The invention relates to an Enterobacter aerogenesa ZJB 17003 and its application. The enantioselectivity of N Phenylacetyl DL amino acid to L amino acid is 99%, and 2 N [hydroxy (methyl) phosphoryl] butyric acid to 2 amino [hydroxy (methyl) phosphoryl] butyric acid is 99%.
【技术实现步骤摘要】
产气肠杆菌ZJB-17003及其应用(一)
本专利技术涉及一株产酰胺水解酶的菌株——产气肠杆菌(Enterobacteraerogenesa)ZJB-17003,及其在催化N-苯乙酰基氨基酸制备手性氨基酸与催化N-苯乙酰-DL-氨基酸衍生物的N-苯乙酰-L-氨基酸衍生物中的应用。(二)
技术介绍
L-草铵膦化学名称为:4-[羟基(甲基)膦酰基]-L-高丙氨酸,是L-谷氨酸的一种结构类似物,能抑制谷氨酰胺合成酶(GS)活性,使植物体内氨积累,高浓度氨气积累阻断植物光呼吸作用,叶绿体结构的破坏以及基质的囊泡化,同时氨基酸合成受阻,导致细胞膜受损和细胞死亡,从而杀灭杂草。其具有广谱性,是世界第二大转基因作物耐受除草剂。目前L-草铵膦合成方法有化学合成法和生物合成法。化学法主要通过以下4种方式构建L-草铵膦的手性中心:1)利用手性辅助试剂,手性诱导构建手性中心;2)以天然氨基酸为手性源,转化得到L-草铵膦;3)由手性催化剂催化的不对称合成反应;4)手性拆分外消旋体。但是化学法合成L-草铵膦工序多,收率较低,手性试剂成本高昂,且产生的三废量大,处理比较困难。生物法则具有严格的立体选择性,温和的反应条件、较高的收率和易于分离纯化等优势,因此,生物法生产L-草铵膦技术具有十分重要的产业化开发价值。生物法生产L-草铵膦根据作用底物不同有蛋白酶水解双丙氨膦、通过磷酸二酯酶I、酰胺酶I和谷氨酰胺酶分步协同作用保持光学活性水解L-3-乙酰氨基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酰胺、α-胰凝乳蛋白酶的拆分双丙氨膦乙酯、脱乙酰基酶拆分N-乙酰-草铵膦、酰胺酶拆分2-氨基-4-(羟基甲基膦酰 ...
【技术保护点】
1.产气肠杆菌(Enterobacter aerogenesa)ZJB‑17003,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCC NO:M 2017599,保藏日期2017年10月23日,地址:中国·武汉·武汉大学,430072。
【技术特征摘要】
1.产气肠杆菌(Enterobacteraerogenesa)ZJB-17003,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号CCTCCNO:M2017599,保藏日期2017年10月23日,地址:中国·武汉·武汉大学,430072。2.一种权利要求1所述产气肠杆菌ZJB-17003在催化2-N-苯乙酰基-4-[羟基(甲基)磷酰基]-DL-丁酸制备2-N-苯乙酰基-4-[羟基(甲基)磷酰基]-L-丁酸中的应用。3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述的应用以产气肠杆菌ZJB-17003经发酵培养所获得的湿菌体为催化剂,以2-N-苯乙酰基-4-[羟基(甲基)磷酰基]-DL-丁酸为底物,以缓冲液为反应介质构成pH值为8.5的反应体系,在25-55℃,100-200rpm条件下进行转化反应,反应结束后,反应液经分离纯化得到2-氨基-4-[羟基(甲基)磷酰基]-L-丁酸。4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述反应体系中,催化剂用量以湿菌体重量计为10-200g/L,底物初始加入终浓度为10-500mM。5.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述反应液分离纯化的方法为:反应结束后,将反应液用二氯甲烷萃取,将水层调pH至1.0-5.0,以1-6.0Bv/h的速度上样进行离子交换层析,先用去离子水洗涤,再用0.2-4.5M的氨水以0.5-3.0Bv/h进行洗脱,收集含目标组分的洗脱液,减压蒸馏至膏状,用甲醇溶解重结晶,取晶体干燥,得到2-氨基-4-[羟基(甲基)磷酰基]-L-丁酸。6.一种权利要求1所述产气肠杆菌ZJB-17003在催化N-苯乙酰-DL-氨基酸制备L-氨基酸的应用。7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述的应用以产气肠杆菌ZJB-17003经发酵培养获得的湿菌体为催化剂,以N-苯乙酰-DL-氨基酸为底物,以缓冲液为反应介质构成pH8.5的转化体系,在25-55℃,100-200rpm条件下进行转化反应,反应结束后,反应液经分离纯化,得到N-苯乙酰-L-氨基酸。8...
【专利技术属性】
技术研发人员:柳志强,郑裕国,康雪梅,张晓健,金利群,
申请(专利权)人:浙江工业大学,
类型:发明
国别省市:浙江,33
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