一种甜菜黄素的生物生产方法技术

本发明专利技术公开了一种甜菜黄素的生物生产方法，包括如下步骤：合成具有两个Ptrc启动子的高拷贝表达载体pHTrc，合成4,5‑多巴雌二醇双加氧酶基因syndoda，从大肠杆菌BL2l(DE3)中克隆得到內源酪氨酸羟化酶基因HpaBC；将基因syndoda和HpaBC与表达载体连接，得到重组表达载体pHTDH，并转化到高产L‑酪氨酸的菌株SyBE‑002444中得到重组大肠杆菌BTX1；将活化的BTX1接种到添加卡那霉素的LB培养基中培养，加入IPTG诱导，饲喂组氨酸、赖氨酸或精氨酸，继续发酵培养，得到甜菜黄素。本发明专利技术利用游离诱导表达进行发酵生产不同种类甜菜黄素，解决单一种类的甜菜黄素难以获得的问题。

A Biological Production Method of Betain Flavin

The invention discloses a biological production method of betaflavin, which comprises the following steps: synthesizing a high-copy expression vector pHTrc with two Ptrc promoters, syndoda of 4,5_dopaestradiol dioxygenase gene, cloning an endogenous tyrosine hydroxylase gene HpaBC from E.coli BL2l (DE3); connecting genes syndoda and HpaBC with the expression vector to obtain a recombinant expression vector P. HTDH was transformed into L tyrosine-producing strain SyBE 002444 to obtain recombinant E. coli BTX1. Activated BTX1 was inoculated into Kanamycin-supplemented L B medium and cultured in IPTG induction. Histidine, lysine or arginine were fed and fermented to obtain betaine. The invention utilizes free induced expression to ferment to produce different kinds of betaflavin, and solves the problem that a single kind of betaflavin is difficult to obtain.

【技术实现步骤摘要】
一种甜菜黄素的生物生产方法
本专利技术属于生物医药
，涉及产甜菜黄素的重组菌及构建方法及用途。
技术介绍
甜菜黄素(betaxanthin)是甜菜素(betAin)的一种黄色形式，通常用作食品添加剂、化妆品着色剂，同时兼具抗氧化、抗肿瘤、保肝等生物活性和潜在的保健医用价值。到目前为止工业上甜菜素产品绝大部分仍停留在植物提取，天然可食用甜菜素的来源更是限定在甜菜和苋菜中，这也造成了商品化的甜菜素种类匮乏且纯度不高。现今能够获得的甜菜素产品多为红甜菜根提取物，而不同种类的甜菜黄素基本上没有实现商品化，仅仅存在于实验室小规模制备，这不利于促进甜菜素类天然药物和食品添加剂的大规模创新开发和应用。大多数国家食品添加剂都受着严格地管制，在食品和制药行业中，天然色素的利用引起越来越多的关注。甜菜素作为一种安全无毒害的天然色素，常用作食品添加剂来为食品提供颜色，并作为花青素替代品。它的抗氧化、预防肿瘤、降低血脂、缓解肌肉疲劳等作用具有重要的保健价值。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足，提供一种甜菜黄素的生物生产方法。本专利技术的技术方案概述如下：一种甜菜黄素的生物生产方法，包括如本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种甜菜黄素的生物生产方法，其特征是包括如下步骤：(1)设计并全合成具有两个Ptrc启动子的高拷贝表达载体pHTrc，所述pHTrc的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；人工全合成4,5‑多巴雌二醇双加氧酶基因syndoda，所述基因syndoda的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；从大肠杆菌BL2l(DE3)中克隆得到內源酪氨酸羟化酶基因HpaBC，所述基因HpaBC的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；(2)将所述基因syndoda通过酶切连接方式与表达载体pHTrc的第一套启动子连接，得到重组表达载体pHTD；将所述基因HpaBC通过酶切连接方式与表达载体pHTD的第二...

【技术特征摘要】
1.一种甜菜黄素的生物生产方法，其特征是包括如下步骤：(1)设计并全合成具有两个Ptrc启动子的高拷贝表达载体pHTrc，所述pHTrc的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示；人工全合成4,5-多巴雌二醇双加氧酶基因syndoda，所述基因syndoda的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示；从大肠杆菌BL2l(DE3)中克隆得到內源酪氨酸羟化酶基因HpaBC，所述基因HpaBC的核苷酸序列如SEQIDNo.5所示；(2)将所述基因syndoda通过酶切连接方式与表达载体pHTrc的第一套启动子连接，得到重组表达载体pHTD；将所述基因HpaBC通过酶切连接方式与表达载体pHTD的第二套启动子连接，得到重组表达载体pHTDH；(3)将重组表达载体pHTDH转化到高产L-酪氨酸的菌株SyBE-002444中，对单克隆筛选，获得产甜菜黄素的重组大肠杆菌BTX1；(4)将产甜菜黄素的重组...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵广荣，侯亚男，于思礼，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津,12