一种花生根际荧光假单胞菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株花生根际荧光假单胞菌及其应用，所述荧光假单胞菌命名为1502IPR‑01，保藏编号为CGMCC NO.16925。本发明专利技术的花生根际荧光假单胞菌1502IPR‑01为革兰氏染色阴性菌，无芽孢，具有很强的产铁载体能力，产生的铁载体具有较好的螯合难溶性铁的能力。荧光假单胞菌1502IPR‑01及其菌剂具有高产铁载体能力，显著提高花生新叶活性铁含量，改善花生的铁营养，产生生长素促进侧根系发育，改善根系构型，促进植株氮磷钾含量的提高，减少植株钠含量提高抗盐胁迫，明显促进花生生长，提高花生生物量及产量等多种促生功能。本发明专利技术的荧光假单胞菌1502IPR‑01在植物促生长方面有积极的作用。

A Rhizosphere Fluorescent Pseudomonas spp. from Peanut and Its Application

The invention discloses a peanut rhizosphere Pseudomonas fluorescens and its application. The Pseudomonas fluorescens is named 1502IPR 01 and its preservation number is CGMCC NO. 16925. The peanut rhizosphere fluorescent Pseudomonas sp. 1502IPR_01 is a Gram staining negative bacterium without spores, has a strong ability of producing iron carrier, and the iron carrier produced has a good ability of chelating insoluble iron. Pseudomonas fluorescens 1502IPR_01 and its fungicides have high capacity of producing iron carriers, which can significantly increase the active iron content in new leaves of peanut, improve iron nutrition of peanut, produce auxin to promote lateral root development, improve root architecture, promote the increase of nitrogen, phosphorus and potassium content of plant, reduce plant sodium content, increase salt stress, significantly promote peanut growth, increase biomass and yield of peanut, etc. Promoting function. The Pseudomonas fluorescens 1502IPR_01 of the invention has an active role in promoting plant growth.

【技术实现步骤摘要】
一种花生根际荧光假单胞菌及其应用
本专利技术属于微生物学和植物促生菌领域，具体地说，涉及一种具有高产铁载体、高溶铁能力、产生长素、促进侧根生长、改善植物铁营养及氮磷钾元营养，增强植物耐盐胁迫能力和促进植物生长的荧光假单胞菌及其应用。
技术介绍
铁是各种生物必需的元素之一，其参与生物体内重要代谢活动。植物的光合作用、呼吸作用、DNA合成等生理代谢过程都需要元素铁的参与。然而土壤中的铁大多以难溶态的氧化铁形式存在，其生物有效性低，特别是在石灰性土壤上，土壤pH高导致可溶性铁含量极低，因此在石灰性土壤上生长的植物易出现缺铁黄化症状。在我国北方石灰性土壤上，花生缺铁而导致的黄化症是一个限制其产量及品质的重要因素。目前，生产上主要通过选育铁高效利用品种，喷施铁肥来改善花生缺铁黄化，但是育种周期长，喷施硫酸亚铁等铁肥的效果也不佳。近年来，利用根际有益菌促进植物养分高效吸收及利用成为一个热点方向，其中之一就包括利用根际促生菌改善植物铁营养。荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)作为土壤中常见的一个细菌，尽管有报道其具有植物促生和增强植物抗逆的作用，主要集中在荧光假单胞菌具有良好的溶磷能力，能够促进植物体磷含量，从而促进植物生长。但目前为止，有关荧光假单胞菌改善花生铁元素及氮、钾元素的报道较少，具有高产产铁载体能力、产生长素，并对花生具有促生及改善铁、氮、磷、钾营养作用的荧光假单胞菌尚未有相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种具有高产铁载体、高溶铁能力、改善植物铁营养和促进植物生长、提高植物产量的荧光假单胞菌及其应用。为了实现本专利技术的目的，本专利技术的荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)是从花生根际土壤中分离得到，命名为1502IPR-01，以下简称为1502IPR-01。经16SrRNA基因序列分析，该菌株1502IPR-01为荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)。该菌株已于2018年12月11日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)，保藏号为CGMCCNo.16925。1502IPR-01菌株的菌落及菌体特征为：在LB培养基上30℃培养48h，菌落表面光滑，不透明，微黄色，边缘整齐。显微镜观察体形态特征为杆状，单细胞，革兰氏染色为阴性，无芽孢。该菌株的生理生化特征为：4℃生长，41℃不生长，荧光色素试验为阳性，脓青素为阴性，氧化酶阳性，反硝化为阳性，明胶液化阳性，葡萄糖利用实验阳性，果糖利用实验阳性。发酵上述的荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01，得到的发酵产物也属于本专利技术的保护范围。在本专利技术的实施例中，发酵采用的培养基为LB培养基。其组成为：酵母提取物5g；蛋白胨10g；氧化钠5g；加蒸馏水定容至1000mL；琼脂15-20g；pH＝7.0，121℃灭菌20min；发酵的条件为：温度为30℃，转速为200rpm。本专利技术提供了含有所述的荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物的菌剂。优选地，所述菌剂为植物促生菌、植物侧根促生长剂或植物铁营养改善剂。优选地，所述菌剂含有荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01的有效活菌数不小于1×108CFU/mL。本专利技术实验发现荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01具有高产铁载体，促进改善花生铁营养、花生增产中的作用。体现在促生菌制剂能够促进提高花生植株铁营养，促进侧根生长，提高养分吸收能力，提高植株生物量及产量。本专利技术提供了含有所述的荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物的生物肥料。本专利技术提供了荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物或含有其菌剂或生物肥料在提高植物铁含量、氮含量、磷含量或钾含量或改善铁、氮、磷或钾营养中的应用。本专利技术提供了荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物或含有其菌剂或生物肥料在降低植物钠含量或改善钠营养中的应用。本专利技术提供了荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物或含有其菌剂或生物肥料产生生长素，在促进植物根系发育，促进侧根生长，增加植物根系吸收面积，促进养分吸收能力中的应用。本专利技术提供了荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物或含有其菌剂或生物肥料在提高植物生物量及产量中的应用。本专利技术提供了荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物或含有其菌剂或生物肥料在高产铁载体中的应用。本专利技术提供了荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物或含有其菌剂或生物肥料在提高植物抗盐胁迫中的应用。所述盐为含Na离子的盐。优选地，上述应用中，所述的植物为花生。本领域技术人员可以理解，将本专利技术的1502IPR-01应用于其他作物的生长，也具有上述类似的促生作用。本专利技术的有益效果在于本专利技术从花生根际土壤中分离得到一株荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01,该菌株具有高产铁载体，改善铁营养，产生生长素，改善根系构型，提高花生生物量及产量等多种促生功能。首先，菌株1502IPR-01具有很强的产铁载体能力，产生的铁载体具有较好的螯合难溶性铁的能力。在盆栽试验中，能显著提高花生新叶活性铁、氮、磷、钾含量，改善花生的铁、氮、磷、钾营养。进而，菌株1502IPR-01能明显促进花生生长，提高花生生物量及产量。再者，菌株1502IPR-01能降低花生的钠含量，增强植株的抗盐胁迫能力。综上，菌株1502IPR-01不仅可以产生铁载体的能力，可以显著改善花生铁营养，同时对于花生具有良好的促生效果，且在应用过程中，无污染，无残留，生物环保，是一株在植物促生领域应用前景良好的促生菌株。附图说明图1：菌株1502IPR-01在蓝色CAS平板上形成橙色晕圈图。图2A-图2B：菌株1502IPR-01产生的铁载体验证图。图2A为菌株1502IPR-01产生铁载体定性验证图，图2B为菌株1502IPR-01铁载体产量图。图3A-图3B：菌株1502IPR-01铁载体溶解难溶性铁能力试验图。图3A为含不同浓度1502IPR-01铁载体溶液对难溶性铁溶解能力，编号1-5分别对应铁载体溶液添加量为0、20、200、500、1000μL。图3B为铁载体对难溶性氢氧化铁的溶出量。图4：IAA浓度标准曲线。图5：菌株1502IPR-01处理对花生盆栽的促生效果。左图为30天时CK及1502IPR-01处理花生长势。右图为100天时CK及1502IPR-01处理处理花生长势。图6：菌株15本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)1502IPR‑01，保藏编号为CGMCC NO.16925。

【技术特征摘要】
1.荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01，保藏编号为CGMCCNO.16925。2.权利要求1所述的荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01的发酵产物。3.含有权利要求1所述的荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物的菌剂。4.如权利3所述的菌剂，其特征在于，其为植物促生菌、植物侧根促生长剂或植物铁营养改善剂。5.如权利要求3或4所述的菌剂，其特征在于，含有荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01的有效活菌数不小于1×108CFU/mL。6.含有权利要求1所述的荧光假单胞菌(Pseudomonasfluorescens)1502IPR-01或其发酵产物的生物肥料。7.权利要求1所述的荧光假单胞菌(Pseudomonasf...

【专利技术属性】
技术研发人员：左元梅，李士芹，王天琪，王男麒，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11