一种氟乙酰胺半抗原及单克隆抗体的制备方法与应用技术

本发明专利技术涉及生物化工技术领域，具体公开了一种氟乙酰胺半抗原及单克隆抗体的制备方法与应用。本发明专利技术以氟乙酸乙脂、对氨基苯乙酸为主要原料，合成氟乙酰胺半抗原；用活泼脂法将其与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)或血蓝蛋白(KLH)偶联制备偶联物。经试验验证表明，本发明专利技术制得的偶联物可使生物体产生针对氟乙酰胺的抗体，即所制得的偶联物为一种氟乙酰胺人工抗原。本发明专利技术所制备的氟乙酰胺人工抗原适合用于氟乙酰胺的酶联免疫分析。

【技术实现步骤摘要】
一种氟乙酰胺半抗原及单克隆抗体的制备方法与应用
本专利技术涉及生物化工
，具体地说，涉及一种氟乙酰胺半抗原及单克隆抗体的制备方法与应用。
技术介绍
氟乙酰胺(fluoroacetamide)，又称2-氟乙酰胺、敌蚜胺、邱氏灭鼠药。纯品为无味、无臭白色针状结晶或白色粉末，易溶于水(1:5)，在酸性、中性水溶液中水解为氟乙酸(fluoroaceticacid)，在碱性水溶液中水解为氟乙酸钠(sodiumfluoroacetate)。制作工艺简单，由氯乙酰胺氟化而得。氟乙酰胺可通过皮肤、呼吸道和消化进入体内，造成中毒事件，若抢救不及时引发死亡，影响三磷酸腺苷的生成以及中间产物代谢过程，生成的氟乙酰和氟柠檬酸可造成心、脑、肺、肝等多脏器的损伤，氟乙酰胺阻止三羧酸循环的过程又导致高活性氧自由基激增，ATP生成的减少，细胞膜结构松散，电子结构不稳定，因此，极容易被氧自由基夺去电子，所以细胞膜容易被自由基攻击。由于其强神经毒性，且具有二次带毒现象，对大白鼠急性口服致死中量(LD50)，氟乙酰胺为5.3mg/kg，氟乙酸钠为0.22mg/kg，还易被皮肤吸收，又无警戒性，且易造成二次中毒。猫吃本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氟乙酰胺半抗原，其特征在于，分子结构式如式(I)所示：

【技术特征摘要】
1.一种氟乙酰胺半抗原，其特征在于，分子结构式如式(I)所示：其中，A选自苯环或(CH2)n；n＝1～20。2.一种氟乙酰胺抗原，其特征在于，由权利要求1所述的氟乙酰胺半抗原与载体蛋白偶联得到，所述载体蛋白为血蓝蛋白或牛血清白蛋白。3.权利要求2所述的氟乙酰胺抗原的制备方法，其特征在于，采用活泼酯法将载体蛋白偶联于权利要求1所述氟乙酰胺半抗原的羧基碳上。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：(1)将权利要求1所述的氟乙酰胺半抗原溶解于二甲基甲酰胺中，得到半抗原溶液；(2)在上述半抗原溶液中，加入二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，搅拌反应；(3)将载体蛋白溶于PBS缓冲液中，得到蛋白溶液；(4)将步骤(2)的液相逐滴加入到步骤(3)制备的蛋白溶液中，边滴加边搅拌；作为优选，具体包括如下步骤：(1)称取50mg权利要求1所述的氟乙酰胺半抗原溶解于1mL二甲基甲酰胺中，得到半...

【专利技术属性】
技术研发人员：王战辉，沈建忠，温凯，江海洋，杨玲，史为民，张西亚，张素霞，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11