测定水产品中的八种抗抑郁类药物残留的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定水产品中的八种抗抑郁类药物残留的方法，包括以下步骤：制备待测样品溶液(上清液)；制备标准溶液(标准系列工作溶液)；将标准系列工作溶液注入液质联用仪，确定8种抗抑郁类药物的出峰位置及其定性定量离子对，以定量离子对丰度为纵坐标，以浓度为横坐标，制作标准曲线方程；将待测样品溶液按照上述方法进行检测，所得数据代入标准曲线方程计算，得到待测样品中各抗抑郁类药物的含量。采用本发明专利技术的方法测定水产品中的八种抗抑郁类药物残留，具有简便、定性定量，灵敏度高的优点。

Determination of eight antidepressant residues in aquatic products

The invention discloses a method for determination of eight antidepressant drugs residues in aquatic products, which includes the following steps: preparation of sample solution (supernatant); preparation of standard solution (standard series of working solution); injection of standard series of working solution into liquid chromatography-mass spectrometry to determine the peak position of eight antidepressant drugs and their qualitative and quantitative ion pairs, with quantitative ion pair abundance as vertical. The standard curve equation was made with the concentration as the abscissa coordinate, and the sample solution was detected by the above method. The data obtained were substituted for the standard curve equation to calculate the content of antidepressants in the sample to be tested. The method for determining eight antidepressant drugs residues in aquatic products has the advantages of simplicity, qualitative and quantitative analysis and high sensitivity.

【技术实现步骤摘要】
测定水产品中的八种抗抑郁类药物残留的方法
本专利技术涉及一种适用于水产品中的八种抗抑郁类药物残留的分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱检测法。
技术介绍
抑郁症是一类情感上的精神障碍疾病，其特征主要表现为自责、悲伤以及绝望等情绪异常，且经常伴有焦虑、睡眠质量不高及身体不适等典型症状，从而严重影响患病者的工作能力和生活质量，严重者甚至可能危及生命。目前，抑郁症在临床上是一种很常见的精神类疾病，而随着人类社会生活节奏的加快，人们在精神和生活上的压力逐渐增大，使得抑郁症在全世界的发病率逐年上升。早在2001年，世界卫生组织(WHO)的健康报告中就已指出抑郁症是发达国家的主要发病类型之一，并预测到2020年，抑郁症会成为世界范围内的第二大疾病源，仅次于心脏病。目前对于抑郁症的治疗主要依靠服用不同种类的抗抑郁药来缓解抑郁症状，而由于当前抑郁症的全球普遍性，使得抗抑郁药的使用量逐年增加。抗抑郁药作为PPCPs中重要的组成部分，已成为临床中使用较多的一类精神类药物。美国FDA(FoodandDrugAdministration，食品药品监督管理局)最新公布的数据显示在美国RxList(网上处方药物索引)中最受欢迎的10种药物基本都是精神类药物，其中包括两种抗抑郁药，西酞普兰和依地普仑。已有统计数据显示，目前全球销量最多的8种抗抑郁药分别为氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、氟伏沙明、文拉法辛、米氮平、度洛西汀和阿米替林，其总销售额超过全部抗抑郁药物销售总额的80％。抗抑郁类药物与其它PPCPs的迁移过程相同。环境中的PPCPs的污染来源与人类活动密不可分。PPCPs的污染源是生活污水、工业废水和医院废水等已处理水的排放；畜牧业、水产业、农业废水的直接排放或地下渗透；过期药品及化妆品的处理等。抗抑郁类药物在河水、饮用水、地下水中被广泛检测出，引起我们对其对人体健康影响的思考。研究表明，被药物污染的地表水，通过渗透作用进入地下水，人类长期饮用受污染的水体可能会引起内分泌干扰、生育率下降以及产生耐药性等。虽然部分研究对环境中的抗抑郁类药物对人体健康的危害尚不明确，但此类药物会在水产品体内的蓄积，而后通过食物链进入人体，其在水产品体内表现出的生理毒性会给人类健康带来一定风险。目前，国内外尚无相关水产品中抗抑郁类药物残留的超高效液相色谱-串联质谱检测方法的相关报道。水产品是人们日常饮食摄入的重要食品种类之一。我国是水产品生产大国，2012年我国的水产品总量达5907.68万吨，水产品产量连续多年居世界首位，水产品是我国打入国际市场的主要农产品品种之一。近年来，各级渔业主管部门紧紧围绕农业部提出的“努力确保不发生重大水产品质量安全事件”的目标任务，开展了大量卓有成效的工作，使我国水产品质量安全水平稳定向好。然而，伴随着渔业的快速发展，由于养殖环境不断恶化和养殖集约化程度不断提高，因药物残留问题引发的水产品质量安全事件时有发生面临日益严峻的水产品质量安全形势，如何准确地检测出水产品中药物残留状况并及时对其监管就显得至关重要。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种简便、定性定量，灵敏度高的适用于水产品中八种抗抑郁类药物残留检测的分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法。为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种测定水产品中的八种抗抑郁类药物残留的方法(即，水产品中八种抗抑郁类药物残留检测的分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法)，包括以下步骤：1)、制备待测样品溶液：1.1、将待测样品均质：以水产品作为待测样品，按照1g/5ml的料液比，在待测样品中加入0.10mol/LpH6.0的磷酸盐缓冲溶液进行均质，得试样；1.2、称取试样1～5g(较佳为2g)，精确至0.01g，置于容器(具塞离心管)内，精密加入预先零度低温保存的5～20ml(较佳为10mL)乙腈，漩涡振荡提取5～20min(较佳为15min)，加入2～10g(较佳为5g)氯化钠和5～10g(较佳为8g)无水硫酸钠，旋涡1～5min(较佳为2min)，以4000～8000r/min(较佳为5000r/min)的速度离心2～10min(较佳为5min)，精密吸取上清液(8ml)全部转移至10mL聚丙烯离心管中，待净化；1.3、在步骤1.2所得的待净化样液中加入净化剂，旋涡1～5min(较佳为2min)混匀，以4000～8000r/min(较佳为5000r/min)的速度离心2～10min(较佳为5min)，所述净化剂由500～2000mg(较佳为1500mg)无水硫酸钠，100～500mg(较佳为250mg)C18-N(十八烷基键合硅胶吸附剂)以及100～500mg(较佳为350mg)NH2-PSA(NH2-丙基乙二胺吸附剂)组成；1.4、精密取步骤1.3离心所得的上清液(5mL)于20～50℃(最佳为40℃)下氮吹至净干，精密加入0.5mL混合溶液(含0.1％(v/v)甲酸水溶液：甲醇＝65:35)，用0.20～0.45um过滤头过滤，得上清液；目的是供超高效液相色谱-串联质谱仪进行定性定量分析；所述混合溶液由甲酸水溶液：甲醇＝65:35的体积比组成，所述甲酸水溶液中甲酸的体积浓度为0.1％。2)、制备标准溶液2.1、用色谱纯有机溶剂(甲醇或乙腈)分别将8种抗抑郁类药物标准物质(如表2所示)溶解，配置成浓度均为1000ug/mL的8种抗抑郁类药物标准储备溶液，于-20℃保存；2.2、各取适量上述标准储备溶液用有机溶剂(甲醇或乙腈)配制成8种抗抑郁类药物的浓度均为100mg/L的混合标准储备溶液；2.3、分别取检测结果为阴性的空白样品(与实际检测样品的基质一样，即，相同种类的水产品)8份，每份取2g，分别加入适量的混合标准储备溶液，按照1)待测溶液制备基质标准溶液，使得最终8份样品溶液中8种抗抑郁类药物浓度均分别为0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0ug/L，作为标准系列工作溶液；3)、将标准系列工作溶液注入液质联用仪，确定8种抗抑郁类药物的出峰位置及其定性定量离子对，以定量离子对丰度为纵坐标，以浓度为横坐标，制作标准曲线方程；4)、取步骤1)(步骤1.4)所得的上清液按步骤3)方法测定上清液中各抗抑郁类药物峰面积及其定量定性离子对，根据各出峰时间以及定性定量离子对丰度比进行定性分析，按照步骤3)所得的标准曲线方程计算，得到待测样品中各抗抑郁类药物的含量。作文本专利技术的水产品中抗抑郁类药物残留的检测的分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法的改进，所述8种残留的抗抑郁类药物为：氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、西酞普兰、文拉法辛、阿米替林、氯丙咪嗪、曲米帕明。作为本专利技术的水产品中抗抑郁类药物残留的检测的分散固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱法的改进：所述的步骤3)的色谱条件(即超高效液相色谱(UPLC)检测用的液相色谱条件)为：流速：0.3～0.8ml/min(较佳为0.5mL/min)；柱温：20～50℃(较佳为40℃)；进样量0.5～5μL(较佳为1μL)；流动相由流动相A和流动相B组成：流动相：A(0.1％甲酸水溶液)：B(甲醇)＝65:35的体积比。上述％为体积％。备注：流动相比例不做变化，为等梯度。即，流动相A为甲酸本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.测定水产品中的八种抗抑郁类药物残留的方法，其特征是包括以下步骤：1)、制备待测样品溶液：1.1、将待测样品均质：以水产品作为待测样品，按照1g/5ml的料液比，在待测样品中加入0.10mol/L pH6.0的磷酸盐缓冲溶液进行均质，得试样；1.2、称取试样1～5g，精确至0.01g，置于容器内，加入预先零度低温保存的5～20ml乙腈，漩涡振荡提取5～20min，加入2～10g氯化钠和5～10g无水硫酸钠，漩涡振荡1～5min，以4000～8000r/min的速度离心2～10min，吸取上清液转移至10mL聚丙烯离心管中，待净化；1.3、在步骤1.2所得的待净化样液中加入净化剂，旋涡振荡1～5min混匀，以4000～8000r/min的速度离心2～10min；所述净化剂由500～2000mg无水硫酸钠，100～500mgC18‑N以及100～500mgNH2‑PSA组成；1.4、取步骤1.3离心所得的上清液于20～50℃下氮吹至净干，加入0.5mL混合溶液，用0.20～0.45um过滤头过滤，得上清液；目的是供超高效液相色谱‑串联质谱仪进行定性定量分析；所述混合溶液由甲酸水溶液：甲醇＝65:35的体积比组成，所述甲酸水溶液中甲酸的体积浓度为0.1％；2)、制备标准溶液2.1、用色谱纯有机溶剂分别将8种抗抑郁类药物标准物质溶解，配置成8种抗抑郁类药物标准储备溶液；2.2、将标准储备溶液用有机溶剂配制成8种抗抑郁类药物的浓度均为100ug/L的混合标准储备溶液；2.3、分别取检测结果为阴性的空白样品8份，每份取2g，分别加入适量的混合标准储备溶液，按照1)待测溶液制备基质标准溶液所述，使得最终8份样品溶液中8种抗抑郁类药物浓度均分别为0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0ug/L，作为标准系列工作溶液；3)、将标准系列工作溶液注入液质联用仪，确定8种抗抑郁类药物的出峰位置及其定性定量离子对，以定量离子对丰度为纵坐标，以浓度为横坐标，制作标准曲线方程；4)、取步骤1)所得的上清液按步骤3)方法测定上清液中各抗抑郁类药物峰面积及其定量定性离子对，根据各出峰时间以及定性定量离子对丰度比进行定性分析，按照步骤3)所得的标准曲线方程计算，得到待测样品中各抗抑郁类药物的含量。...

【技术特征摘要】
1.测定水产品中的八种抗抑郁类药物残留的方法，其特征是包括以下步骤：1)、制备待测样品溶液：1.1、将待测样品均质：以水产品作为待测样品，按照1g/5ml的料液比，在待测样品中加入0.10mol/LpH6.0的磷酸盐缓冲溶液进行均质，得试样；1.2、称取试样1～5g，精确至0.01g，置于容器内，加入预先零度低温保存的5～20ml乙腈，漩涡振荡提取5～20min，加入2～10g氯化钠和5～10g无水硫酸钠，漩涡振荡1～5min，以4000～8000r/min的速度离心2～10min，吸取上清液转移至10mL聚丙烯离心管中，待净化；1.3、在步骤1.2所得的待净化样液中加入净化剂，旋涡振荡1～5min混匀，以4000～8000r/min的速度离心2～10min；所述净化剂由500～2000mg无水硫酸钠，100～500mgC18-N以及100～500mgNH2-PSA组成；1.4、取步骤1.3离心所得的上清液于20～50℃下氮吹至净干，加入0.5mL混合溶液，用0.20～0.45um过滤头过滤，得上清液；目的是供超高效液相色谱-串联质谱仪进行定性定量分析；所述混合溶液由甲酸水溶液：甲醇＝65:35的体积比组成，所述甲酸水溶液中甲酸的体积浓度为0.1％；2)、制备标准溶液2.1、用色谱纯有机溶剂分别将8种抗抑郁类药物标准物质溶解，配置成8种抗抑郁类药物标准储备溶液；2.2、将标准储备溶液用有机溶剂配制成8种抗抑郁类药物的浓度均为100ug/L的混合标准储备溶液；2.3、分别取检测结果为阴性的空白样品8份，每份取2g，分别加入适量的混合标准储备溶液，按照1)待测溶液制备基质标准溶液所述，使得最终8份样品溶液中8种抗抑郁类药物浓度均分别为0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0ug/L，作为标准系列工作溶液...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾彦博，励炯，刘铁兵，
申请(专利权)人：杭州市食品药品检验研究院，浙江科技学院，
类型：发明
国别省市：浙江,33