一种单萜类化合物及其提取方法和应用技术

本发明专利技术属于天然药物化学技术领域，具体涉及一种单萜类化合物，其结构式为：

【技术实现步骤摘要】
一种单萜类化合物及其提取方法和应用
本专利技术属于天然药物化学
，具体涉及一种单萜类化合物，并涉及所述单萜类化合物的提取方法，还涉及所述单萜类化合物在制备治疗肝癌药物与抗乙肝病毒药物中的应用，以及提供了一种药物制剂。
技术介绍
众所周知，肝病是危害人类健康的重大疾病。在亚洲，肝纤维化和肝硬化都是常见的慢性肝病，研究表明，90％的肝硬化可转化为肝癌。肝癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是一种原发于肝细胞的恶性肿瘤，其平均生存时间为6-16个月，严重危害人类生命健康。据统计，全世界每年约有78.2万人罹患肝癌，分别位列癌症疾病中男性发病率和女性发病率的第5位和第7位，死亡率则分别高居第2位和第6位。在我国，HCC也是常见高发的恶性肿瘤之一，数据显示，我国肝癌患者数约占全球总患者数的50％，排在肿瘤发病率的第二位。通过大数据分析和研究发现，肝癌大多数是由乙肝病毒(HBV)感染形成乙型肝炎发展而来，在这个过程中还伴有肝纤维化和肝硬化等病症。因此，如何有效预防和治疗高发性的乙肝病毒以及伴随生成的肝癌已经成为各国政府及相关医疗机构都需共同承担和亟需解决的重大难题。目前，手术切除被认为是早期肝细胞癌的最佳治疗方案，但是，晚期患者只能选择化疗，并伴随术后复发率高和肝功能损伤大的缺点。即便如此，传统的化学治疗方法并没有显著延长肝癌患者的总体生存期，大量数据表明，其五年生存率仅为7％。临床上，对于HBV的控制主要是以接种疫苗预防为主，尽管疫苗效果明显，然而，一旦感染乙肝病毒，则只能终身携带，不能治愈，况且目前的治疗效果不尽令人满意。现有的治疗肝癌的化学药物除药物疗效不佳外，其药物毒性及长期使用所产生的耐药性等缺陷同样亟需克服。然而，与化学药物不同，天然药物具有天然无毒、调节免疫、多靶点的特性，并且在肝癌的治疗中占有越来越重要的地位。因此，如何从合适种类的动植物或矿物中寻找到并提取出疗效高且毒性低的化疗药物是临床上治疗乙肝及肝癌的热点研发方向之一。植物提取物是以植物为原料，按照对提取的最终产品的用途的需要，经过物理化学提取分离过程，定向获取和浓集植物中的某一种或多种有效成分，而不改变其有效成分结构而形成的产品。按照提取植物的成份不同，一般可获得甙、酸、多酚、多糖、萜类、黄酮、生物碱等；按照性状不同，又可分为植物油、浸膏、粉、晶状体等种类。金银花(FlosLoniceraeJaponicae)是忍冬科忍冬属植物忍冬(LonicerajaponicaThunb.)的干燥花蕾或带初开的花，药用历史悠久，首载于梁代陶弘景的《名医别录》中，其为常用中药品种之一；此外，金银花在日常生活中还可用于食疗，如人们经常饮用的金银花茶等。近期的药物化学研究表明，金银花含有丰富的萜类化合物，且其中的某些萜类化合物在抗病毒方面具有较好的疗效。
技术实现思路
本专利技术旨在从金银花中提取有效的活性化合物，以提供一种全新的天然化合物，该天然化合物为一种单萜类化合物。专利技术人在实施一系列实验后意外地发现该单萜类化合物除了具有很好的抗肝癌活性之外，还表现出显著的抗乙肝病毒作用，并且该单萜类化合物具有高效、低毒的优点。因此，该单萜类化合物可作为治疗肝病的先导化合物，有利于相关临床新药的开发，同时，该单萜类化合物本身亦可用于制备抗肝癌药物和/或抗乙肝病毒药物，从而具有广阔的临床应用前景。具体地，本专利技术第一方面提供了一种单萜类化合物，其具有以下结构式(I)：并且，通过一系列检测分析，所述单萜类化合物的结构得到了表征与确认，依据系统命名法可知其名称为：(5R,6S,9R)-3,6,9-trimethyl-10,12-dioxa-tricyclo[7.2.1.01,6]dodec-3-en-5-one；据此，专利技术人将其简称为JapopenoidA。同时，本专利技术第二方面提供了第一方面所述的单萜类化合物的提取方法，具体包括以下步骤：S1：在室温下，用75％乙醇对金银花进行多次冷浸、渗漉提取，合并提取液后，减压回收溶剂，浓缩以制得乙醇浸膏；S2：将所述乙醇浸膏混悬于水，然后分别用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，以分别制得环己烷浸膏，乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏；S3：取所述乙酸乙酯浸膏，用氯仿和甲醇溶解，并用柱层析硅胶进行拌样，装柱，上样，接着进行梯度洗脱；采用TLC分析，合并相同流分后获得20个组分E1～E20；S4：取组分E3，用二氯甲烷和甲醇溶解，进行第一次SephadexLH-20(23×750mm)柱层析，其中采用洗脱剂进行等度洗脱；采用TLC分析，合并相同流分后获得7个组分：E3A，E3B，E3C，E3D，E3E，E3F和E3G；S5：取组分E3F，用二氯甲烷和甲醇溶解，进行第二次SephadexLH-20(23×750mm)柱层析，其中采用洗脱剂进行等度洗脱；采用TLC分析，合并相同流分后获得6个组分E3F1～E3F6；S6：取组分E3F4，用甲醇溶解、过滤，然后进行高效液相色谱分离，收集保留时间为20～22min的流分，从而得到所述单萜类化合物JapopenoidA。优选地，在上述提取方法中，在S3中所述的梯度洗脱包括：依次用二氯甲烷、体积比为100：1的二氯甲烷-甲醇、体积比为50：1的二氯甲烷-甲醇、体积比为25：1的二氯甲烷-甲醇、体积比为15：1的二氯甲烷-甲醇、体积比为5：1的二氯甲烷-甲醇、体积比为2：1的二氯甲烷-甲醇、甲醇实施洗脱。优选地，在上述提取方法中，在S4和S5中所述的洗脱剂为体积比8：2的二氯甲烷-甲醇。优选地，在上述提取方法中，在S6中所述的高效液相色谱分离的条件包括：RP-18制备液相色谱柱规格：Cosmosil5C18-MS-II，5μm，20×250mm；检测波长：254nm；流动相：体积比为53：47的甲醇-水，流速为8mL/min。优选地，在上述提取方法中，所述柱层析硅胶的粒径为100～200目。并且，本专利技术第三方面提供了第一方面所述的单萜类化合物在制备治疗肝癌药物中的应用。本专利技术第四方面提供了第一方面所述的单萜类化合物在制备抗乙肝病毒药物中的应用。本专利技术第五方面还提供了一种药物制剂，其包含治疗有效量的第一方面所述的单萜类化合物和药学上可接受的载体。值得说明的是，所述药学上可接受的载体例如选自稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、润滑剂、崩解剂、吸收促进剂以及表面活性剂中的一种或几种。优选地，上述药物制剂的剂型选自以下任一种：片剂，胶囊剂，丸剂，颗粒剂，混悬剂，口服液，涂剂，巴布剂，喷雾剂，粉针剂和水针剂。又如，当上述药物制剂采用注射剂时，所述注射剂可以是皮下注射剂、腹腔注射剂、肌肉注射剂以及静脉注射剂中的任一种。综上所述，本专利技术所提供的技术方案具有以下有益效果：首先，所述单萜类化合物JapopenoidA的提取方法的步骤简单，易于操作；其次，所述单萜类化合物JapopenoidA作为一种天然小分子化合物，对正常细胞毒性较低，因此毒副作用较小，既表现出很好的抗肝癌效果，又表现出显著的抗乙肝病毒作用，从而能够为肝癌及乙肝患者提供新的治疗药物及治疗途径。此外，通过相关实验证实，所述单萜类化合物JapopenoidA具有有效剂量适中，疗效显著，毒副作用小等优点，因此，本专利技术所述的单萜类化合物Jap本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种单萜类化合物，其特征在于，具有以下结构式(I)：

【技术特征摘要】
1.一种单萜类化合物，其特征在于，具有以下结构式(I)：2.一种根据权利要求1所述的单萜类化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：S1：在室温下，用75％乙醇对金银花进行多次冷浸、渗漉提取，合并提取液后，减压回收溶剂，浓缩以制得乙醇浸膏；S2：将所述乙醇浸膏混悬于水，然后分别用环己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，以分别制得环己烷浸膏，乙酸乙酯浸膏和正丁醇浸膏；S3：取所述乙酸乙酯浸膏，用氯仿和甲醇溶解，并用柱层析硅胶进行拌样，装柱，上样，接着进行梯度洗脱；采用TLC分析，合并相同流分后获得20个组分E1～E20；S4：取组分E3，用二氯甲烷和甲醇溶解，进行第一次SephadexLH-20(23×750mm)柱层析，其中采用洗脱剂进行等度洗脱；采用TLC分析，合并相同流分后获得7个组分：E3A，E3B，E3C，E3D，E3E，E3F和E3G；S5：取组分E3F，用二氯甲烷和甲醇溶解，进行第二次SephadexLH-20(23×750mm)柱层析，其中采用洗脱剂进行等度洗脱；采用TLC分析，合并相同流分后获得6个组分E3F1～E3F6；S6：取组分E3F4，用甲醇溶解、过滤，然后进行高效液相色谱分离，收集保留时间为20～22min的流分，从而得到所述单萜类化合物。3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾小斌，葛岚岚，万浩强，肖凌云，李洁媚，吴伟刚，周伯平，吴诗品，
申请(专利权)人：深圳市人民医院，
类型：发明
国别省市：广东,44