豆粕粉1‑3份、葡萄糖1‑3份、蛋白胨0.2‑0.8份、磷酸二氢钾0.05‑0.15份、硫酸镁0.01‑0.05份、消泡剂0.02‑0.06份、豆油0.04‑0.08份、水90‑110份配制而成；4）二级种子罐培养：将一级种子罐发酵液接种到二级种子罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，保持罐压0.05Mpa，培养周期50‑65小时，得到二级种子罐发酵液；所述二级种子罐培养基由豆粕粉1‑3份、葡萄糖1‑3份、蛋白胨0.2‑0.8份、磷酸二氢钾0.05‑0.15份、硫酸镁0.01‑0.05份、消泡剂0.02‑0.06份、豆油0.04‑0.08份、水90‑110份配制而成；5）发酵罐培养：将二级种子罐发酵液接入到发酵罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，接种率5%‑20%，保持罐压0.05Mpa，培养周期40‑60小时，还原糖显示低于0.5%，PH显示低于4时发酵成熟，得到蝙蝠蛾拟青霉菌丝体发酵液；所述发酵罐培养基由豆粕粉1‑3份、白糖1‑3份、葡萄糖1‑3份、蛋白胨0.2‑0.8份、磷酸二氢钾0.05‑0.15份、硫酸镁0.01‑0.05份、消泡剂0.02‑0.06份、豆油0.04‑0.08份、水90‑110份配制而成；6）板框过滤：将发酵完成的发酵液通过板框压滤机进行过滤，得到滤饼及滤液；7）滤液浓缩：将过滤好的滤液进行双效浓缩得到浓缩液，浓缩液通过喷雾干燥得到虫草胞外多糖粉；8）滤饼烘干：将滤饼烘干、粉碎、混合后获得虫草菌丝体。...

【技术特征摘要】
1.一种蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的生产方法，其特征在于包括以下工艺步骤：1）斜面菌种制备：在无菌条件下进行分离蝙蝠蛾拟青霉并接种于斜面培养基，放置于恒温条件25℃-26℃条件下进行培养10-15天，得到蝙蝠蛾拟青霉斜面菌种；所述斜面培养基由马铃薯1-3份、葡萄糖1-3份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、琼脂1-3份、水900-1100份配制而成；2）摇瓶菌种制备：将蝙蝠蛾拟青霉斜面菌种接入摇瓶培养基中，置于摇床上以160-200r/min震荡培养，培养温度25±1℃，培养时间2-4天，得到蝙蝠蛾拟青霉摇瓶菌种；所述摇瓶培养基由麸皮3-7份、葡萄糖1-3份、蛋白胨0.2-0.8份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、豆油0.02-0.06份、水90-110份配制而成；3）一级种子罐培养：将摇瓶菌种接入一级种子罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，保持罐压0.05Mpa，培养周期60-80小时，得到一级种子罐发酵液；所述一级种子罐培养基由豆粕粉1-3份、葡萄糖1-3份、蛋白胨0.2-0.8份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、消泡剂0.02-0.06份、豆油0.04-0.08份、水90-110份配制而成；4）二级种子罐培养：将一级种子罐发酵液接种到二级种子罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，保持罐压0.05Mpa，培养周期50-65小时，得到二级种子罐发酵液；所述二级种子罐培养基由豆粕粉1-3份、葡萄糖1-3份、蛋白胨0.2-0.8份、磷酸二氢钾0.05-0.15份、硫酸镁0.01-0.05份、消泡剂0.02-0.06份、豆油0.04-0.08份、水90-110份配制而成；5）发酵罐培养：将二级种子罐发酵液接入到发酵罐培养基中，温度控制25.5±1℃，通气量调节0.05v/v/min，接种率5%-20%，保持罐压0.05Mpa，培养周期40-60小时，还原糖显示低于0.5%，PH显示低于4时发酵成熟，得到蝙蝠蛾拟青霉菌丝体发酵液；所述发酵罐培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱盼盼，刘世柱，张必祥，叶强，吴力平，胡丽玲，
申请(专利权)人：浙江方格药业有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33