CD31制造技术

本发明专利技术涉及CD31

CD31

The present invention relates to CD31.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD31SHED作为分子靶标用于炎症成像
本专利技术涉及炎症部位的分子成像，特别是用于确定受试者是否患有炎性病况或者处于患有或发展炎性病况的风险中，以及用于监测抗炎治疗后炎性病况程度的变化。
技术介绍
炎症部位的成像是诊断炎性病况的有用工具。炎症中高水平的葡萄糖代谢已经促进了使用18F-FDG(2-脱氧-2-18F-氟代-D-葡萄糖)PET。然而，18F-FDG的特异性差，且其在心脏、肺和脑中的高生理摄取限制了其使用。因此，需要用于成像炎症组织的更特异性的靶标。CD31是由白细胞、血小板和内皮细胞组成型表达的跨膜糖蛋白受体。它由单链分子组成，所述单链分子包含六个Ig样细胞外结构域、短跨膜区段和细胞质尾，所述胞质尾包含充当基于免疫受体酪氨酸的抑制基序(ITIM)的两个重要的基于酪氨酸的基序(围绕Y663和Y686)。CD31的结构在下表1中显示。表1：CD31的结构由于同嗜性和抑制性功能，CD31在循环稳态中发挥了关键作用。在促炎情况下，受体的同嗜性部分由于切割而丧失，活化细胞表达CD31的截短形式。WO2010/000756确实公开了CD31在活化的/记忆T淋巴细胞上在第五和第六细胞外Ig样结构域间脱落，而WO2013/152919公开了活化的血小板也表达在第六细胞外结构域和近膜序列间截短的CD31。然后CD31的这两种类型的脱落的细胞外序列(称为“可溶性CD31”)释放到循环中，在此它们与健康内皮细胞生产的CD31的可溶性剪接变体共同呈递。脱落后仍锚定在膜上的剩余的小的CD31胞外域称为“CD31shed”。WO2010/000756和WO2013/152919公开了基于检测个体生物样品中所述可溶性CD31而诊断血栓形成或自身免疫病症的方法。WO2010/000741公开了对应于CD31胞外域的近膜氨基酸的肽，其能够通过特异性靶向活化的白细胞和血小板上的CD31shed来挽救CD31的生理免疫调节功能。此类肽可用于治疗血栓形成或自身免疫病症。WO2013/190014进一步公开了在细胞外CD31的膜近端部分内的8个氨基酸的特定肽，其可用于治疗血栓形成或炎性病症并显示更适合药物开发的物理化学性质。仍然需要成像和诊断炎性病况的可靠方案。
技术实现思路
本专利技术人令人预想不到地发现，CD31shed本身可以用作诊断炎性病况的分子靶标，特别是通过允许炎症部位的分子成像。实际上，令人惊奇地发现，CD31shed以使用标记的CD31shed配体时允许获得可检测信号的量存在于活化的细胞上，而对应于活化的循环细胞和未涉及炎症的其它器官或细胞上存在的CD31shed的噪声信号微乎其微，从而产生了好的信噪比。他们确实在炎症动物模型中体内证明，向所述动物施与特异于CD31shed的放射性标记的CD31shed配体允许定位炎症部位，这归因于放射性标记的CD31shed配体与表达CD31shed的活化细胞的特异性结合及其随后在炎症部位的富集，而剩余的放射性标记的CD31shed配体从动物体内快速清除。在该上下文中，本专利技术人使用了序列SEQIDNO：6的肽P8RI，其由经由PEG间隔物偶联到HYNIC(6-肼吡啶-3-羧酸)并用99mTc放射性标记的D-对映异构体氨基酸组成。发现所述放射性标记的CD31shed配体在体外和体内都稳定并特异于CD31shed，与血浆蛋白仅有非常低的结合。因此，能够特异性结合CD31shed的标记的CD31shed配体，特别是小肽，可用作炎症分子成像的示踪物。因此，本专利技术的一个目的在于标记的CD31shed配体，其包含CD31shed配体和至少一种成像标记，优选至少一种放射性核素。所述CD31shed配体优选是：a)肽，其选自由以下组成的组：(i)由通过序列SEQIDNO:1的氨基酸579至601所定义的序列的3至15个氨基酸的片段组成的肽，(ii)由非人哺乳动物CD31中对应于序列SEQIDNO:1的氨基酸579至601的序列的3至15个氨基酸的片段组成的肽，(iii)由与肽(i)的序列具有至少70％同一性的序列组成的3至15个氨基酸的肽，(iv)由肽(i)、(ii)或(iii)的逆反(retro-inverso)序列组成的肽，和(v)肽(i)、(ii)、(iii)或(iv)，其包含至少一种或者至少一种其它化学修饰，或b)所述肽a)的肽模拟物。(v)的CD31shed配体优选包含至少一个D-对映异构体形式的氨基酸。CD31shed配体优选选自由以下组成的组：序列SEQIDNO:2的肽、序列SEQIDNO:3的肽、序列SEQIDNO:4的肽、序列SEQIDNO:5的肽、由D-对映异构体氨基酸组成的序列SEQIDNO:6的肽、序列SEQIDNO:7的肽和由D-对映异构体氨基酸组成的序列SEQIDNO:8的肽。优选的CD31shed配体是序列SEQIDNO:5的肽或由D-对映异构体氨基酸组成的序列SEQIDNO:6的肽。标记的CD31shed配体的放射性核素优选地可以通过分子成像技术检测，如正电子发射断层扫描(PET)、单光子发射计算机断层扫描(SPECT)、SPECT和/或PET的混合形式，或其组合。例如，放射性核素是锝-99m(99mTc或99mTc)、镓-67(67Ga)、镓-68(68Ga)、钇-90(90Y)、铟-111(111In)、铼-186(186Re)、氟-18(18F)、铜-64(64Cu)或铊-201(201TI)。优选的标记的CD31shed配体包含作为CD31shed配体的由D-对映异构体氨基酸组成的序列SEQIDNO：6的肽和作为放射性核素的99mTc。在一个优选的实施方案中，CD31shed配体与HYNIC(6-肼吡啶-3-羧酸)偶联，任选地经由至少一个间隔物。本专利技术的另一个目的涉及如上所定义的标记的CD31shed配体，用作用于成像炎症部位的分子成像剂，特别是用于确定受试者是否患有炎性病况，是否处于患有炎性病况的风险中或是否处于抗炎治疗后炎性病况复发的风险中，或用于监测炎性病况的治疗效果。本专利技术还涉及如上所定义的标记的CD31shed配体作为分子成像剂，特别是用于成像炎症部位的分子成像剂的用途。本专利技术的另一个目的涉及一种方法，优选一种体外方法，其用于确定受试者是否患有炎性病况，是否处于患有炎性病况的风险中或是否处于抗炎治疗后炎性病况复发的风险中，或用于监测炎性病况的治疗效果，其中所述方法包括：用如上所定义的标记的CD31shed配体检测获自受试者的生物样品中细胞表面上CD31shed的存在。本专利技术的另一个目的涉及CD31shed，用作用于成像炎症部位的分子成像剂，更特别地，用于确定受试者是否患有炎性病况，是否处于患有炎性病况的风险中，是否处于抗炎治疗后炎性病况复发的风险中，或用于监测炎性病况的治疗效果。本专利技术还涉及CD31shed用作分子成像剂，特别是用于成像炎症部位的分子成像剂的用途。炎性病况炎性病况存在于大量疾病中。例如，免疫系统经常涉及到炎性病况中，如在变态反应和一些肌病中所证实的，其中许多免疫系统病症导致了异常炎症。如本说明书通篇所用，术语“炎性病况”包括但不限于慢性炎性病况，免疫病症，自身免疫病症，急性和慢性给予性同种免疫病况(grantalloimmun本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.标记的CD31shed配体，其包含CD31shed配体和至少一种成像标记。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.05.03 EP 16305516.31.标记的CD31shed配体，其包含CD31shed配体和至少一种成像标记。2.根据权利要求1所述的标记的CD31shed配体，其中所述成像标记是放射性核素。3.根据权利要求1或2所述的标记的CD31shed配体，其中所述CD31shed配体是肽、肽模拟物、化学化合物、抗体或适体。4.根据权利要求3所述的标记的CD31shed配体，其中所述抗体是单结构域抗体或scFv片段。5.根据权利要求1-3任一项所述的标记的CD31shed配体，其中所述CD31shed配体是：a)肽，其选自由以下组成的组：(i)由通过序列SEQIDNO:1的氨基酸579至601所定义的序列的3至15个氨基酸的片段组成的肽，(ii)由非人哺乳动物CD31中对应于序列SEQIDNO:1的氨基酸579至601的序列的3至15个氨基酸的片段组成的肽，(iii)由与肽(i)的序列具有至少70％同一性的序列组成的3至15个氨基酸的肽，(iv)由肽(i)、(ii)或(iii)的逆反序列组成的肽，和(v)肽(i)、(ii)、(iii)或(iv)，其包含至少一种或者至少一种其它化学修饰，或b)所述肽a)的肽模拟物。6.根据权利要求5所述的标记的CD31shed配体，其中所述CD31shed配体选自由以下组成的组：序列SEQIDNO:2的肽、序列SEQIDNO:3的肽、序列SEQIDNO:4的肽、序列SEQIDNO:5的肽、由D-对映异构体氨基酸组成的序列SEQIDNO:6的肽、序列SEQIDNO:7的肽和由D-对映异构体氨基酸组成的序列SEQIDNO:8的肽。7.根据权利要求5或6所述的标记的CD31shed配体，其中所述CD31shed配体是序列SEQIDNO:5的肽或由D-对映异构体氨基酸组成的序列SEQIDNO:6的肽。8.根据权利要求2-7任一项所述的标记的CD31shed配体，其中所述放射性核素可以通过正电子发射断层扫描(PET)，单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，SPECT和/或PET的混合形式，或其组合检测。9.根据权利要求2-8任一项所述的标记的CD31shed配体，其中所述放射性核素是锝-99m(99mTc)、镓-67(67Ga)、镓-68...

【专利技术属性】
技术研发人员：S·巴伊，A·尼克莱蒂，D·勒古卢德克，J·维格尼，G·卡利朱里，
申请(专利权)人：法国国家健康和医学研究院，巴黎大学迪德罗特第七分校，巴黎第十三大学，巴黎公共救济院，巴斯德研究院，国家科学研究中心，
类型：发明
国别省市：法国,FR