用于治疗癌症的组合物和方法技术

本发明专利技术提供了用于治疗实体癌和血液癌(包括急性骨髓性白血病(AML))的组合物和方法。所述方法包括施用截断的显性负性形式的半乳糖凝集素‑3。

Compositions and methods for the treatment of cancer

The invention provides a combination and method for treating solid cancer and blood cancer, including acute myeloid leukemia (AML). The method comprises the application of a truncated dominant negative form of galactose agglutinin 3.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗癌症的组合物和方法相关申请本申请要求于2016年3月14日提交的名称为“用于治疗癌症的组合物和方法”的美国临时专利申请序列号第62/308,045号的优选权，其公开内容通过引用整体并入本文。
技术介绍
半乳糖凝集素是S-型凝集素，其与含有β-半乳糖的糖缀合物结合。自从1975年在动物细胞中发现第一种半乳糖凝集素之后，已经分离出15种哺乳动物半乳糖凝集素，并且已经显示它们参与各种生物过程，例如细胞粘着、生长调节以及程序化细胞死亡。半乳糖凝集素还参与肿瘤的产生和进展，并且显示半乳糖凝集素-3(“Gal-3”)参与癌细胞粘着、转移、血管生成、侵入、生长以及化疗抗性。参见Ebrahim等人，“癌症中的半乳糖凝集素：致癌作用、诊断以及治疗(Galectinsincancer:carcinogenesis,diagnosisandtherapy)”，《转化医学年鉴(Ann.Transl.Med.)》2(9)：88(2014)。与其它半乳糖凝集素一样，Gal-3具有典型的C-端糖识别域(“CRD”)。但是与其它半乳糖凝集素不同，半乳糖凝集素-3还包括可赋予多价特征的氨基端结构域。氨基端结构域容许Gal-3与细胞表面上和细胞外基质中的含糖配体交联，从而调控细胞粘着和信号传导。Gal-3的C-端CRD不能独自与细胞表面上的含糖配体交联；在没有N-端结构域的情况下，C-端CRD不具有血凝反应活性，缺乏表征完整外源凝集素的协同性结合。已经证明保留C-端CRD但是缺乏氨基端多聚化结构域的重组表达的Gal-3蛋白的N-端截断物充当Gal-3介导的交联的显性负性抑制剂，在体外分析中干扰各种肿瘤相关的特性，并在各种人类癌症的动物模型中抑制肿瘤的生长和转移。因此这种N-端截断蛋白已经被建议用于治疗各种人类癌症。例如，一种这种截断物“Gal3C”已经被建议用于单独或者与化疗一起治疗乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌以及所有实体形式和血液形式的癌症，参见美国专利第6,770,622号；对于与像硼替佐米和卡非佐米这样的蛋白酶体抑制剂一起治疗多发性骨髓瘤，参见美国专利第9,272,014号；对于单独或者与像紫杉醇、卡铂或硼替佐米这样的化疗剂一起治疗卵巢癌，参见美国核准前出版物2015/0157691。美国核准前出版物2015/0216931描述了一小类N-端Gal-3截断蛋白，共同称作“Gal3M”，其与天然人类Gal-3相比含有一种或多种确认的氨基酸改变。预计重组表达的Gal3M蛋白可用来单独或者与蛋白酶体抑制剂(例如硼替佐米和卡非佐米)和其它化疗剂一起治疗实体瘤(包括癌和肉瘤)，以及范围广泛的血液癌(包括B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、NK细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性骨髓细胞白血病(“AML”)、急性淋巴细胞白血病(“ALL”)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性髓源性白血病(“CML”)以及骨髓增生异常综合征)。尽管显性负性的N-端Gal-3截断蛋白具有治疗前景，但是仍需要进一步对Gal-3显性负性的截断蛋白进行优化。并且，尽管显性负性的N-端Gal-3截断蛋白作为动物模型数据在特定的癌症中被广泛接受为预测在特定癌症中的疗效(参见(例如)Mirandola等人，“抗-半乳糖凝集素-3治疗：多发性骨髓瘤和卵巢癌的一个新的机会？(Anti-Galectin-3Therapy:AnewChanceforMultipleMyelomaandOvarianCancer？)”，《国际免疫学综述(Int.Rev.Immunol.)》，33：417-427(2014)；以及Pena等人，“半乳糖凝集素作为恶性血液肿瘤的治疗靶点：充满希望的甜蜜(Galectinsastherapeutictargetsforhematologicalmalignancies:ahopefulsweetness)”，《转化医学年鉴(Ann.Transl.Med.)》2(9)：87(2014))，但是基于被认为与另外的癌症共有的少量半乳糖凝集素-3介导的生物途径上的预测，提出显性负性的N-端Gal-3截断蛋白可外推至这些另外的癌症。因此，本领域需要确认N-端截断的Gal-3蛋白最终将会证明有效的所有癌症。
技术实现思路
在第一方面，提供了新的半乳糖凝集素-3N-端截断蛋白。在特定的实施例中，所述蛋白质具有氨基酸序列SEQ.IDNO.5(CBPI.001)或SEQ.IDNO.7(CBPI.002/Gal3M1)。在各种实施例中，新的N-端Gal-3截断蛋白包括天然Gal-3蛋白的残基108至250，以任意组合进一步包含Gal3M1(CBPI.002)中存在的取代中的一个、Gal3M1中存在的取代中的两个、Gal3M1中存在的取代中的三个、或者Gal3M1中存在的取代中的四个。在一些实施例中，新的N-端Gal-3截断蛋白包括天然Gal-3蛋白的残基109至250，以任意组合进一步包含Gal3M1(CBPI.002)中存在的取代中的零个、一个、两个、三个或四个。在一些实施例中，新的N-端Gal-3截断蛋白包括天然Gal-3蛋白的残基110至250，以任意组合进一步包含Gal3M1(CBPI.002)中存在的取代中的零个、一个、两个、三个或四个。在一些实施例中，新的N-端Gal-3截断蛋白包括天然Gal-3蛋白的残基111至250，以任意组合进一步包含Gal3M1(CBPI.002)中存在的取代中的零个、一个、两个、三个或四个。在一些实施例中，新的N-端Gal-3截断蛋白包括天然Gal-3蛋白的残基112至250，以任意组合进一步包含Gal3M1(CBPI.002)中存在的取代中的零个、一个、两个、三个或四个。在一些实施例中，新的N-端Gal-3截断蛋白包括天然Gal-3蛋白的残基113至250，以任意组合进一步包含Gal3M1(CBPI.002)中存在的取代中的零个、一个、两个、三个或四个。在再其它的实施例中，新的N-端Gal-3截断蛋白包括残基114至250、115至250、116至260、117至250、118至250、119至250、120至250、121至250、122至250、123至250或124至250，其中每个这种实施例任选地以任意组合包含Gal3M1(CBPI.002)中存在的取代中的一个、两个、三个或四个。在各种实施例中，与天然Gal-3蛋白相比，N-端截断蛋白在残基113、114、118以及248中的一个或多个残基处包括或进一步包括与Gal3M1中存在的那些取代不同的取代。在特定的实施例中，所述取代为保守取代。在一些实施例中，所述取代为半保守取代。在一些实施例中，与Gal3M1蛋白相比，N-端截断蛋白在残基113、114、118以及248中的一个或多个残基处包括或进一步包括取代。在特定的实施例中，所述取代为保守取代。在一些实施例中，所述取代为半保守取代。在各种实施例中，与天然Gal-3相比，N-端截断蛋白在除113、114、118以及248之外的残基处包括或进一步包括至少1个、2个、3个、4个、5个或更多个取代。在某些实施例中，与天然Gal-3相比，N-端截断蛋白在除113、114、118以及248(根据天然Gal-3进行编号)之外的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蛋白质，其具有氨基酸序列SEQ.ID NO.5或SEQ.ID NO.7。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.14 US 62/308,0451.一种蛋白质，其具有氨基酸序列SEQ.IDNO.5或SEQ.IDNO.7。2.一种蛋白质，其在序列上与SEQ.IDNO.5或SEQ.IDNO.7至少95％一致，其中各自与SEQIDNO.5或SEQIDNO.7不一致的所有残基与SEQIDNO.1相比均为保守取代，条件是所述蛋白质不具有序列SEQIDNO.：3。3.一种组合物，其包含：根据权利要求1或权利要求2所述的蛋白质。4.一种药物组合物，其包含：根据权利要求1或权利要求2所述的蛋白质，以及药学上可接受的载剂。5.一种多聚核苷酸，所述多聚核苷酸编码根据权利要求1或权利要求2所述的蛋白质。6.根据权利要求5所述的多聚核苷酸，其中所述多聚核苷酸包含具有序列SEQIDNO：6或SEQIDNO：8的区域。7.一种核酸载体，所述载体包含根据权利要求5或权利要求6所述的多聚核苷酸。8.根据权利要求7所述的核酸载体，其中所述多聚核苷酸包含具有所述核酸序列SEQIDNO：6或SEQIDNO：8的区域。9.根据权利要求7或权利要求8所述的核酸载体，其进一步包含表达控制元件。10.一种用于治疗癌症的方法，所述方法包含：给患有癌症的受试者施用治疗有效量的根据权利要求4所述的药物组合物。11.根据权利要求10所述的方法，其中所用量可有效降低癌细胞中为肿瘤生长或存活所必需的至少一种信号转导途径的活性。12.根据权利要求11所述的方法，其中所述信号转导途径选自由以下组成的群组：Ras、β-连环蛋白、Akt、胞外信号调节激酶(ERK)、c-JunN端激酶(JNK)以及CD44信号传导途径。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述信号转导途径为所述β-连环蛋白信号转导途径。14.根据权利要求12所述的方法，其中所述信号转导途径为所述CD44信号传导途径。15.根据权利要求10至14中任一项所述的方法，其中所述癌症为恶性血液肿瘤。16.根据权利要求15所述的方...

【专利技术属性】
技术研发人员：马乌里齐·芝瑞瓦因特尔纳提，莱昂纳多·米兰多拉，
申请(专利权)人：克罗米科股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US