一种红松松针精油及其提取方法和在抑菌培养基中的应用技术

本发明专利技术提供了一种红松松针精油及其提取方法和在抑菌培养基中的应用，属于植物精油提取技术领域。红松松针精油，包括游离氨基酸和化合物；所述游离氨基酸含量为244.44mg/kg；以红松松针精油的质量为100％计，化合物占97.92％，其中烯烃类占87.97％，醇类占3.7％，酯类占5.77％，氧化物类占0.24％，酮类占0.14％和二萜类化合物占0.1％。采用提取方法得到的红松松针精油，共提取46种化合物，与以往报道相比，大大增加红松松针精油中化合物种类。红松松针精油作为杀菌剂添加到培养基中，降低培养基的染菌率。

【技术实现步骤摘要】
一种红松松针精油及其提取方法和在抑菌培养基中的应用
本专利技术属于植物精油提取
，具体涉及一种红松松针精油及其提取方法和在抑菌培养基中的应用。
技术介绍
植物的组织培养被应用在很多学科，如，植物学，细胞生物学，植物生理学，植物遗传育种等。植物组织培养以外植体诱导产生愈伤组织，通过悬浮培养愈伤组织细胞，使其大量增殖后，直接用于提取化合物。愈伤组织的诱导过程中，外植体的染菌率是实验中较难控制的问题。除能够熟练掌握无菌操作环节和器具器材与培养基充分灭菌外，在培养基中添加杀菌剂，会成为阻断外植体染菌率的一个重要手段。培养基本身要经过超高温灭菌，这本身会破坏大部分杀菌剂的功效，导致不断寻求新的能用在培养基中的杀菌剂。植物精油是萃取植物特有的芳香物质，取自于草本植物的花、叶、根、树皮、果实、种子、树脂等以蒸馏、压榨方式提炼出来的。植物精油是经高温蒸汽提取，因此高温不会破坏其原有性能。红松(Pinuskoraiensis)为松科(Pinaceae)松属的常绿乔木，是国家Ⅱ级重点保护野生植物，分布广，是东北地区主要的森林树种之一。红松松针中含有挥发油类、粗蛋白及氨基酸、色素及其维生素类、粗脂肪和微量元素、脂肪酸、色原酮、幽醇、普类、黄酮、菇类等化学成分。有很多不饱和脂肪酸可以降低胆固醇、软化血管、预防动脉硬化，调节内分泌。植物挥发油(精油)是从植物的花、茎、叶等部位提取的，可随水蒸气蒸馏，且具有一定气味的挥发性油状液体物质的总称。实验表明松针精油具有镇痛抗炎、止咳、祛痰及平喘作用，并有抗氧化、杀虫作用，还具有抗癌、抑制血栓、治疗痛经等其他生物活性。松针提取的挥发油可以制作精油香皂、香水、美发香波、护肤品、糖果、糕点、饮品、松针牙膏、香薰等各种食品和家居用品中。国外学者对欧洲赤松、欧洲黑松、意大利五叶松、地中海白松等松针的挥发油化学成分及生物活性进行研究。国内研究比较多是马尾松、杜松、拉雅松、黑皮油松、雪松等松针挥发油的化学成分，而关于红松松针提取的挥发油进行氨基酸组分和化学成分的研究报道比较少。经过查阅文献，段辉等研究了甘肃油松针叶氨基酸成分含量因地区而不同，胡居吾等研究了雪松松针中游离氨基酸代谢对环境氮的响应。红松松针方面的研究主要有：樊梓鸾以红松松针精油为研究对象，研究了红松松针精油的抗氧化和抑菌活性；佟立君研究了红松松针挥发油的提取与组分，分析出21种成分；宗芳芳对红松壳挥发油成分进行研究，鉴定出17种成分。然而目前还有没有关于红松松针精油较为全面的提取分析方法。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种红松松针精油及其提取方法和在抑菌培养基中的应用，采用本专利技术提供的提取方法能够提取多种成分，并且提取得到的红松松针精油具有较高的抑菌性能。本专利技术提供的一种红松松针精油的提取方法，包括以下步骤：1)将红松松针粉用水浸泡，得到松针料液；2)将步骤1)中所述松针料液在110～130℃条件下蒸馏3～5h，得到油水混合液；3)将步骤2)中所述油水混合液和NaCl溶液混合，将油水分离，收集油相得到红松松针精油。优选的，步骤2)中蒸馏的速度为2～3滴/s。优选的，步骤2)中蒸馏的时间为4h。优选的，步骤3)中油水混合液和NaCl溶液的体积比为4：0.8～1.2；所述NaCl溶液的质量浓度为2％～3％。优选的，步骤3)中油水分离依次包括用分液漏斗分液和无水硫酸钠除水；所述无水硫酸钠除水的方法包括将经过分液漏斗分液后收集的油相和无水硫酸钠混合，结晶，离心，收集油相；所述离心的转速为13000rpm，所述离心的时间为3min。优选的，步骤1)中红松松针粉的质量和水的体积比为240～260g：1500ml。本专利技术提供了所述的提取方法提取得到的红松松针精油，包括游离氨基酸和化合物；所述游离氨基酸含量为244.44mg/kg；以红松松针精油的质量为100％计，化合物占97.92％，其中烯烃类占87.97％，醇类占3.7％，酯类占5.77％，氧化物类占0.24％，酮类占0.14％和二萜类化合物占0.1％。优选的，所述游离氨基酸包括以下浓度的氨基酸：6.89mg/kg天冬氨酸，1.76mg/kg谷氨酸，33.11mg/kg胱氨酸，5.05mg/kg丝氨酸，1.25mg/kg甘氨酸，34.28mg/kg组氨酸，16.99mg/kg精氨酸，8.44mg/kg苏氨酸，1.65mg/kg丙氨酸，1.4mg/kg脯氨酸，29.14mg/kg酪氨酸，1.23mg/kg缬氨酸，18.5mg/kg蛋氨酸，5.2mg/kg异亮氨酸，10.81mg/kg亮氨酸，4.71mg/kg苯丙氨酸和64.03mg/kg赖氨酸。优选的，以红松松针精油的质量为100％计，所述烯烃类包括以下质量百分含量的组分：0.62％1,7,7-三甲基三环[2.2.1.02,6]庚烷，13.96％1,3,3-三甲基三环[2.2.1.02,6]庚烷，4.78％樟脑萜，0.31％桧烯，2.41％β-蒎烯，3.4％β-月桂烯，7.36％3-蒈烯，0.64％α-萜品烯，8.46％d-柠檬烯，1.05％3-亚甲基-6-(1-甲基乙基)环己烯，0.05％罗勒烯，0.27％γ-萜品烯，8.53％4-蒈烯，0.29％α-蒎烯，0.1％长叶烯，7.55％1-石竹烯，0.24％毕澄茄烯，0.12％香橙烯，0.11％α-荜澄茄油烯，0.11％反式-β-金合欢烯，1.39％α-石竹烯，0.17％毕澄茄烯，0.2％δ-杜松烯，14.38％大根香叶烯D，2.59％大根香叶烯B，0.28％α-蒎烯，4.15％δ-杜松烯，0.1％β--杜松烯，0.15％1,2,3,4,7-六氢化-1,6-二甲基-4-(1-甲基乙基)萘，0.22％α-衣兰油烯，0.15％α-柏木烯和3.83％γ-杜松烯；所述醇类包括以下质量百分含量的组分：0.07％(S)-芳樟醇，0.35％2-莰醇，0.19％4-萜烯醇，0.19％α-松油醇，0.45％1-羟基-1,7二甲基-4-异丙基-2,7-环癸二烯，0.07％(-)-蓝桉醇，0.07％库贝醇和2.31％α-毕橙茄醇；所述酯类包括以下质量百分含量的含量组分：5.33％乙酸冰片酯和0.44％乙酸松油酯；所述氧化物类包括以下质量百分含量的组分：0.11％石竹素和0.13％环氧化蛇麻烯II；所述酮类为0.14％2-甲氧基-4-甲基-1-(1-甲基乙基)苯；所述二萜类化合物为0.1％西柏烯。本专利技术提供了所述的红松松针精油在抑菌培养基中的应用。本专利技术提供了所述的提取方法提取得到的红松松针精油，包括游离氨基酸和化合物；所述游离氨基酸含量为244.44mg/kg；以红松松针精油的质量为100％计，化合物占97.92％，其中烯烃类占87.97％，醇类占3.7％，酯类占5.77％，氧化物类占0.24％，酮类占0.14％，酯类占5.77％和二萜类化合物占0.1％。本专利技术提供的红松松针精油，经检测得到游离氨基酸17种，其中包括8种人体必需的氨基酸中的7种；同时化合物占挥发油总量的97.92％，说明本专利技术提供的红松松针精油纯度较高，并且化合物种类包括46种，与以往研究报道相比，大大提高了红松松针精油中化合物的种类数量。同时本专利技术提供的红松松针精油作为杀菌剂添加到培养基中，大大降低培养基的染菌率。实验证明：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种红松松针精油的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将红松松针粉用水浸泡，得到松针料液；2)将步骤1)中所述松针料液在110～130℃条件下蒸馏3～5h，得到油水混合液；3)将步骤2)中所述油水混合液和NaCl溶液混合，将油水分离，收集油相得到红松松针精油。

【技术特征摘要】
1.一种红松松针精油的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将红松松针粉用水浸泡，得到松针料液；2)将步骤1)中所述松针料液在110～130℃条件下蒸馏3～5h，得到油水混合液；3)将步骤2)中所述油水混合液和NaCl溶液混合，将油水分离，收集油相得到红松松针精油。2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤2)中蒸馏的速度为2～3滴/s。3.根据权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于，步骤2)中蒸馏的时间为4h。4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤3)中油水混合液和NaCl溶液的体积比为4：0.8～1.2；所述NaCl溶液的质量浓度为2％～3％。5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤3)中油水分离依次包括用分液漏斗分液和无水硫酸钠除水；所述无水硫酸钠除水的方法包括将经过分液漏斗分液后收集的油相和无水硫酸钠混合，结晶，离心，收集油相；所述离心的转速为13000rpm，所述离心的时间为3min。6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，步骤1)中红松松针粉的质量和水的体积比为240～260g：1500ml。7.权利要求1～6任意一项所述的提取方法提取得到的红松松针精油，其特征在于，包括游离氨基酸和化合物；所述游离氨基酸含量为244.44mg/kg；以红松松针精油的质量为100％计，所述化合物占97.92％，其中烯烃类占87.97％，醇类占3.7％，酯类占5.77％，氧化物类占0.24％，酮类占0.14％，和二萜类化合物占0.1％。8.根据权利要求7所述的红松松针精油，其特征在于，所述游离氨基酸包括以下浓度的氨基酸：6.89mg/kg天冬氨酸，1.76mg/kg谷氨酸，33.11mg/kg胱氨酸，5.05mg/kg丝氨酸，1.25mg/kg甘氨酸，34.28mg/kg组氨酸，16.99mg/kg精氨酸，8.44mg/kg苏氨酸，1.65mg/kg丙氨酸，1.4mg/kg脯氨酸，29.14mg/kg酪氨酸，1.23mg/kg缬氨酸，...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵学丽，舒钰，王丹，隋晓东，王钰婷，郭学田，刘红霞，栾春梅，高子为，
申请(专利权)人：黑龙江省林业科学研究所，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23