一种纳米载体及其外用制剂的制备和应用方法技术

本发明专利技术公开了一种纳米载体及其外用制剂的制备和应用方法，其步骤是：按比例称取处方量卵磷脂、胆固醇、维生素E与适量所要载药品有效成分。将上述成分一起溶解于适量无水乙醇溶液中，通过超声混和旋转蒸发，使卵磷脂等成膜材料在容器壁上形成均匀的薄膜。然后加入按上述比例量取的去氧胆酸钠和适量PBS溶液，常压旋转蒸发洗膜，即得传递体粗制混悬液。然后经过冰水浴超声，过0.22µm微孔滤膜，即得到所载药物主要有效成分的传递体混悬液。采用包封率为考察指标通过正交试验设计优选最佳处方和工艺，并用Zetasizer电位及纳米粒度分析仪测定其ζ电位并分析其纳米粒径大小，用紫外分光光度法测定药物的包封率等药学质量标准。

Preparation and application of a nano-carrier and its external preparation

The invention discloses a preparation and application method of a nano carrier and its external preparation. The steps are as follows: taking prescription amount of lecithin, cholesterol, vitamin E and the active ingredient of the drug to be loaded in a proper proportion. The above components were dissolved in an appropriate amount of anhydrous ethanol solution, and the uniform film was formed on the wall of the container by ultrasonic mixing and rotary evaporation. Then, sodium deoxycholate and appropriate PBS solution were added in the proportion mentioned above, and the membrane was washed by rotating evaporation at atmospheric pressure, which resulted in crude suspension of the transporter. Then, through ice-water bath ultrasound and 0.22 m microporous membrane, the carrier suspension containing the main active ingredients of the drug was obtained. The optimum prescription and process were optimized by orthogonal design. Zetasizer potential and nanoparticle size analyzer were used to determine zeta potential and nanoparticle size. Pharmaceutical quality standards such as drug encapsulation efficiency were determined by ultraviolet spectrophotometry.

【技术实现步骤摘要】
一种纳米载体及其外用制剂的制备和应用方法
本专利技术涉及纳米生物医药材料和新型药物制剂
，更具体涉及一种纳米载体及其外用制剂的制备和应用方法，适用于临床外用系列的医疗药品和产品中。
技术介绍
传递体是将膜软化剂主要指表面活性剂(如胆酸盐或脱氧胆酸盐等)加到制备脂质体的类脂材料中制成的新型多功能透皮药物载体。具有高效渗透性、高度柔韧性、高度自身形变性，可高效穿过比其小数倍的皮肤孔道，结构类似生物膜，可使大、小分子药物和水、脂溶性药物穿透全皮进入体循环。多数药物的主要有效成分具有强亲脂性，制成传递体是增加外用药物溶解度的良好方法。而且由于传递体具有高度的亲水性和柔韧性，在水化力的作用下可以自如地穿过自身直径l/10～l/4大小的孔道，使所载药物穿过皮肤屏障进入皮肤深部甚至体循环，透皮速率高，皮肤残留累积量小，药物的累积透过量高，因此选用传递体这一新型外用透皮药物制剂技术制备纳米载体。当前已经有一些传递体的制备技术方法，如逆相蒸发法、硫酸胺梯度法、复乳法等此类方法制作的传递体，多形状不规则，大小不均匀，也极易造成包封率低，影响使用。我们专利技术了一种超声薄膜超声法并结合外用药物基质制剂技术制备一种新型外用传递体制剂。而且本法制备的传递体圆整均匀，粒径较小且操作简便适合于实验室制备和研究，适合制备包裹诸如大黄素等脂溶性及水溶性极低的药物[6]。薄膜超声法制备大黄素传递体时，虽然制备时间较长，但是得到的体系均匀稳定，包封率高，重现性好。其次表面活性剂的添加与否是传递体与常规脂质体最主要的区别。由于磷脂分子中有不饱和脂肪酸链，过高的温度下游离离子等会使磷脂疏水链断裂，分子膜流动性降低，药物泄漏加剧。本专利技术考察了去氧胆酸盐作为表面活性剂添加后对传递体稳定性与包封率的影响，结果表明使用去氧胆酸钠作为表面活性剂，且去氧胆酸钠/磷脂1：8时，制备的纳米载体包封率高，稳定性好。载药量与磷脂用量的比例也对传递体有影响。载药量过大时所形成的传递体的数量相对而言会比较少，多余的药物无法被包入形成的传递体中，造成较低的包封率。此外，当外水相中的游离药物较多时，对形成的传递体的稳定性也会造成很大的影响，易出现沉淀。载药量过小时，传递体外部水相中药物浓度过低，形成的浓度梯度不足以让更多的药物包入传递体中。本专利技术通过正交设计实验验证，当药脂比为1：6时可以得到最优效果。另外，传递体粒径大小与胆固醇用量有关，随胆同醇用量减少而减少，而传递体的包封率则相反。因此在优选配方时，应根据要求综合两因素，合理选择胆固醇用量。正交实验得到最佳配方为磷脂/胆固醇3：l。有人在研究不同抗氧剂对大豆卵磷脂脂质体的抗氧化作用时证实维生素E有很好的抗氧化作用。故我们本专利技术中添加维生素E作为传递体抗氧化剂，正交实验验证最佳配方为维生素E/磷脂1：20。后续实验应进一步深入稳定性研究，本专利技术的实验只考察了载药主要有效成分传递体制剂在三个月时间内的稳定性，应继续进行稳定性考察；还应从化学稳定性方面检测在储存过程中磷脂氧化指数、有无溶血物质产生等化学指标值，进而更全面评价选择薄膜超声法和此专利技术过程中使用的实验正交优选处方制备的纳米载体外用制剂的稳定性。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种纳米载体及其外用制剂的制备和应用方法，操作简便，方法易行，制备的纳米载体外用制剂形状规则、性质稳定、包封率较高，重现性良好，粒径尺寸符合药物通透皮肤设计要求，粒度分布窄、均匀圆整、分散性好、相互之间没有聚集现象，方便直接使用，疗效安全可靠。为了实现上述目的，本专利技术采用以下制备技术措施：一种纳米载体及其外用制剂的制备和应用方法，其步骤是：(1)、称量：按比例称取处方量卵磷脂、胆固醇、维生素E与适量所要载药品有效成分(质量比的具体数值为胆固醇/磷脂质量1：3，载药质量/磷脂1：6，去氧胆酸钠/磷脂质量1：8，维生素E/磷脂质量1：20)。将上述成分一起溶解于适量无水乙醇溶液中；(2)、成膜：将混合体超声至均一状态完全溶解药品后水浴47℃下旋转至恒温，再用抽真空设备缓慢减压把乙醇蒸干，使圆底锥形容器壁上形成均匀薄膜，继续减压至0.09MPa保持30min，将有机溶剂完全蒸干之后缓慢升至大气压；(3)、洗膜：向圆底锥形容器加入含按步骤1的比例称量好的去氧胆酸钠和适量的pH值为7.0的PBS缓冲溶液，47℃水浴震荡水化1h使薄膜脱落形成载药脂质体混悬液，再通过冷水浴超声10min过0.22μm微孔滤膜，即成水溶性纳米载体悬浊液。将制得的传递体全部转移至固定体积的容量瓶中，用PBS缓冲溶液稀释至刻度，混合均匀；(4)、验证：精密量取2.0mL于离心管中，1000r/min，20s/次，离心6次，弃去上层清液，精密加入5.0mL无水乙醇(色谱纯)溶解，以乙醇为参比测定吸光度(A)，计算包封率；(5)、制剂：后将水溶性纳米载体悬浊液按重量比30:3:1加至甘油和羧甲基纤维素钠中研磨混匀，即成载药有效成分传递体外用制剂。本专利技术与现有制备技术相比，具有以下优点及效果：1、本专利技术采用超声薄膜分散法制备纳米载体混悬液，按优选处方和工艺制备3批纳米载体，测得平均包封率为(69.35±0.25)％。证明该制备处方工艺制得的传递体包封率较高，重现性良好，稳定可靠。2、一般理化性质和理化常数考察发现，本制备的各批纳米载体一般性状为无特殊气味，溶液澄清，有极少量沉淀，振摇后均匀分散、无结块、无杂物。细菌热原或细菌内毒素等微生物限度符合2005年版《中国药典》有关的各项规定(细菌数≤100个/ml，霉菌和酵母菌≤100个/ml，铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌未检出)，并用pH酸度计测定3批传递体混悬液的pH值＝7.0±0.2。3、本制备的纳米载体的形态观察：按正交实验优化的处方工艺条件制备传递体，取各批传递体样品适量，用PBS磷酸盐缓冲液稀释后，1％磷钼酸盐负染，自然挥干，静置使传递体在铜网上沉积，在透射电子显微镜观察并拍照。形态学特征测定结果：传递体为透明胶体，在透射电镜下，形态呈完整圆球形或椭圆形的球粒，表面光滑，形状规则，根据放大倍数计算其平均粒径，粒径约为290±2nm，粒度分布窄、均匀圆整、分散性好、相互之间没有聚集现象。4、本制备的纳米载体的加热破坏试验结果：取超声薄膜分散法、逆相蒸发法、硫酸胺梯度法、复乳法制备相同所载药品的传递体适量，于±90℃水浴加热破坏，观察分层、聚集、破乳等现象的发生。各种制备方法出现传递体聚集现象的先后顺序是逆相蒸发法、硫酸胺梯度法、复乳法、薄膜分散法。逆相蒸发法出现脂质体聚集现象的时间是10min，薄膜分散法出现脂质体聚集现象的时间是45min。说明本专利技术的超声薄膜分散法制备的传递体热稳定性较好。5、本品的贮存稳定性试验结果：将制备好的传递体样品分别贮存于室温(±25℃)下和冰箱(±4℃)中放置3个月，观察传递体外观形态、分散性，取样测定其包封率变化。结果发现，在冷藏条件时本品在1个月内外观无变化，在2个月时有分层现象发生，轻轻振摇就可基本恢复到初始胶体状态；而在室温条件下贮存时，传递体在1个月内便出现不可逆性沉淀现象，颗粒变大，表明在室温条件下放置传递体不稳定，出现沉淀，而在冷藏条件下，粒径有所增加，但仍符合要求，说明所制备的传递体需在冷藏条件下保存。粒径和包封率变化本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种纳米载体及其外用制剂的制备和应用方法，其步骤是：（1）、称量：按最佳制备配方比例精密称取卵磷脂、胆固醇、维生素E和所要载药品（质量比的具体数值为胆固醇/磷脂质量1：3，载药质量/磷脂1：6，去氧胆酸钠/磷脂质量 1：8，维生素E/磷脂质量1：20，此为我们大量实验验证后的最优水平组合）；将称量精确的上述原料放入固定容积的圆底锥形容器中，加入适量乙醇溶解；（2）、成膜：将混合体超声至均一状态完全溶解药品后水浴47℃下旋转至恒温，再用冲真空设备缓慢减压把乙醇蒸干，使圆底锥形容器壁上形成均匀薄膜，继续减压至0.09 MPa保持30 min，将有机溶剂完全蒸干之后缓慢升至大气压；（3）、洗膜：向圆底锥形容器加入含按步骤1的比例称量好的去氧胆酸钠和适量的pH值为7.0的PBS缓冲溶液，47℃水浴震荡水化1 h使薄膜脱落形成载药脂质体混悬液，再通过冷水浴超声10 min过0.22 µm微孔滤膜，即成水溶性纳米载体悬浊液；将制得的传递体全部转移至固定体积的容量瓶中，用PBS缓冲溶液稀释至刻度，混合均匀；（4）、验证：精密量取2.0 mL于离心管中，1000 r/min，20s/次，离心6次，弃去上层清液，精密加入5.0 mL无水乙醇（色谱纯）溶解，以乙醇为参比测定吸光度（A），计算包封率；（5）、制剂：后将水溶性纳米载体悬浊液按重量比30:3:1加至甘油和羧甲基纤维素钠中研磨混匀，即成载药有效成分传递体外用制剂。...

【技术特征摘要】
1.一种纳米载体及其外用制剂的制备和应用方法，其步骤是：（1）、称量：按最佳制备配方比例精密称取卵磷脂、胆固醇、维生素E和所要载药品（质量比的具体数值为胆固醇/磷脂质量1：3，载药质量/磷脂1：6，去氧胆酸钠/磷脂质量1：8，维生素E/磷脂质量1：20，此为我们大量实验验证后的最优水平组合）；将称量精确的上述原料放入固定容积的圆底锥形容器中，加入适量乙醇溶解；（2）、成膜：将混合体超声至均一状态完全溶解药品后水浴47℃下旋转至恒温，再用冲真空设备缓慢减压把乙醇蒸干，使圆底锥形容器壁上形成均匀薄膜，继续减压至0.09MPa保持30min，将有机溶剂完全蒸干之后缓慢升至大气压；（3）、洗膜：向圆底锥形...

【专利技术属性】
技术研发人员：卢坤，
申请(专利权)人：卢坤，
类型：发明
国别省市：江苏,32