一种生化试剂盒及其应用方法技术

本发明专利技术适用于生化技术领域，提供了一种生化试剂盒及其应用方法，该试剂盒包括：盒体以及存放于盒体中的试剂；试剂包括：浓度为5～40μM的试剂A，浓度为0.5～10μM的试剂B，浓度为500～50000units/mL的试剂C，浓度为1～10mM的试剂D，浓度为500～50000units/mL的试剂E，浓度为1～100μM的试剂F，浓度为500～50000units/mL的试剂G；和浓度为1～10μM的试剂H；试剂A为Cas12a和/或Cas9；试剂B为sgRNA；试剂C为聚合酶；试剂D为硫代核苷酸；试剂E为核酸外切酶；试剂F为含有分子标签序列的试剂；试剂G为酶制剂；试剂H为含有通用测序引物序列和酶的试剂。利用本发明专利技术的试剂对基因区域进行富集并构建基因文库，可较传统富集方式缩短3～5倍的时间，富集区域的局限性小，且操作简便，试剂成本较低。

A Biochemical Kit and Its Application

The invention is applicable to the field of biochemical technology, and provides a biochemical kit and its application method. The kit includes: kit body and reagents stored in the kit body; reagents include reagent A with concentration of 5-40 um, reagent B with concentration of 0.5-10 um, reagent C with concentration of 500-50 000 units/mL, reagent D with concentration of 1-10 mM, reagent E with concentration of 500-50 000 units/mL, and reagent E with concentration of 500-50 000 units/mL. Reagent F with a concentration of 500-50000 units/mL and reagent H with a concentration of 1-10 mu M; reagent A with Cas12a and/or Cas9; reagent B with sgRNA; reagent C with polymerase; reagent D with thionucleotide; reagent E with nucleic acid exonuclease; reagent F with molecular label sequence; reagent G with enzyme; reagent H with universal sequencing primer sequence and enzyme Reagent. Using the reagent of the invention to enrich the gene region and construct the gene library can shorten the time of enrichment by 3 to 5 times compared with the traditional enrichment method. The limitation of the enrichment region is small, the operation is simple and the cost of the reagent is low.

【技术实现步骤摘要】
一种生化试剂盒及其应用方法
本专利技术属于生化
，尤其涉及一种生化试剂盒及其应用方法。
技术介绍
生物基因组大多数都很复杂且碱基数目巨大，比如人类基因组有30亿个碱基，其中基因区域只占其中的1-2％，研究通常是对这些基因区域进行研究，所以基因区域的富集技术则应运而生。现有的基因区域富集技术多采用基因杂交捕获的方式，但是，这种杂交捕获技术的杂交时间长达4-24小时，并且仅适用于短基因区域(总长度小于或等于24kb的连续/非连续区域)；且在对这些基因区域进行富集时通常需要用到修饰有生物素的探针、杂交反应液和封闭试剂，整个富集的操作过程复杂且成本相对较高。由此可见，现有的基因富集技术存在杂交时间长、富集区域局限性大、且操作复杂成本高的问题。
技术实现思路
本专利技术实施例提供一种生化试剂盒，旨在解决现有的基因富集技术存在杂交时间长、富集区域局限性大、且操作复杂成本高的问题。本专利技术实施例是这样实现的，一种生化试剂盒，包括盒体以及存放于所述盒体中的试剂；所述试剂包括：浓度为5～40μM的试剂A，浓度为0.5～10μM的试剂B，浓度为500～50000units/mL的试剂C，浓度为1～1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生化试剂盒，其特征在于，包括盒体以及存放于所述盒体中的试剂；所述试剂包括：浓度为5～40μM的试剂A，浓度为0.5～10μM的试剂B，浓度为500～50000units/mL的试剂C，浓度为1～10mM的试剂D，浓度为500～50000units/mL的试剂E，浓度为1～100μM的试剂F，浓度为500～50000units/mL的试剂G；和浓度为1～10μM的试剂H；所述试剂A为Cas12a和/或Cas9；所述试剂B为sgRNA；所述试剂C为聚合酶；所述试剂D为硫代核苷酸；所述试剂E为核酸外切酶；所述试剂F为含有分子标签序列的试剂；所述试剂G为酶制剂；所述试剂H为含有通用测序引物序列...

【技术特征摘要】
1.一种生化试剂盒，其特征在于，包括盒体以及存放于所述盒体中的试剂；所述试剂包括：浓度为5～40μM的试剂A，浓度为0.5～10μM的试剂B，浓度为500～50000units/mL的试剂C，浓度为1～10mM的试剂D，浓度为500～50000units/mL的试剂E，浓度为1～100μM的试剂F，浓度为500～50000units/mL的试剂G；和浓度为1～10μM的试剂H；所述试剂A为Cas12a和/或Cas9；所述试剂B为sgRNA；所述试剂C为聚合酶；所述试剂D为硫代核苷酸；所述试剂E为核酸外切酶；所述试剂F为含有分子标签序列的试剂；所述试剂G为酶制剂；所述试剂H为含有通用测序引物序列和酶的试剂。2.如权利要求1所述的生化试剂盒，其特征在于，所述试剂B为由sgDNAoligos经过转录而成的sgRNA混合物。3.如权利要求1所述的生化试剂盒，其特征在于，所述试剂C为KlenowFragment(3'→5'exo-)和/或DNA聚合酶I。4.如权利要求1所述的生化试剂盒，其特征在于，所述试剂D为1-Thio-2'-Deoxyadenosine-5'-Triphosphate,1-Thio-2'-Deoxycytidine-5'-Triphosphate,1-Thio-2'-Deoxyguanosine-5'-Triphosphate,1-Thio-2'-Deoxythymidine-5'-Triphosphate中的其中一种或其任意组合的混合物。5.如权利要求1所述的生化试剂盒，其特征在于，所述试剂E为T7核酸外切酶、T5核酸外切酶、RecJf核酸外切酶、核酸外切酶VII、核酸外切酶V、Lambda核酸外切酶、核酸外...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗俊峰，陈苗苗，杨继伟，刘香琼，欧阳虎，陈云弟，
申请(专利权)人：阅尔基因技术苏州有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32