本发明专利技术提供了AKR1C1、AKR1C2或AKR1C3作为预测吉西他滨或其药学上可接受的盐治疗癌症时的药物敏感性的生物标记物的应用。所述癌症为结肠癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、肝癌、乳腺癌、宫颈癌。利用本发明专利技术所述技术方案来指导临床用药，不但可以避免药物选择的盲目性，避免由于药物选择不当而延误病人病情，而且还能在治疗过程中监控药物治疗效果，实现用药的合理性和个体化治疗的目的。
Biomarkers for predicting gemcitabine susceptibility and their use
The present invention provides the application of AKR1C1, AKR1C2 or AKR1C3 as biomarkers for predicting drug sensitivity of gemcitabine or pharmaceutically acceptable salts for cancer treatment. The cancers are colon cancer, lung cancer, gastric cancer, pancreatic cancer, ovarian cancer, melanoma, liver cancer, breast cancer and cervical cancer. Using the technical scheme of the invention to guide clinical medication can not only avoid the blindness of drug selection, avoid delaying patient's condition due to improper drug selection, but also monitor the effect of drug treatment in the course of treatment, so as to realize the rationality of drug use and the purpose of individualized treatment.
【技术实现步骤摘要】
用于预测吉西他滨药物敏感性的生物标记物及其用途
本专利技术属于分子生物学及医学领域，具体涉及用于预测吉西他滨药物敏感性的生物标记物及其用途。
技术介绍
吉西他滨是目前临床上常用的抗肿瘤化疗药物。盐酸吉西他滨适用于治疗不能手术的晚期或转移性胰腺癌及治疗局部进展性或转移性非小细胞肺癌，与紫杉醇联合，适用于治疗经辅助/新辅助化疗后复发，不能切除的、局部复发或转移性乳腺癌。即使在目前靶向药物和新型免疫治疗药物不断涌现的情况下，吉西他滨仍然具有广泛的临床应用，特别是在胰腺癌领域，吉西他滨是标准治疗药物。但是在临床治疗过程中，不同病人对吉西他滨的敏感性或有效性差别较大，存在原发性和获得性耐药问题。因此，寻找有效的吉西他滨药物敏感性的标记物来指导用药，不但可以避免由于药物选择不当延误病人治疗，而且还能在治疗过程中监控药物治疗效果，实现用药合理性和个体化治疗的目的。目前研究认为吉西他滨耐药主要与其摄取转运过程障碍、胞浆内活化、分解酶异常及DNA修复有关，研究内容包括hENT1(人平衡型核苷转运蛋白1)、RRM1(核糖核苷酸还原酶M1)、RRM2(核糖核苷酸还原酶M2)、dCK(脱氧胞苷激酶)等基因或蛋白。针对这些基因或蛋白的研究也很多，但是不同研究之间的研究结果有差异。例如RolandAndersson(WorldJGastroenterol.2014；20:8482–8490)等研究者对10个临床研究进行了系统回顾，涉及855名患者，分为高和低的hENT1组，研究结果显示高表达hENT病人的总生存期显著长于低表达者。但是在一项随机III期临床研究——CONKO-001临床试验(EurJCancer.2015；51:1546–1554)中接受辅助吉西他滨化疗的患者的组织样本中采用SP120兔单抗通过免疫组化检测hENT1表达，结果证实hENT1没有任何预测作用。而且另一项临床研究(NCT01124786，JClinOncol.2013；31:4453-4461)中同样显示hENT1没有预测吉西他滨敏感性的作用。Fujit等人(Neoplasia.2010；12:807–817)在70例切除的PDAC病人中检测了hENT1、dCK、RRM1、RRM2的mRNA，其中40例病人接受了吉西他滨为基础的辅助化疗。研究结果显示高表达dCK和低RRM2病人的无疾病进展生存期更长。Maréchal等人(Gastroenterology.2012；143:664–674.e1-6)进行的另一项研究显示高表达hENT1和dCK的病人接受吉西他滨辅助治疗时可以预测有更长的生存期。这些研究结果差异较大的原因包括研究者采用的检测方法不同、病人用药情况复杂、肿瘤异质性、样本数量少等。除此之外有可能是没有找到更为精确的预测指标。
技术实现思路
针对目前不同病人对吉西他滨的敏感性或有效性差别较大，存在原发性和获得性耐药问题以及吉西他滨敏感性预测指标的不确定性问题，本专利技术试图寻找到新的更精确的吉西他滨敏感性预测指标。醛酮还原酶(aldo.ketoreductase，AKR)超家族共有15个家族，其中人源AKR成员共有15个。大多数AKR成员均能以烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸NADP为辅因子催化简单的氧化还原反应。它们作用底物范围广泛，包括糖类、脂肪醛、甾体类激素、前列腺素和致癌物等。因此，AKR超家族成员可能是在激素合成、药物代谢、炎症反应、致癌物解毒等生命活动中发挥重要作用的酶类。研究表明，人源AKR超家族成员与多种肿瘤发生发展具有相关性，其活性高低与肿瘤的进展及治疗效果密切相关。越来越多的证据表明(国际肿瘤学.2013；40(1):43-46)，AKR超家族部分成员与肿瘤抗药性相关。AKRlB10成为吸烟相关非小细胞肺癌，尤其肺鳞癌的早期诊断标志物，而AKR1C1～3在肺癌多种化疗药物耐受过程中的作用特征使其成为预后预测的重要因子，也为提高肺癌药物敏感性提供了有效的作用靶点。但是关于AKR家族与吉西他滨耐药性的关系从未有研究或报道。本专利技术首次发现了醛酮还原酶(aldo.ketoreductase，AKR)家族成员AKR1C1、AKR1C2、AKR1C3家族与吉西他滨耐药性有关。本专利技术在29个裸鼠肿瘤移植瘤模型中研究了吉西他滨药物敏感性与AKR1C1～C3表达的相关性。研究结果表明在11个AKR1C1～C3高表达的模型中，9个模型结果显示吉西他滨药效差，表现不敏感性；在18个AKR1C1～C3低表达的模型中，17个模型结果显示吉西他滨药效好，表现敏感性。因此，本专利技术的目的在于提供用于预测吉西他滨或其药学上可接受的盐治疗癌症时的药物敏感性的生物标记物AKR1C1、AKR1C2、AKR1C3及其用途。具体的，本专利技术提供了AKR1C1、AKR1C2或AKR1C3作为预测吉西他滨或其药学上可接受的盐治疗癌症时的药物敏感性的生物标记物的应用。进一步的，所述的癌症为结肠癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、黑色素瘤、肝癌、乳腺癌、宫颈癌。本专利技术的有益效果：利用醛酮还原酶(aldo.ketoreductase，AKR)家族成员AKR1C1、AKR1C2或AKR1C3作为预测吉西他滨治疗癌症时的药物敏感性的生物标记物来指导临床用药，不但可以避免药物选择的盲目性，避免由于药物选择不当而延误病人病情，而且还能在治疗过程中监控药物治疗效果，实现用药的合理性和个体化治疗的目的。附图说明图1AKR1C1～C3在不同细胞中的表达量分析。GAPDH或β-tubulin作为内参。条带灰度值越高表示对应蛋白的表达量越高。图2吉西他滨在不同结肠癌裸鼠移植瘤模型中的抗肿瘤作用图3吉西他滨在不同肺癌裸鼠移植瘤模型中的抗肿瘤作用图4吉西他滨在不同胃癌裸鼠移植瘤模型中的抗肿瘤作用图5吉西他滨在不同胰腺癌裸鼠移植瘤模型中的抗肿瘤作用图6吉西他滨在不同卵巢癌裸鼠移植瘤模型中的抗肿瘤作用图7吉西他滨在MDA-MB-435黑色素瘤裸鼠移植瘤模型中的抗肿瘤作用具体实施方式以下内容将进一步说明本专利技术，但不应被理解为限制本专利技术的主旨和保护范围。实验一：蛋白质免疫印迹(Westernblot,WB)实验原理：经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacryamidegelelectrophoresis,PAGE)分离的蛋白质样品,转移并结合到固相载体上(如硝酸纤维素膜,二氟化树脂膜等)，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，其对应的抗体能识别并与之结合，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测目的蛋白的表达量。实验目的：检测AKR1C1～C3蛋白在不同细胞中的表达。实验材料：细胞：人结肠癌细胞CW-2，LoVo，HCT116，SW620，COLO205，HT-29，RKO，DLD-1,NCI-H716，SW1116,SW948；人肺癌细胞NCI-H292，A549，NCI-H460，NCI-H1650，HCC827，NCI-H1299，NCI-H1975，SK-MES-1，NCI-H1437，NCI-H1944；人胃癌细胞BGC-823，HGC-27，SGC-7901，KATOIII，NCI-N87，SNU-1；人胰腺癌细胞AsPC-1，BxPC-3，PANC-1，Capan-2，CFPAC-1本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.AKR1C1、AKR1C2或AKR1C3作为预测吉西他滨或其药学上可接受的盐治疗癌症时的药物敏感性的生物标记物的应用。
【技术特征摘要】
1.AKR1C1、AKR1C2或AKR1C3作为预测吉西他滨或其药学上可接受的盐治疗癌症时的药物敏感性的生物标记物的...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨岚，王凤，郭殿武，单佳祺，冯飞玉，郭文广，
申请(专利权)人：杭州源昶医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。