一种用于单细胞拉曼测量和激光显微切割的一体化分选装置制造方法及图纸

本发明专利技术提供了一种单细胞拉曼测量与激光显微切割一体化的分选装置，包括细胞点样芯片、拉曼测量和激光显微切割薄膜以及细胞回收芯片；拉曼测量和激光显微切割薄膜用于固定细胞样品，并对其上单细胞进行拉曼测量和激光切割分选；细胞点样芯片贴合固定于拉曼测量和激光显微切割薄膜正面，通过细胞点样芯片上的微通孔进行细胞样品的点样；细胞回收芯片位于拉曼测量和激光显微切割薄膜背面正下方，通过芯片上的微柱结构粘附回收经切割分离的单细胞。本发明专利技术可实现对细胞的拉曼测量和激光切割分选；采用微柱粘附回收结构定向回收目标细胞，并在微井中直接实现细胞裂解及基因组扩增操作，实现了单细胞拉曼测量与激光显微切割分选的一体化耦合。

【技术实现步骤摘要】
一种用于单细胞拉曼测量和激光显微切割的一体化分选装置
本专利技术涉及单细胞分析及分选
，具体涉及一种实现单细胞拉曼测量与激光显微切割相耦合的一体化分选装置。
技术介绍
从非均匀细胞群体或异质性样本混合物，比如组织样本、血液、精液样本、环境取样微生物样本中，表征并分离特定的少量细胞甚至单个细胞具有十分重要的研究意义。据此目的发展的激光捕获显微切割技术正是这样一种样品制备技术。其原理为利用激光能量对样品及承载基质进行显微条件下的精细切割，从而从混合样品或异质样品中分离出纯的样品甚至单个细胞，从而在下游微基因组学应用(如新一代测序、Sanger测序、PCR和蛋白质组学)和基因表达分析中获得更加有效和准确的结果。而细胞可以采用荧光标记或原位杂交方法根据其形态、免疫组化表型甚至其基因型加以选择。然而上述表征手段在应用中仍存在诸多限制，例如并非所有样本都有相对应的标记特征，标记过程对细胞活性产生伤害及影响后续的分子操作等。而单细胞拉曼技术在一定程度上恰能解决这些问题。单细胞拉曼光谱技术能够提供细胞内化合物分子构成和结构的信息作为其“分子指纹”，包括核酸、蛋白、多糖及脂类等，这些信息可反映细本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)，其特征在于，所述拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)包括切割层(1‑1)和拉曼镀层(1‑2)，所述切割层(1‑1)为激光敏感高分子材料，包括PC(聚碳酸酯)、EVA(乙烯‑醋酸乙烯共聚物)、PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)、PEN(聚萘二甲酸乙二醇酯)中的一种或多种，所述拉曼镀层(1‑2)为低拉曼背景、不透明金属材料，包括铝、银、金中的一种或多种，所述拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)用于单细胞拉曼测量和激光切割分选。

【技术特征摘要】
1.一种拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)，其特征在于，所述拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)包括切割层(1-1)和拉曼镀层(1-2)，所述切割层(1-1)为激光敏感高分子材料，包括PC(聚碳酸酯)、EVA(乙烯-醋酸乙烯共聚物)、PET(聚对苯二甲酸乙二醇酯)、PEN(聚萘二甲酸乙二醇酯)中的一种或多种，所述拉曼镀层(1-2)为低拉曼背景、不透明金属材料，包括铝、银、金中的一种或多种，所述拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)用于单细胞拉曼测量和激光切割分选。2.根据权利要求1所述的拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)，其特征在于，所述切割层(1-1)厚度为5-50μm，所述拉曼镀层(1-2)能够掩盖切割层的拉曼信号，厚度为10-100nm。3.根据权利要求1所述的拉曼测量和激光显微切割薄膜，其特征在于，所述激光切割分选所采用的脉冲激光波长为266nm-1064nm，激光脉宽为1fs-1μs，激光的能量范围为1μJ-100μJ，激光的脉冲频率为5-16.6kHz。4.一种单细胞拉曼测量和激光显微切割一体化分选装置，其特征在于，包含权利要求1-3任一所述的拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)，细胞点样芯片(2)和细胞回收芯片(3)；所述细胞点样芯片(2)、拉曼测量和激光显微切割薄膜(1)以及细胞回收芯片(3)按顺序叠加，形成一体化对应结构。5.根据权利要求4所述的单细胞拉曼测量和激光显微切割一体化分选装置，其特征在于，所述细胞点样芯片(2)为透明软质高分子材料，包括PDMS(聚二甲基硅氧烷)、硅橡胶、PVC(聚氯乙烯)中的一种或多种，所述的细胞回收芯片(3)为透明材料，包括硅酸盐玻璃、PDMS(聚二甲基硅氧烷)、PMMA(聚甲基丙烯酸甲酯)中的一种或多种。6.根据权利要求5所述的单细胞拉曼测量和激光显微切...

【专利技术属性】
技术研发人员：勾洪磊，籍月彤，徐健，
申请(专利权)人：中国科学院青岛生物能源与过程研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37