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耐热磷酸化酶及其应用制造技术

技术编号:20787069 阅读:42 留言:0更新日期:2019-04-06 05:42
本发明专利技术涉及耐热磷酸化酶及其用途。该耐热磷酸化酶具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。该耐热磷酸化酶可以有效用于甘油葡糖苷的催化合成,酶活力高,制备甘油葡糖苷时酶用量较小,生产成本较低,且甘油葡糖苷的产量较高。

【技术实现步骤摘要】
耐热磷酸化酶及其应用
本专利技术涉及生物
,具体地,本专利技术涉及耐热磷酸化酶及其应用,更具体地,本专利技术涉及耐热蔗糖磷酸化酶、分离的核酸、构建体、微生物、全细胞催化剂以及甘油葡糖苷的制备方法。
技术介绍
甘油葡糖苷是一种由甘油分子与葡萄糖分子以糖苷键结合的物质。它是一种天然细胞激活剂,常用作化妆品原料,具有以下功能:能保护细胞膜和细胞结构不变性、不受损伤;具有优异的锁水能力,在极度干燥的环境中细胞中依然有水存;分子量小,易吸收。目前制备甘油葡糖苷的方法主要包括化学合成和酶催化合成法。2000年,日本TakenakaF.等鉴定了日本清酒中3种不同构型的甘油葡糖苷,并通过化学合成的方法实现这3种物质的化学合成(BiosciBiotechnolBiochem,2000,64:378-385)。然而,化学合成方法具有高污染、高能耗、制备工艺复杂等缺点。专利WO2008034158公开了一种利用蔗糖磷酸化酶(SPase)催化蔗糖和甘油转化为甘油葡糖苷的酶催化合成方法,在0.3M蔗糖、2.0M甘油、20U/mL酶、pH7.0、7.5h反应条件下,甘油葡糖苷产物浓度约0.29M,即产量约本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种耐热磷酸化酶,其特征在于,具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种耐热磷酸化酶,其特征在于,具有SEQIDNO:2所示的氨基酸序列。2.一种分离的核酸,其特征在于,具有SEQIDNO:1所示的核苷酸序列。3.一种构建体,其特征在于,携带权利要求2所述的分离的核酸。4.根据权利要求3所述的构建体,其特征在于,所述构建体的载体为pET-28A。5.一种微生物,其特征在于,所述微生物携带权利要求2所述的分离的核酸或权利要求3或4所述构建体。6.根据权利要求5所述的微生物,其特征在于,所述微生物为大肠杆菌;任选地,所述微生物为大肠杆菌BL21。7.一种全细胞催化剂,其特征在于,包括权利要求5或6所述的微生物;任选地,所述全细胞催化剂是通过如下方式制备得到的:在适合微生物增殖的条件下,将权利要求5~6任一项所述的微生物进行预培养和发酵处理,将发酵处理产物进行离心处理,以便获得离心沉淀物,所述离心沉淀物构成所述全细胞催化剂;任选地,所述预培养和发酵处理是在温度28~35℃、转速为200~250rpm的条件下进行的;任选地,所述预培养处理的时间为15~25小时;任选地,所述预培养处理后,菌液的OD600nm为20~25;任选地,所述发酵处理的时间为45~55小时;任选地,在预培养处理中,培养基包括:1.5~2.5%的酵母浸粉、0.3~0.8%的蛋白胨、0.05~0.15%的氯化钠、0.003~0.008%的七水硫酸镁、0.03~0.08%的磷酸二氢钾、0.10~0.20%的磷酸氢二钠、0.20~0.30%的蔗糖、0.001~0.003%的氯化钙、...

【专利技术属性】
技术研发人员:王洪钟黄爱清
申请(专利权)人:清华大学
类型:发明
国别省市:北京,11

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