氨氮降解菌的分离纯化方法、氨氮降解菌种及应用技术

本发明专利技术涉及微生物领域，具体而言，涉及一种氨氮降解菌的分离纯化方法、分离得到的氨氮降解菌种及应用。该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No:15930；保藏时间为：2018年06月11日。该菌株具有优异的氨氮降解效果，而且对于COD和总磷等指标均具有一定降解作用。故该菌株在底泥生物修复工程中具备巨大潜能，应用前景广阔。

【技术实现步骤摘要】
氨氮降解菌的分离纯化方法、氨氮降解菌种及应用
本专利技术涉及微生物领域，具体而言，涉及一种氨氮降解菌的分离纯化方法、分离得到的氨氮降解菌种及应用。
技术介绍
随着我国经济的发展和人们生活水平的提高，由于工业污水排放、畜禽业养殖污水排放、水产养殖污水排放、生活污水排放等引起的水体氨氮污染有加重的趋势，不仅会引起水体中藻类及其它微生物大量繁殖，形成富营养化污染，严重时会引起水中溶解氧的大量消耗，导致水生动物大量死亡，造成生态破坏和一定程度的经济损失。在氨的致死、半致死浓度下，氨可引起养殖动物的肾、脾、甲状腺和血液组织的变化；亚硝酸盐对养殖动物有很强的毒性，严重影响养殖动物的生长、发育。水体中存在的氨氮对养殖的水产品具有一定的毒性，影响了水产品的品质，限制了水产养殖的可持续发展，特别是随着高密度工厂化养殖技术的推广，氨氮污染治理的需求日益突出。尤其是近些年来，城市河道与开放水域水体黑臭问题已严重影响人们正常的经济社会生活，其引发的一系列生态环境问题，不仅会对人体健康、居住环境构成威胁，也严重损坏城市形象。2015年，国务院发布的《水污染防治行动计划》(简称“水十条”)对黑臭水体问题提出明确要求，到2020年，我国地级及以上城市建成区黑臭水体均控制在10％以内；到2030年，城市建成区黑臭水体总体得到消除。由此可见，解决和治理城市水体黑臭问题迫在眉睫。截止目前，黑臭水体的形成机制与污染特点已初步明确，但治理技术仍在不断发展更新中。黑臭水体除氮方法，近些年来国内外主要采用物理、化学和生物方法。在应用物理和化学方法解决黑臭水体脱氮的实践中通常治标不治本，并且费用较高，同时引发了其它生态环境问题，无法实现长期治理目标。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术通过提供新的氨氮降解菌株、该氨氮降解菌的分离纯化方法，以及可用于氨氮降解来解决前述需求，尤其是对于城市污染中的黑臭水体具有很好的治理作用，该方法绿色环保，成本低，耗时时间短，操作方便，通过这种采用生物治理的方法，48小时氨氮降解率可高达80.67％，黑臭水体中的氨氮浓度可以降到非常低，同时对COD和总磷等指标均具有一定降解作用，可见该菌株在底泥生物修复工程中具备巨大潜能，应用前景非常广阔。为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：本专利技术涉及一种分离的氨氮降解菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo:15930；保藏时间为：2018年06月11日。该菌株的菌落形态描述特征为：直或稍弯的革兰氏阴性杆菌，菌落小短杆状，菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐，颜色呈浅乳黄色，中央略凸起。本申请提供的革兰氏阴性杆菌，菌株名为BNN-1，从黑臭底泥中分离得到，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCCNo:15930；保藏时间为：2018年06月11日，检测为存活菌株并保藏。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例1的氨氮降解菌在LB培养基上的生产曲线的测定结果。本申请提供的氨氮降解菌，菌株名为BNN-1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCCNo:15930；保藏时间为：2018年06月11日，检测为存活菌株并保藏。具体实施方式本专利技术涉及一种分离的氨氮降解菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo:15930；保藏时间为：2018年06月11日。该菌株具有很强的氨氮降解能力，尤其是对于城市污染中的黑臭水体具有很好的治理作用，48小时氨氮降解率可高达80.67％，氨氮浓度可以降到非常低，同时对COD和总磷等指标均具有一定降解作用，可见该菌株在底泥生物修复工程中具备巨大潜能，应用前景非常广阔。本专利技术请求保护上述保藏编号的氨氮降解菌株，以及在适度范围内发生突变，且仍然具有很强的氨氮降解能力的突变菌株。在实际应用的过程中，考虑到其可能需要运输等原因，有必要将氨氮降解菌株扩大培养制成组合物(特别是微生物菌剂)的形式以扩大其应用范围。本专利技术的组合物(优选地，在用作发酵剂培养物时)可为纯培养物或混合培养物。所以，本专利技术将纯培养物限定为这样一种培养物，其中全部或基本上全部培养物由本专利技术的同一氨氮降解菌菌株组成。在替代形式中，将混合培养物限定为这样一种培养物，其包含若干种微生物，具体地讲包含若干种细菌菌株，包括本专利技术的氨氮降解菌株所述组合物用于工业，可制成液体、冷冻或干燥粉末形式；或以本行业常用的制剂形式来表述，如颗粒剂、悬浮剂、可湿性粉剂、乳液或液剂。任何载体都可使用，不论它们是固体或液体，只要它们是工业方面常常用的和生物学上惰性的即可。不限于任何特定的载体。本专利技术还提供了一种氨氮降解菌的分离纯化方法，具体包括如下步骤：(A)将黑臭底泥样品接种于富集培养基上，培养驯化得到混合菌液；(B)将所述混合菌液接种到氨氮分离培养基上，采用稀释涂布的方法，多次划线直至得到形态单一的菌落。优选地，所述步骤(A)中，培养温度为25-30℃之间，培养时间为20d以上。优选地，所述步骤(A)中，培养温度为28℃恒温，培养时间为21d。优选地，所述步骤(A)中，所述富集培养基的组成为：葡萄糖8g/L-12g/L、硫酸铵1g/L-3g/L、氯化钠0.5g/L-1.5g/L、磷酸氢二钾0.5g/L-1.5g/L、硫酸镁0.5g/L-1.5g/L、溶剂为水。优选地，富集培养基的组成为：葡萄糖10g/L、硫酸铵2g/L、氯化钠1.0g/L、磷酸氢二钾1.0g/L、硫酸镁1.0g/L、溶剂为水。上述富集培养基可以为液体培养基，也可以为固体培养基(再添加10g/L～20g/L的琼脂)。实际操作时，富集用培养基的组成为：葡萄糖10.0g，硫酸铵2.0g，氯化钠1.0g，磷酸氢二钾1.0g，硫酸镁1.0g，水1000ml。优选地，氨氮分离培养基组成为：葡萄糖4g/L-7g/L、硫酸铵0.1g/L-0.3g/L、氯化钠0.5g/L-1.5g/L、磷酸氢二钾0.3g/L-0.7g/L、硫酸镁0.1g/L-0.3g/L、溶剂为水。更优地，氨氮分离培养基组成为：葡萄糖5g/L、硫酸铵0.25g/L、氯化钠1.0g/L、磷酸氢二钾0.5g/L、硫酸镁0.25g/L、溶剂为水。实际操作时，氨氮降解用分离培养基的组成为：葡萄糖5.0g，硫酸铵0.25g，氯化钠1.0g，磷酸氢二钾0.5g，硫酸镁0.25g，水1000ml。上述氨氮分离培养基可以为液体培养基，也可以为固体培养基(再添加10g/L～20g/L的琼脂)。优选地，所述步骤(B)中，培养温度为28-35℃之间，培养时间为24-48h。更优地，培养温度为30℃恒温。上述方法通过富集、分离纯化的方法从黑臭底泥中最终得到目标菌种，后续对该菌种进行了生长曲线的测定以及对其氨氮降解效果进行了评定，具体可见下述实施例以及实验例的具体过程。下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氨氮降解菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No:15930；保藏时间为：2018年06月11日。

【技术特征摘要】
1.一种氨氮降解菌株，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNo:15930；保藏时间为：2018年06月11日。2.权利要求1所述的氨氮降解菌株在氨氮降解、COD和总磷的降解方面的应用。3.一种氨氮降解菌的分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：(A)将黑臭底泥样品接种于富集培养基上，培养驯化得到混合菌液；(B)将所述混合菌液接种到氨氮分离培养基上，采用稀释涂布的方法，多次划线直至得到形态单一的菌落。4.根据权利要求3所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(A)中，培养温度为25-30℃之间，培养时间为20d以上。5.根据权利要求4所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(A)中，培养温度为28℃恒温，培养时间为21d。6.根据权利要求3所述的分离纯化方法，其特征在于，所述步骤(A)中，所述富集培养基的组成为：葡萄糖8g/L-12g/L、硫酸铵1g/L-3g/L、氯化钠0.5g/L-1.5g/L、磷酸氢二钾0.5g/L-1.5...

【专利技术属性】
技术研发人员：王玉文，韩建均，赵川，梁雪杰，
申请(专利权)人：北京本农科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：北京,11