Cells with increased protein production are provided, characterized by the inclusion of modified SUMO cells, methods for producing such cells or expression systems, and the use of such cells in producing target proteins.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】真菌的高水平蛋白质生产系统相关申请的交叉引用本申请要求于2016年2月22日提交的美国临时申请号62/298,351的权益，该临时申请通过引用以其全文结合在此。
本专利技术属于能够生产高水平的蛋白质的蛋白质生产系统、更具体地真菌的生产系统的领域。本专利技术是基于SUMO化的修饰导致蛋白质生产增加的发现。本专利技术使这些突变的真菌系统适合工业中的蛋白质生产。序列表与本文一起以电子方式提交的处于ASCII文本形式的序列表(文件名：NB36013WOPCT_SEQLIST_ST25.txt；大小143,201字节；以及创建日期：2017年2月22日)的内容形成说明书的一部分并且通过引用以其全文结合在此。
技术介绍
在工业应用中使用的酶的生产是不断增长的市场，这是由从基于化石的经济转向基于生物技术的经济的需求所驱动的。对这些酶的日益增长的需求使酶生产的成本成为重要的花费。酶生产成本的降低要求探索新颖的酶，连同用于高产量生产过程的可靠方法。为了建立成本效益好的的酶生产过程，高水平的蛋白质生产和分泌是关键要求。真菌已被用作用于生产各种酶的宿主。属于但不限于金孢子菌属(Chry...
【技术保护点】
1.一种具有增加的蛋白质生产的经修饰的细胞，其中所述细胞已被修饰以导致改变的SUMO化。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.02.22 US 62/298,3511.一种具有增加的蛋白质生产的经修饰的细胞，其中所述细胞已被修饰以导致改变的SUMO化。2.如权利要求1所述的经修饰的细胞，其中该蛋白质生产的增加是与缺乏SUMO化修饰的亲本细胞的总蛋白质生产相比，整体蛋白质生产增加至少1.1倍。3.如权利要求1所述的经修饰的细胞，其中该蛋白质生产的增加是与由缺乏SUMO化修饰的亲本细胞生产所述蛋白质相比，目的蛋白质生产增加至少1.1倍。4.如权利要求1-3中任一项所述的经修饰的细胞，其中该细胞已通过遗传修饰进行修饰以导致改变的SUMO化。5.如权利要求4所述的经修饰的细胞，其中该遗传修饰是点突变、插入和/或缺失。6.如权利要求4或权利要求5所述的经修饰的细胞，其中该遗传修饰是靶向遗传修饰。7.如权利要求1-6中任一项所述的经修饰的细胞，其中SUMO化已通过对编码SUMO化机器的内源性蛋白质的至少一个基因的遗传修饰而被修饰。8.如权利要求7所述的经修饰的细胞，其中该遗传修饰是表达调控序列或编码序列的修饰。9.如前述权利要求中任一项所述的经修饰的细胞，其中SUMO化已通过减少Ubc9生产和/或活性来修饰。10.如权利要求9所述的经修饰的细胞，其中Ubc9已经被位于ubc9基因的启动子序列中的基因破坏来修饰。11.如权利要求9或10中任一项所述的经修饰的细胞，其中该ubc9基因具有与SEQIDNO:1[嗜热毁丝霉(M.thermophila)的Ubc9]具有至少50％序列同一性的野生型对应物。12.如权利要求9或10所述的经修饰的细胞，其中该ubc9基因具有编码蛋白质的野生型对应物，该蛋白质包含与以下序列基序的一个或多个具有至少75％序列同一性的序列：RLQEERKQWRKDHPFGF(SEQIDNO:42)和KPPKCKFTPPLFHPNVYPSGTVCLSIL(SEQIDNO:43)。13.如权利要求1-12中任一项所述的经修饰的细胞，其中该细胞是真菌细胞，优选是丝状真菌细胞，更优选是选自由以下组成的组的属的真菌细胞：金孢子菌属(Chrysosporium)、梭孢壳属(Thielavia)、脉孢菌属(Neurospora)、短梗霉属(Aureobasidium)、线黑粉菌属(Filibasidium)、单鞭毛菌属(Piromyces)、棒囊壳属(Corynascus)、隐球菌属(Cryptococcus)、支顶孢属(Acremonium)、弯颈霉属(Tolypocladium)、柱顶孢霉(Scytalidium)、裂褶菌属(Schizophyllum)、孢子丝菌属(Sporotrichum)、青霉菌属(Penicillium)、赤霉菌属(Gibberella)、毁丝霉属(Myceliophthora)、毛霉菌属(Mucor)、曲霉属(Aspergillus)、镰刀菌属(Fusarium)、腐质霉属(Humicola)、木霉属(Trichoderma)、踝节菌属(Talaromyces)和Rasamsonia。14.如权利要求13所述的经修饰的细胞，其中该细胞是或衍生自嗜热毁丝霉。15.如权利要求14所述的经修饰的细胞，其中该细胞是或衍生自选自由以下组成的组的菌株：C1(在登录号VKMF-3500D下保藏在俄罗斯科学院的全俄微生物保藏中心的国际保藏机构)、UV18-25(在登录号VKMF-3631D下保藏于VKM)、UV18#100f(在登录号CBS122188下保藏于CBS)、W1L(在登录号CBS122189下保藏于CBS)和W1L#100L(在登录号CBS122190下保藏于CBS的菌株)。16.如权利要求13所述的经修饰的细胞，其中该细胞是或衍生自里氏木霉(Trichodermareesei)。17.如权利要求13所述的经修饰的细胞，其中该细胞是或衍生自黑曲霉(Aspergillusniger)。18.如权利要求1-17中任一项所述的经修饰的细胞，其中该细胞进一步包含编码至少一种目的蛋白质的外源表达构建体。19.如权利要求12所述的经修饰的细胞，其中该目的蛋白质是异源蛋白质。20.如权利要求18或19中任一项所述的经修饰的细胞，...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·A·布鲁克霍夫，JP·迈纳恩，C·B·迈克尔斯，I·A·范德布格特，J·维瑟，J·H·维瑟，
申请(专利权)人：丹尼斯科美国公司，
类型：发明
国别省市：美国,US
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