【技术实现步骤摘要】
一种结合诱导DNA组装荧光检测器件及利用其检测小分子含量的方法
本专利技术属于检测
,具体涉及一种基于结合诱导DNA组装荧光检测器件及检测小分子含量的方法。
技术介绍
结合诱导DNA组装技术是指当含有核苷酸的识别探针,特异性结合目标分子时,引发DNA组装反应,产生荧光检测信号。即只有当特定的目标分子引起特异性结合反应时,才可以实现DNA的组装。该技术需要两个亲和配基来识别同一个目标分子,多用于蛋白质和核酸等大分子检测。现有结合诱导DNA组装技术不适用于小分子检测,因为小分子无法同时提供两个亲和配基用于特异性结合反应。抗原抗体特异性结合反应是免疫检测的基本原理。免疫竞争反应是利用目标物与抗原竞争性结合抗体的反应,实现目标物的定性或定量检测。免疫荧光检测技术主要是将检测元件与荧光基团通过化学反应进行标记,然后利用目标物含量与荧光强度之间的关系,实现目标物的定量检测。然而该方法存在荧光背景值高的弊端。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是针对现有技术的不足而提供一种结合诱导DNA组装荧光检测器件及检测小分子的方法。为了实现上述目的,本专利技术采用以下技术方案:本 ...
【技术保护点】
1.一种结合诱导DNA组装荧光检测器件,其特征在于:包括识别元件和信号元件,所述的识别元件包括胶体金、胶体金表面修饰的与待检测小分子对应的特异性抗体和一段DNA序列即辅助探针AO;所述的信号元件包括DNA序列,DNA序列一端标记有荧光基团,另一端连接有待检测小分子抗原,标记有荧光基团一端处的一段DNA序列C1*和辅助探针AO自由端处的一段序列C1互补,信号元件的中部可自由弯曲。
【技术特征摘要】
1.一种结合诱导DNA组装荧光检测器件,其特征在于:包括识别元件和信号元件,所述的识别元件包括胶体金、胶体金表面修饰的与待检测小分子对应的特异性抗体和一段DNA序列即辅助探针AO;所述的信号元件包括DNA序列,DNA序列一端标记有荧光基团,另一端连接有待检测小分子抗原,标记有荧光基团一端处的一段DNA序列C1*和辅助探针AO自由端处的一段序列C1互补,信号元件的中部可自由弯曲。2.根据权利要求1所述的检测器件,其特征在于:所述的信号元件包含抗原和两个DNA序列探针:连接探针LO和信号探针SO;连接探针LO上连接有待检测小分子抗原;信号探针SO含有三部分,信号探针的一端标记有荧光基团,标记有荧光基团一端处的一段DNA序列C1*和信号探针另一端处的一段DNA序列C2*分别与AO自由端处的一段序列C1和连接探针LO自由端处的一段序列C2互补,信号探针的中部可自由弯曲。3.根据权利要求1或2所述的检测器件,其特征在于:所述信号探针的中部为由多个T碱基形成的可自由弯曲的臂。4.根据权利要求1所述的检测器件,其特征在于:所述的待检测小分子为黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、T-2毒素真菌毒素,与待检测小分子对应的特异性抗体分别为抗黄曲霉毒素抗体、抗赭曲霉毒素抗体、抗玉米赤霉烯酮抗体和抗T-2毒素抗体。5.根据权利要求1所述的检测器件,其特征在于:待检测小分子抗原与连接探针通过共价结合连接;所述的荧光基团为Cy3、Cy5、异硫氰酸荧光素、羧基荧光素荧光基团。6.根据权利要求1所述的检测器件,其特征在于:所述的辅助探针AO的DNA序列为:5’-巯基-TTTTTAGCAGTGT-3’;所述连接探针的DNA序列和信号探针的DNA序列分别为:连接DNA:5’-GGTCGTGACAGGATTTTT-巯基-3’;信号DNA:5’-TCCTGTCACGACCTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTCACTGCT-荧光基团-3’。7.权利要求1所述的检测器件的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:(1...
【专利技术属性】
技术研发人员:张兆威,许琳,李培武,张奇,张文,姜俊,
申请(专利权)人:中国农业科学院油料作物研究所,
类型:发明
国别省市:湖北,42
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