【技术实现步骤摘要】
一种线粒体定位导肽及其发现方法与应用
本专利技术属于医学领域，涉及线粒体定位导肽及其发现方法与应用。
技术介绍
真核生物与原核生物最大的区别是真核生物的细胞发展出了复杂的细胞器体系。细胞器是细胞中通过生物膜与细胞中其他部分分隔开来的、功能上独立的亚细胞结构。细胞器可按各自拥有膜的层数大致分为三类：双层膜内共生体细胞器主要包括线粒体、细胞核、叶绿体等；单层膜细胞器主要包括内质网、高尔基体、液泡、溶酶体及过氧化物酶体等；无膜细胞器主要包括核糖体、中心体及穹窿体等。这些细胞器组成了细胞的基本结构，使真核细胞能正常的工作、运转。线粒体(mitochondrion)是一种存在于大多数真核细胞中的由两层膜包被的细胞器，是细胞中制造能量的细胞器，也是细胞进行有氧呼吸的主要场所，其直径在0.5到1.0微米左右。大多数真核细胞或多或少都拥有线粒体，但它们各自拥有的线粒体在大小、数量及外观等方面上都有所不同，如肝脏细胞中有1000-2000个线粒体。线粒体拥有自身的遗传物质和遗传体系，但其基因组大小有限，是一种半自主细胞器，线粒体基因组属于母系遗传。除了为细胞供能外，线粒体还参与诸如...
【技术保护点】
1.一种线粒体定位导肽，所述的导肽选自如下序列：(a)由SEQ ID NO.l所示的氨基酸序列组成的多肽：(b)由SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列前31至前185位中任意整数个数氨基酸组成的多肽：(c)由SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列第31至第185位发生插入、删除和/或取代突变组成的多肽：(d)由SEQ ID NO.l所示的氨基酸序列上下游独立或共同减少1个、2个或3个氨基酸组成的多肽：(e)将SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有线粒体定位导肽功能的衍生多肽；(f)由SEQ ID NO.l所示的氨基酸...
【技术特征摘要】
1.一种线粒体定位导肽，所述的导肽选自如下序列：(a)由SEQIDNO.l所示的氨基酸序列组成的多肽：(b)由SEQIDNO.3所示的氨基酸序列前31至前185位中任意整数个数氨基酸组成的多肽：(c)由SEQIDNO.3所示的氨基酸序列第31至第185位发生插入、删除和/或取代突变组成的多肽：(d)由SEQIDNO.l所示的氨基酸序列上下游独立或共同减少1个、2个或3个氨基酸组成的多肽：(e)将SEQIDNO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有线粒体定位导肽功能的衍生多肽；(f)由SEQIDNO.l所示的氨基酸序列C段融合1-50个氨基酸残基组成的多肽：(g)由SEQIDNO.l所示的氨基酸序列保持至少两个带正电的氨基酸不变的突变体组成的多肽：(h)由SEQIDNO.l所示的氨基酸序列保持至少两个带正电的氨基酸并且疏水氨基酸比例大于35.9％的突变体组成的多肽：(i)由SEQIDNO.l所示的氨基酸序列保持至少两个带正电的氨基酸并且α螺旋比例大于30.56％的突变体组成的多肽：(j)由SEQIDNO.7-SEQIDNO.18中任一条所示的氨基酸序列组成的多肽。2.一种融合蛋白，所述融合蛋白包括如权利要求1所述的线粒体定位导肽和目标蛋白，所述线粒体定位导肽位于所述目标蛋白的N端；可选地，所述目标蛋白是荧光蛋白，优选，所述目标蛋白是绿色荧光蛋白。3.一种基因序列，所述基因序列编码权利要求1所述的线粒体定位导肽的基因序列或权利要求2所述的融合蛋白的基因序列；可选，所述基因序列选自SEQIDNO.2、SEQIDNO.4、SEQIDNO.5和SEQIDNO.6。4.一种重组表达载体，所述重组表达载体含有权利要求3所述的基因序列。5.一种宿主细胞，所述宿主细胞含有如权利要求4所述的重组表达载体。6.一种权利要求1所述的线粒体定位导肽、权利要求2所述的融合蛋白、权利要求3所述的基因序列、如权利要求4所述的重组表达载体或如权利要求5所述的宿主细胞在将目标蛋白定位于线粒体中的应用。7.一种将目标蛋白定位于线粒体的方法，其特征在于包括以下步骤：(a)将权利要求3所述的融合蛋白的基因导入靶细胞中，从而将所述目标蛋白定位于所述靶细胞的线粒体上；所述融合基因自上游至下游依次包括编码导肽的基因序列和编码目标蛋白的基因序列；或(b)将如权利要求2所述的融合蛋白加入靶细胞生长环境中，从而使目标蛋白跨过靶细胞的细胞膜进入所述靶细胞中，并最终定位于靶细胞的线粒体上；所述外源融合蛋白自N端至C端依次包...
【专利技术属性】
技术研发人员：夏立群，鲁义善，汪志文，陈建林，
申请(专利权)人：广东海洋大学，广东海洋大学深圳研究院，
类型：发明
国别省市：广东,44
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