根结线虫会阴花纹快速制片方法技术

本发明专利技术公开了一种根结线虫会阴花纹快速制片方法，包括以下步骤：(1)挑取并转移雌虫；(2)用11号解剖刀，一刀斜切切下带有雌虫尾部完整会阴花纹的五分之一至二分之一虫体，之后将带有会阴花纹的部分虫体转移到质量分数60％乳酸溶液中；(3)清理：将切口向下或向侧面，用昆虫针按压上述虫体表皮1～5次，虫体中的内容物会快速释放，10～60秒即可清理干净内容物；(4)用11号解剖刀沿花纹边缘切割，得到含有完整会阴花纹的小块表皮；(5)制作根结线虫会阴花纹永久玻片。本发明专利技术使用优化的下刀方式，能一刀切取会阴花纹部分，斜切得到的剖面面积大，在大块表皮上直接进行内容物清理，操作比便捷方便。本发明专利技术方法用间短，成功率高，表皮不易在清理时破坏。

【技术实现步骤摘要】
根结线虫会阴花纹快速制片方法
本专利技术涉及根结属线虫的会阴花纹永久玻片制作方法。
技术介绍
随着全球经济一体化，国际贸易与日俱增，外来检疫性有害生物传入我国的风险日趋严重，我国已经成为世界上受外来检疫性有害生物威胁最为严重的国家之一。生物入侵由于其带来社会、经济和生态问题已经引起了世界各国政府的高度关注，这些入侵物种不仅严重威胁着生态系统，加速物种灭绝，而且还造成生物多样性的丧失。目前，我国进境植物检疫性有害生物名录中共列入检疫性线虫20种(属)，其中根结属(非中国种)为检疫性线虫。根结属线虫种类最多、危害最大、入侵风险最高，Abad等估计全球农作物每年因根结属线虫危害造成的损失高达1570亿美元。目前全球已报道的根结属线虫约104种，其中约24种为中国种，80余种为非中国种。无论是口岸线虫检疫，还是国内线虫病害研究和防控，都要求对根结属线虫进行准确鉴定。长期以来，由于每种根结属线虫雌虫会阴花纹具有比较稳定的特征，其花纹整体形态、线纹粗细、背弓高度、侧线有无、侧尾腺间距等可用于种类鉴定。因此，根结线虫形态鉴定通常必须制作会阴花纹。现有的根结线虫会阴花纹制片方法主要根据刘维志主编的《本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.根结线虫会阴花纹快速制片方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)挑取并转移雌虫：用2号昆虫针从根结线虫受害根部挑取出根结线虫的雌虫，拨入水中，然后转移1个以上的雌虫至塑料培养皿中待用；(2)在解剖镜下，用昆虫针将水滴中的雌虫拨到水滴外面，然后用11号解剖刀，一刀斜切切下带有雌虫尾部完整会阴花纹的五分之一至二分之一虫体，之后用昆虫针或挑针将带有会阴花纹的部分虫体转移到质量分数60％乳酸溶液中；(3)清理：将切口向下或向侧面，用昆虫针按压上述带有会阴花纹的虫体表皮1～5次，虫体中的内容物会快速释放，10～60秒即可清理干净内容物；(4)用昆虫针或挑针将上述已清理干净的带有会阴花纹的虫体表皮...

【技术特征摘要】
1.根结线虫会阴花纹快速制片方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：(1)挑取并转移雌虫：用2号昆虫针从根结线虫受害根部挑取出根结线虫的雌虫，拨入水中，然后转移1个以上的雌虫至塑料培养皿中待用；(2)在解剖镜下，用昆虫针将水滴中的雌虫拨到水滴外面，然后用11号解剖刀，一刀斜切切下带有雌虫尾部完整会阴花纹的五分之一至二分之一虫体，之后用昆虫针或挑针将带有会阴花纹的部分虫体转移到质量分数60％乳酸溶液中；(3)清理：将切口向下或向侧面，用昆虫针按压上述带有会阴花纹的虫体表皮1～5次，虫体中的内容物会快速释放，10～60秒即可清理干净内容物；(4)用昆虫针或挑针将上述已清理干净的带有会阴花纹的虫体表皮转移到甘油滴中，在放大30-40倍的解剖镜下，使带有会阴花纹的表皮表面朝上，用11号解剖刀沿花纹边缘切割，除去多余不含有花纹的表皮，保留完整会阴花纹部分，得到含有完整会阴花纹的小块表皮；(5)取一干净载玻片，在中间加一小滴甘油，在解剖镜下用挑针将上述含有完整会阴花纹的小块表皮转移至甘油滴的中央，表皮表面向上，压沉紧贴载玻片，加盖玻片，用封片剂封片，制作得到根结线虫会阴花纹永久玻片。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤(2)中，一刀斜切切下带有雌虫尾部完整会阴花纹的五分之一至二分之一虫体，所述斜切的位置为：雌虫头端到尾端的中轴线上，尾端会阴花纹在中轴线上的靠近头端的边缘点为A点，中轴线的中点为B点，在A点和B点中任选一点为切割点O点，在O点处将中轴线向左或向右偏移30～...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾建锋，刘乐乐，方亦午，陈先锋，
申请(专利权)人：宁波中盛产品检测有限公司，宁波检验检疫科学技术研究院，
类型：发明
国别省市：浙江,33