果蔬中多种农残同时检测的方法技术

本发明专利技术涉及农残检测技术领域，提供了一种果蔬中多种农残同时检测的方法，包括样品处理：包括，提取和净化；建立标准曲线：将不同浓度的混合标准工作液分别上机检测，将测得的特征离子峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线；根据标准曲线计算所测样品中各农残的含量；上机检测方法为HPLC‑MS法。借此，本发明专利技术通过样品处理；建立标准曲线；最后根据标准曲线计算所测样品中各农残的含量。结果表明，方法操作简单、提取快捷、准确性高、重复性强,适用于水果蔬菜中同时检测阿维菌素及有机磷、氨基甲酸酯类农药残留量的分析测定。

【技术实现步骤摘要】
果蔬中多种农残同时检测的方法
本专利技术涉及农残检测
，尤其涉及一种果蔬中多种农残同时检测的方法。
技术介绍
阿维菌素是当前生物农药市场中最受欢迎产品之一。据中国农药毒性分级标准，阿维菌素属高毒杀虫剂。目前农产品的农药残留中，阿维菌素检测一直只有独立的检测方法，提取方法复杂检测效率低且不能同时与其他农残共同检测。综上可知，现有技术在实际使用上显然存在不便与缺陷，所以有必要加以改进。
技术实现思路
针对上述的缺陷，本专利技术的目的在于提供一种果蔬中多种农残同时检测的方法，通过样品处理；建立标准曲线；最后根据标准曲线计算所测样品中各农残的含量。结果表明，方法操作简单、提取快捷、准确性高、重复性强,适用于水果蔬菜中同时检测阿维菌素及有机磷、氨基甲酸酯类农药残留量的分析测定。为了实现上述目的，本专利技术提供一种果蔬中多种农残同时检测的方法，包括如下步骤：样品处理：包括，提取：称取20g样品于离心管中，加入7g氯化钠和20mL乙腈，漩涡混合后，10000r/min均质3min；之后4000r/min离心5min。取上清液10mL，40℃氮吹近干，残余物用含有2％二氯甲烷的甲醇溶液复溶；净化：将复溶液加载到活化后的固相萃取柱上，收集流出液；收集的流出液40℃氮吹近干，用甲醇溶液冲洗固相萃取柱后过0.22μm微孔滤膜；取过滤出的液体上机检测；建立标准曲线：等量移取相同浓度的标准农药溶液各100μL于10mL容量瓶中，甲醇定容至10mL，得浓度为1μg/mL混合标准工作液；将各浓度的混合标准工作液分别上机检测，将测得的特征离子峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线；根据标准曲线计算所测样品中各农残的含量；所述上机检测方法为HPLC-MS法。根据本专利技术的果蔬中多种农残同时检测的方法，所述上机检测包括：色谱条件色谱柱：C18色谱柱(1.9μm，100×2.1mm)；流动相：A:甲醇，C：添加0.2％甲酸水溶液的乙酸铵；流速：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：5μL；梯度洗脱；质谱条件：离子模式：ESI扫描方式：正离子模式。根据本专利技术的果蔬中多种农残同时检测的方法，所述农药为阿维菌素、氨基甲酸酯类及有机磷类。根据本专利技术的果蔬中多种农残同时检测的方法，所述农药为21种，分别为阿维菌素、氧化乐果、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、多菌灵、噻虫嗪、吡虫啉、克百威、3-羟基克百威、啶虫脒、灭多威、敌百虫、内吸磷、速灭威、甲萘威、异丙威、仲丁威、嘧霉胺、甲氨基阿维菌素及哒螨灵。根据本专利技术的果蔬中多种农残同时检测的方法，所述样品处理步骤中的甲醇溶液中含有2％的二氯甲烷。根据本专利技术的果蔬中多种农残同时检测的方法，所述样品处理步骤中，采用含有2％二氯甲烷的甲醇溶液冲洗固相萃取柱两次。根据本专利技术的果蔬中多种农残同时检测的方法，所述固相萃取柱为PSA柱。根据本专利技术的果蔬中多种农残同时检测的方法，所述固相萃取柱为氨基石墨复合柱。根据本专利技术的果蔬中多种农残同时检测的方法，所述梯度洗脱条件见表1。本专利技术的目的在于提供一种果蔬中多种农残同时检测的方法，通过从样品前处理入手，考察了不同提取液对实验结果的影响；其次，分析了固相萃取的最优化方法；最后，从检测模式、目标离子选择、流动相的选择和配比三个方向对实验条件进行探索和优化。通过建立线性方程及线性范围，回收率和精密度的测定，进行定量分析，从而找到最佳的实验方法，提高检测效率。结果表明，方法操作简单、提取快捷、准确性高、重复性强,适用于水果蔬菜中同时检测阿维菌素及有机磷、氨基甲酸酯类农药残留量的分析测定。附图说明图1是本专利技术的阿维菌素的典型色谱图；图2是本专利技术的氧化乐果的典型色谱图；图3是本专利技术的涕灭威的典型色谱图；图4是本专利技术的涕灭威砜的典型色谱图；图5是本专利技术的涕灭威亚砜的典型色谱图；图6是本专利技术的多菌灵的典型色谱图；图7是本专利技术的噻虫嗪的典型色谱图；图8是本专利技术的吡虫啉的典型色谱图；图9是本专利技术的克百威的典型色谱图；图10是本专利技术的3-羟基克百威的典型色谱图；图11是本专利技术的啶虫脒的典型色谱图；图12是本专利技术的灭多威的典型色谱图；图13是本专利技术的敌百虫的典型色谱图；图14是本专利技术的内吸磷的典型色谱图；图15是本专利技术的速灭威的典型色谱图；图16是本专利技术的甲萘威的典型色谱图；图17是本专利技术的异丙威的典型色谱图；图18是本专利技术的仲丁威的典型色谱图；图19是本专利技术的嘧霉胺的典型色谱图；图20是本专利技术的甲氨基阿维菌素的典型色谱图；图21是本专利技术的哒螨灵的典型色谱图。具体实施方式为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。本专利技术提供一种果蔬中多种农残同时检测的方法，包括如下步骤：样品处理：包括，提取：称取20g样品于离心管中，加入7g氯化钠和20mL乙腈，漩涡混合后，10000r/min均质3min；之后4000r/min离心5min。取上清液10mL，40℃氮吹近干，残余物用含有2％二氯甲烷的甲醇溶液复溶；净化：将复溶液加载到活化后的固相萃取柱上，收集流出液；收集的流出液40℃氮吹近干，用甲醇溶液冲洗固相萃取柱后过0.22μm微孔滤膜；更好的，本专利技术采用含有2％二氯甲烷的甲醇溶液冲洗固相萃取柱两次，以便将有效成分洗出。取过滤出的液体上机检测；建立标准曲线：等量移取浓度为100μg/mL的标准农药溶液各100μL于10mL容量瓶中，甲醇定容至10mL，得浓度为1μg/mL混合标准工作液；将各浓度的混合标准工作液分别上机检测，将测得的特征离子峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线；根据标准曲线计算所测样品中各农残的含量；本专利技术的上机检测方法为HPLC-MS法。实施例本专利技术采用前述方法选用苹果或白菜样品进行多种农药的标准曲线的建立。选用农药为阿维菌素、氨基甲酸酯类及有机磷类。具体选择21种，分别为阿维菌素、氧化乐果、涕灭威、涕灭威砜、涕灭威亚砜、多菌灵、噻虫嗪、吡虫啉、克百威、3-羟基克百威、啶虫脒、灭多威、敌百虫、内吸磷、速灭威、甲萘威、异丙威、仲丁威、嘧霉胺、甲氨基阿维菌素及哒螨灵。本专利技术使用的仪器和设备包括：液相色谱质谱联用仪TSQQuantumUltra；C18色谱柱(100×2.1mm,1.9μmparticlesize，ThermoFisherScientific公司)；冷冻离心机；固相萃取装置(安捷伦科技公司)；全自动均质器(厦门睿科)；电子天平；旋涡混合器；氮吹仪。上机检测包括：色谱条件色谱柱：C18色谱柱(1.9μm，100×2.1mm)；流动相：A:甲醇，C：添加0.2％甲酸水溶液的乙酸铵；流速：0.3mL/min；柱温：40℃；进样量：5μL；梯度洗脱；质谱条件：离子模式：ESI扫描方式：正离子模式。本专利技术的梯度洗脱条件见表1。表1梯度洗脱专利技术人考察了柱温为25℃、30℃、35℃和40℃时各组分的分离效果,发现柱温在此范围内均能有效分离，随着温度升高，出峰时间略微缩短，但柱温为40℃时各组分的峰形尖锐且分离度较好,因此选择柱温为40℃。提取剂的优化专利技术人提取剂尝试了丙酮、甲醇、乙腈、二氯甲烷，由于各类目标物在不同溶剂中的溶解度不同，本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种果蔬中多种农残同时检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：样品处理：包括，提取：称取20g样品于离心管中，加入7g氯化钠和20mL乙腈，漩涡混合后，10000r/min均质3min；之后4000r/min离心5min。取上清液10mL，40℃氮吹近干，残余物用含有2％二氯甲烷的甲醇溶液复溶；净化：将复溶液加载到活化后的固相萃取柱上，收集流出液；收集的流出液40℃氮吹近干，用甲醇溶液冲洗固相萃取柱后过0.22μm微孔滤膜；取过滤出的液体上机检测；建立标准曲线：等量移取浓度为100μg/mL的标准农药溶液各100μL于10mL容量瓶中，甲醇定容至10mL，得浓度为1μg/mL混合标准工作液；将各浓度的混合标准工作液分别上机检测，将测得的特征离子峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线；根据标准曲线计算所测样品中各农残的含量；所述上机检测方法为HPLC‑MS法。

【技术特征摘要】
1.一种果蔬中多种农残同时检测的方法，其特征在于，包括如下步骤：样品处理：包括，提取：称取20g样品于离心管中，加入7g氯化钠和20mL乙腈，漩涡混合后，10000r/min均质3min；之后4000r/min离心5min。取上清液10mL，40℃氮吹近干，残余物用含有2％二氯甲烷的甲醇溶液复溶；净化：将复溶液加载到活化后的固相萃取柱上，收集流出液；收集的流出液40℃氮吹近干，用甲醇溶液冲洗固相萃取柱后过0.22μm微孔滤膜；取过滤出的液体上机检测；建立标准曲线：等量移取浓度为100μg/mL的标准农药溶液各100μL于10mL容量瓶中，甲醇定容至10mL，得浓度为1μg/mL混合标准工作液；将各浓度的混合标准工作液分别上机检测，将测得的特征离子峰面积为纵坐标，对应的标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线；根据标准曲线计算所测样品中各农残的含量；所述上机检测方法为HPLC-MS法。2.根据权利要求1所述的果蔬中多种农残同时检测的方法，其特征在于，所述上机检测包括：色谱条件色谱柱：C18色谱柱(1.9μm，100×2.1mm)；流动相：A:甲醇，C：添加0.2％甲酸水溶液的乙酸铵；流速：0.3mL/min...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯超，王兆全，王向阳，李世娟，
申请(专利权)人：昌邑市检验检测中心，
类型：发明
国别省市：山东,37