一种CDK4抑制剂的制备及用途制造技术

本发明专利技术涉及通式(Ⅰ)和(Ⅱ)的化合物，及制备在其药学上可接受的盐，

Preparation and Application of a CDK4 Inhibitor

The present invention relates to compounds of general formulas (I) and (II) and preparation of pharmaceutically acceptable salts thereof.

【技术实现步骤摘要】
一种CDK4抑制剂的制备及用途
本专利技术涉及一种药用化合物，特别是一种四氢-β-咔啉类化合物的制备方法和用途。
技术介绍
Fascaplysin是一种红色色素,在1988年首先由Rolletal.从斐济海洋海绵Fascaplysinopsissp中分离出，也是第一个天然存的五环环系12H-吡啶并[1,2-a：3,4-b]二吲哚成员。Fascaplysin表现出广泛的生物活性，包括抗细菌，抗真菌，抗病毒，HIV-1-RT，p56酪氨酸激酶，抗疟疾，对许多癌细胞系也有效，以及CDK4抑制作用。Fascaplysin可以抑制几种微生物的生长，包括金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，白色念珠菌和酿酒酵母。fascaplysin显示出对小鼠白血病细胞L-1210的增殖的抑制，ED50值为0.2μM/mL，并且在鼠肿瘤细胞毒性测定中显示出选择性。Fascaplysin表现出对人宫颈癌HeLa细胞的抗增殖作用，通过外源性死亡途径和线粒体途径诱导凋亡，但不能在G1期进行细胞周期阻滞。Fascaplysin通过血管内皮生长因子(VEGF)阻断和对人脐静脉内皮细胞进行细胞周期阻滞和凋亡，使其显示出抗血管生成活性。最近Yan等人报道了fascaplysin抑制S180细胞植入肿瘤的生长，可能通过凋亡，抗血管生成或细胞周期停滞机制。Fascaplysin同样显示出特异性CDK4抑制活性，其IC50值为0.35μM，并且还阻断癌细胞在细胞周期的G0/G1期的生长。然而，同样可以观察到fascaplysin对其他CDKs的活性较差，CDK1/CyclinB的IC50>100μM，CDK2/CyclinA和CDK-2/CyclinE的IC50>50μM，CDK5/p35的IC50值为20μM。有趣的是，CDK4/CyclinD2和CDK4/CyclinD3在>100μM浓度时不被抑制，而CDK6/CyclinD2被抑制，其IC50为35μM。这可以反映细胞周期蛋白与其CDKs以不同的方
技术实现思路
本专利技术提供一种可克服现有技术不足，可降低其DNA嵌入能力，保留CDK4抑制剂的药效作用的Fascaplysin的衍生物。本专利技术所涉及的化合物包括：如通式(Ⅰ)的化合物，其中，取代基R1为甲基或乙基；取代基R2为氯或甲氧基或硝基；或如通式(Ⅱ)的化合物，其中取代基R为氟或甲氧基；以及通式(I)或(II)的化合物在其药学上可接受的盐。所述的盐是指通式(Ⅰ)和(Ⅱ)的化合物与下列酸形成的酸加成盐：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、萘磺酸、对甲苯磺酸、乳酸、丙酮酸、柠檬酸、酒石酸、乙酸、马来酸。苯磺酸、琥珀酸、富马酸、水杨酸、苯基乙酸或杏仁酸，或者还包括无机碱的酸式盐，如：含有碱性金属阳离子、碱土金属阳离子、铵阳离子盐。本专利技术所涉及的化合物可在制备用于预防或治疗与细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4抑制剂有关的疾病的药物中的应用。更具体讲，本专利技术的化合物可在制备治疗黑色素瘤、肝癌、胃癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、食管癌、胃肠道癌的药物中应用。本专利技术所涉及的通式(Ⅰ)化合物的制备方法的反应历程如式(Ⅲ)，即：a.将色胺溶于水中，逐滴加入浓盐酸直至固体全部溶解，室温恒压滴加当量乙醛酸和KOH溶液调节pH到3-4左右，室温反应4h至固体析出完全，抽滤、滤饼洗涤，再用甲醇重结晶得到中间体1,2,3,4-四氢-β-咔啉-1-羧酸；b.取相应的苯甲酸溶于干燥的THF中，滴加入SOCl2和吡啶，70℃回流1.5h，旋蒸掉溶剂及过量的SOCl2，密封备用；将1,2,3,4-四氢-β-咔啉-1-羧酸溶于NaOH溶液和1,4-二氧六环混合溶剂中，超声加热至其全部溶解；在冰水浴的条件下将事先准备好的酰氯滴加到上述混合溶液中，剧烈搅拌后室温下反应，滴加过量的盐酸到反应溶液中，至沉淀完全洗出，抽滤后滤饼水洗涤，得到产物3；c.将产物2溶于甲醇或无水乙醇中，-20℃滴加SOCl2，剧烈搅拌常温下反应，反应完全，旋干溶剂，加入乙酸乙酯溶解，用NaHCO3溶液洗涤，再用饱和食盐水洗涤，有机层干燥处理，经抽滤、滤液旋干，柱层析得到目标产物4。本专利技术所述的通式(Ⅱ)化合物的制备方法的反应历程如式(Ⅳ)，即：a：将6.00g色胺溶于90mL水中，逐滴加入浓盐酸直至固体全部溶解，室温恒压滴加4当量乙醛酸和10％的KOH溶液调节pH在3-4左右。室温反应4h至固体析出完全，TLC监测至反应完全，抽滤、滤饼水洗三次、甲醇重结晶得到7.05g的中间体B；b：取相应的不同R取代基邻硝基苯甲酸2.4mmol溶于5ml干燥的THF中，加入SOCl28滴，吡啶2滴，70℃回流1.5h，旋蒸掉溶剂及过量的SOCl2，密封备用；称取2mmol的1,2,3,4-四氢-β-咔啉-1-羧酸溶于2mL的2mol/LNaOH和1,4-二氧六环混合溶剂中，超声加热至其全部溶解；在冰水浴的条件下将事先准备好的酰氯滴加到上述混合溶液中。滴加时间不少于5min，剧烈搅拌30min，室温下反应20h，用已配置好的5mol/L的盐酸滴加到反应溶液中，滴加过量，至沉淀完全洗出，抽滤、滤饼水洗三次，得到具有不同R取代基的中间体C；c：将不同类型的中间体C等比例分别溶于6ml无水甲醇和无水乙醇中，-20℃下甲醇或无水乙醇浴中滴加SOCl2，加入HCl10滴剧烈搅拌1小时，于100℃温度下回流5h，TLC检测反应完全，旋干溶剂，加入乙酸乙酯溶解，NaHCO3溶液洗涤三次，饱和食盐水洗涤三次，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液旋干，柱层析分离目标产物D。本专利技术是在研究了大量国内外文献的基础上，以具有特异选择性的CDK4小分子抑制活性的天然产物Fascaplysin(平面五环季铵盐)为先导化合物，利用计算机辅助药物设计出一系列Fascaplysin的衍生物，药理实验证明，本专利技术的化合物可降低其DNA嵌入能力，同时保留CDK4抑制剂的药效作用，具有较好抗肿瘤活性。附图说明图1为Fascaplysin与CDK4/CyclinD1分子对接示意图。图2为a7与CDK4/CyclinD1分子对接示意图。图3为b7与CDK4/CyclinD1分子对接示意图。具体实施方式以下结合化合物的制备及药理实验的实施例详细解说本专利技术。一、化合物制备1)通式(Ⅰ)化合物的制备化合物的制备a：将6.00g色胺溶于100mL水中，逐滴加入浓盐酸直至固体全部溶解，室温恒压滴加4当量乙醛酸和10％的KOH溶液调节pH在3-4左右。室温反应4h至固体析出完全，薄层色谱法监测至反应完全，抽滤、滤饼水洗三次、甲醇重结晶得到中间体1,2,3,4-四氢-β-咔啉-1-羧酸7.05g。b：取不同的取代基苯甲酸2.4mmol(0.5g)溶于5ml干燥的THF中，加入SOCl28滴，吡啶2滴，70℃回流1.5h，旋蒸掉溶剂及过量的SOCl2，密封备用；称取2mmol的1,2,3,4-四氢-β-咔啉-1-羧酸溶于2mol/LNaOH溶液(2.1mL)和1,4-二氧六环混合溶剂中，超声加热至其全部溶解；在冰水浴的条件下将事先准备好的酰氯滴加到上述混合溶液中。滴加时间不少于5min，剧烈搅拌30min，室温下反应20h，用已配置好的5本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.通式(Ⅰ)的化合物

【技术特征摘要】
1.通式(Ⅰ)的化合物其中，取代基R1为甲基或乙基；取代基R2为氯或甲氧基或硝基。2.通式(Ⅱ)的化合物，其中取代基R为氟或甲氧基。3.权利要求1或2所示的通式(I)或(II)的化合物在其药学上可接受的盐。4.权利要求1或2所述的化合物或权利要求3所述的盐在制备用于预防或治疗与细胞周期蛋白依赖性激酶CDK4抑制剂有关的疾病的药物中的应用。5.权利要求1或2所述的化合物或权利要求3所述的盐在制备治疗黑色素瘤、肝癌、胃癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、甲状腺癌、结肠直肠癌、胰腺癌、卵巢癌、乳腺癌、食管癌、胃肠道癌的药物中应用。6.通式(Ⅰ)化合物的制备方法，其特征在于反应历程如式(Ⅲ)，即：a.将色胺溶于水中，逐滴加入浓盐酸直至固体全部溶解，室温恒压滴加当量乙醛酸和KOH溶液调节pH到3-4左右，室温反应4h至固体析出完全，抽滤、滤饼洗涤，再用甲醇重结晶得到中间体1,2,3,4-四氢-β-咔啉-1-羧酸；b.取相应的苯甲酸溶于干燥的THF中，滴加入SOCl2和吡啶，70℃回流1.5h，旋蒸掉溶剂及过量的SOCl2，密封备用；将1,2,3,4-四氢-β-咔啉-1-羧酸溶于NaOH溶液和1,4-二氧六环混合溶剂中，超声加热至其全部溶解；在冰水浴的条件下将事先准备好的酰氯滴加到上述混合溶液中，剧烈搅拌后室温下反应，滴加过量的盐酸到反应溶液中，至沉淀完全析出，抽滤后滤饼水洗涤，得到产物3；c.将产物2溶于甲醇或无水乙醇中，-20℃滴加SOCl2，剧烈搅拌常温下反应，反应完全，旋干溶剂，加入乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺殿，唐磊，朱红甜，胡春红，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：甘肃,62